PROCEDIMIENTO DE DETECCION DE UNA MOLECULA ADN DIANA.

Un procedimiento para detectar la presencia de una molécula de ADN diana específica que comprende: a) proporcionar: i) un ácido nucleico diana que tiene una región 3'' adyacente a y secuencia abajo de una región 5''; ii) un primer oligonucleótido que comprende una porción que es complementaria con dicha región 3'' de dicho ácido nucleico diana

, y iii) un segundo oligonucleótido, que comprende una porción 3'' y una porción 5'', en el que dicha porción 3'' de dicho segundo oligonucleótido es complementaria con dicha región 5'' de dicho ácido nucleico diana, y en el que dicha porción 5'' de dicho segundo oligonucleótido no es complementaria con dicho ácido nucleico diana, proporcionando de esta manera un brazo de hebra única en el extremo 5'' de dicho segundo oligonucleótido; b) mezclar dicho ácido nucleico diana, dicho primer oligonucleótido y dicho segundo oligonucleótido bajo condiciones en las que dicho primer oligonucleótido y dicha porción 3'' de dicho segundo oligonucleótido se alineancon dicha secuencia de ADN diana para crear una primera estructura de escisión; c) proporcionar un medio de escisión bajo condiciones tales que la escisión de dicha primera estructura de escisión se produzca de preferencia en un sitio localizado dentro de dicho segundo oligonucleótido de una manera dependiente de la alineación de dichos primer y segundo oligonucleótidos sobre dicho ácido nucleico diana, liberando de esta manera el brazo de hebra única de dicho segundo oligonucleótido para generar un tercer oligonucleótido; d) proporcionar una primera estructura de horquilla que tiene un brazo 3'' de hebra única y un brazo 5'' de hebra única bajo condiciones en las que dicho tercer oligonucleótido se alinea con dicho brazo 3'' de hebra única de dicha primera horquilla, creando de esta manera una segunda estructura de escisión; e) proporcionar condiciones bajo las que la escisión de dicha segunda estructura de escisión se produzca por medio de dichos medios de escisión de una manera dependiente de la alineación de dicho tercer oligonucleótido, liberando de esta manera el brazo 5'' de hebra única de dicha segunda estructura de escisión para crear productos de reacción que comprenden un cuarto oligonucleótido y una primera molécula de detección de horquilla escindida, y f) detectar la presencia de dicho cuarto oligonucleótido o dicha primera molécula de detección de horquilla escindida.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: THIRD WAVE TECHNOLOGIES, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 502 SOUTH ROSA ROAD,MADISON, WI 53719.

Inventor/es: LYAMICHEV, VICTOR I., BROW, MARY ANN D., DAHLBERG,JAMES.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 6 de Junio de 1994.

Fecha Concesión Europea: 19 de Septiembre de 2007.

Clasificación PCT:

  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS;... > C07H21/00 (Compuestos que contienen al menos dos unidades mononucleótido que tienen cada una grupos fosfato o polifosfato distintos unidos a los radicales sacárido de los grupos nucleósido, p. ej. ácidos nucleicos)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS... > Procesos de medida, investigación o análisis en... > C12Q1/68 (en los que intervienen ácidos nucleicos)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas... > Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas;... > C07K14/47 (de mamíferos)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones... > C12N9/12 (transfieