Procedimiento para el diagnóstico de una enfermedad que implica un anticuerpo antirreceptor de la endotelina.

Procedimiento para diagnosticar una enfermedad, en el que la presencia o ausencia de un anticuerpoantirreceptor de la endotelina es determinada en una muestra de un paciente que va a diagnosticarse y en el que lapresencia de un anticuerpo antirreceptor de la endotelina indica la enfermedad,

en el que la enfermedad seselecciona de entre el grupo constituido por el rechazo a un injerto y la esclerosis sistémica.

Procedimiento para el diagnóstico de una enfermedad que implica un anticuerpo antirreceptor de la endotelina.

La presente invención pertenece al ámbito biológico, químico, más particularmente, inmunológico, así como también al diagnóstico y terapéutico, más en particular al campo del diagnóstico del rechazo de un trasplante, y de la esclerosis sistémica.

Para el trasplante exitoso de los órganos, se requiere que el órgano del donante sea compatible histológicamente tanto como sea posible, con el tejido del receptor. Dicha coincidencia está determinada por el sistema HLA (antígeno leucocitario humano) , que consiste en un sistema complejo de antígenos tisulares que se encuentra virtualmente en cualquier célula. Dicho sistema juega un papel fisiológico importante en las reacciones inmunológicas de defensa (reconocimiento del “mismo” y del “no mismo”) . Antes de cada trasplante, por tanto, se lleva a cabo un denominado “tipaje tisular” en el órgano donador y receptor, de forma que se asegura lo más posible la complementación del HLA.

Como resultado del inmenso polimorfismo genético, existe un número excepcionalmente grande de diversas moléculas HLA. Sólo se observa una complementación completa en los gemelos monocigóticos. Por otro lado, las moléculas HLA son únicas para cada persona.

Sin embargo, existen problemas porque las reacciones de rechazo contra el órgano trasplantado no pueden ser descartadas, a pesar de la extensa complementación de HLA entre receptores y donantes.

WO 02/093171 da a conocer una invención que se refiere a la utilización de AT1 o de sus péptidos funcionalmente análogos o proteínas para predecir (diagnosticar) el riesgo de rechazo del trasplante.

Es todavía necesario proporcionar un procedimiento eficiente y de confianza que permita una predicción rápida y positiva del riesgo de una reacción de rechazo al trasplante.

Colagenosis es un término para un grupo de enfermedades autoinmunes raras. En éstas el organismo crea anticuerpos contra partes del tejido conjuntivo. La colagenosis comprende enfermedades Comprende enfermedades como SLE, lupus sistémico, granulomatosis de Wegener y síndromes CREST y SHARP. La colagenosis es difícil de diagnosticar. Por tanto, es necesaria una herramienta para diagnosticarla.

Aproximadamente, 100 millones de personas en Europa sufren de alguna forma de enfermedad reumatoide degenerativa o inflamatoria, lo que provoca que el impacto de estas enfermedades en las sociedades europeas sea arrollador para éstas. Las enfermedades de las articulaciones significan la mitad de la totalidad de las situaciones crónicas en las personas de 65 años y mayores.

La calidad de vida de aproximadamente el 7, 5% de la población europea es grave y se ve permanentemente reducida por el dolor y la incapacidad funcional provocados por las enfermedades reumáticas. Las consecuencias más notables de estas enfermedades, por el momento, incurables, son la inmovilidad y la esperanza vital disminuida. Sólo en Europa, las enfermedades reumáticas imponen una carga económica de más de 200 billones de euros al año. En verdad, el impacto de las enfermedades reumáticas como una carga económica y social aumentará notablemente cuando la población europea envejezca. Una nueva terapia que consiste en poner el énfasis en las moléculas implicadas en la patogénesis de las enfermedades inflamatorias crónicas, se ha desarrollado recientemente. A pesar de estos esfuerzos, no es posible todavía curar la mayoría de las enfermedades reumáticas. Un reto terapéutico incluye la cronicidad de la inflamación, la autoinmunidad, y la degeneración del sistema muscular esquelético. Aunque las enfermedades reumáticas difieren en su inmunoenfermedad, comparten mecanismos comunes de iniciación y perpetuación. Además, existe una potencial translacional considerable para la comprensión de otras enfermedades que implican al sistema inmune, por ejemplo, las enfermedades autoinmunes, las alergias y las infecciones. La diversidad de enfermedades reumáticas, la multiplicidad de los tejidos implicados, es decir, los huesos, cartílagos, articulaciones, riñón, piel, vasos sanguíneos, así como el enfoque multidisciplinario, requieren entender la base molecular de estas enfermedades y esto hace que su diagnóstico sea muy difícil de llevar a cabo.

El diagnóstico de la artritis y de otras enfermedades reumáticas es a menudo difícil, pues, entre las diversas enfermedades, muchos síntomas son similares. Para llevar a cabo un diagnóstico fiable, un médico puede necesitar llevar a cabo una revisión del historial médico, realizar un examen físico, obtener análisis de laboratorio, pruebas con rayos X y otros ensayos de obtención de imágenes. Las enfermedades reumáticas, son por ejemplo, la artritis reumatoide, la fibromialgia, el lupus eritematoso, la polimialgia reumática, la esclerosis sistémica progresiva, el síndrome de Sjögren, el lupus eritematoso sistémico y la inflamación de las articulaciones.

El American College of Rheumatology ha definido (1987) varios criterios para el diagnóstico de, por ejemplo, artritis reumatoide; rigidez matutina de más de una hora, artritis y el hinchamiento del tejido blando de más de 3 de 14 grupos de articulaciones/articulación, la artritis de los dedos de la mano, la artritis simétrica, los nódulos subcutáneos en señalizaciones específicas, un factor reumatoide superior a un nivel de 95 th/% y cambios radiológicos que

sugieren erosión de la articulación. Al menos, deben cumplirse cuatro criterios para establecer el diagnóstico, aunque muchos pacientes son tratados a pesar de no cumplir con estos criterios. Cuando se sospecha clínicamente de artritis reumatoides son necesarios estudios inmunológicos tales como el factor reumatoide (RF, un anticuerpo específico) . Un RF negativo no descarta la artritis reumatoide. Recientemente, se ha desarrollado un nuevo ensayo serológico, que detecta la presencia de anticuerpos de una proteína denominada anti-citrulinada (ACP) . Como RF, este ensayo puede detectar aproximadamente el 80% de todos los pacientes RA, pero es raramente positiva en los pacientes no-RA. Asimismo, se llevan a cabo habitualmente otros varios análisis de sangre para investigar otras causas de la artritis, tal como el lupus eritematoso. Dichos análisis incluyen la velocidad de sedimentación globular (ESR) , la proteína c-reactiva, el contaje sanguíneo total, la función renal, ensayos inmunológicos y de enzimas hepáticas, por ejemplo, se llevan a cabo en esta etapa todos los ensayos para anticuerpos antinucleares/ANA.

Tal como se ha indicado, para la artritis reumatoide, como una enfermedad entre las de la familia de las reumáticas, el diagnóstico en este ámbito de enfermedades, es difícil. Por tanto es necesarios disponer de un diagnóstico más seguro y fiable.

La presente invención muestra la necesidad de una herramienta diagnóstica para el rechazo del injerto y la esclerosis sistémica.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a un procedimiento para el diagnóstico de una enfermedad en la que, la presencia o ausencia del anticuerpo antirreceptor de la endotelina se determina en una muestra procedente de un paciente que va a diagnosticarse. La presencia de un anticuerpo antirreceptor de la endotelina indica la enfermedad. En una forma de realización de la invención, el anticuerpo antirreceptor de la endotelina es un anticuerpo A antirreceptor de la endotelina. La enfermedad es seleccionada a partir del grupo de rechazo del injerto y de la esclerosis sistémica.

Los inventores encontraron que el 95% de los pacientes con rechazo del injerto, fueron positivos respecto a la presencia del anticuerpo de la antiendotelina, mientras que en los pacientes sin rechazo del injerto sólo el 6, 2% mostraron un anticuerpo de la antiendoletina detectable.

En una forma de realización preferida de la invención, la determinación de la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor de la endotelina se lleva a cabo detectando uno o más de los anticuerpos seleccionados de entre el grupo constituido por los anticuerpos IgA; anticuerpo IgG y anticuerpo IgM y más particularmente los anticuerpos IgG1, IgG2, IgG3 y IgG4.

En una forma de realización de la invención, ésta se refiere a un inmunoensayo. Existen varias formas de llevar a cabo un inmunoensayo en una forma de realización preferida de la invención,... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento para diagnosticar una enfermedad, en el que la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor de la endotelina es determinada en una muestra de un paciente que va a diagnosticarse y en el que la

presencia de un anticuerpo antirreceptor de la endotelina indica la enfermedad, en el que la enfermedad se selecciona de entre el grupo constituido por el rechazo a un injerto y la esclerosis sistémica.

2. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el anticuerpo antirreceptor de la endotelina es un anticuerpo A

antirreceptor de la endotelina. 10

3. Procedimiento según la reivindicación 1 ó 2, en el que la determinación de la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor de la endotelina se lleva a cabo detectando uno o más de los anticuerpos seleccionados de entre el grupo constituido por el anticuerpo IgA, el anticuerpo IgG y el anticuerpo IgM.

4. Procedimiento según la reivindicación 3, en el que uno o más de los anticuerpos se seleccionan de entre el grupo constituido por IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4.

5. Procedimiento según las reivindicaciones 1 a 4, en el que el inmunoensayo se selecciona de entre el grupo constituido por inmunoprecipitación, inmunoensayo enzimático (EIA) , radioinmunoensayo (RIA) o inmunoensayo

fluorescente, un ensayo quimioluminiscente, un ensayo de aglutinación, un ensayo nefelométrico, un ensayo turbidimétrico, un ensayo Western Blot, un inmunoensayo competitivo, un inmunoensayo no competitivo, un inmunoensayo homogéneo, un inmunoensayo heterogéneo, un bioensayo y un ensayo de delator, tal como un ensayo de la luciferasa.

6. Procedimiento según la reivindicación 5, en el que el inmunoensayo es un ELISA.

7. Utilización de un péptido receptor de la endotelina para el diagnóstico de una enfermedad seleccionada de entre el grupo constituido por el rechazo al injerto y la esclerosis sistémica, siendo diagnosticada la enfermedad mediante la determinación de la presencia o ausencia de un anticuerpo antirreceptor de la endotelina en una muestra

procedente de un paciente que va a diagnosticarse.

8. Utilización según la reivindicación 7, en la que el péptido receptor de la endotelina es un péptido A receptor de la endotelina.

9. Utilización de un kit de investigación y/o diagnóstico destinado al diagnóstico in vitro de una enfermedad seleccionada de entre el grupo constituido por el rechazo a un injerto y la esclerosis sistémica, en el que el kit incluye un péptido receptor de la endotelina o su análogo funcional.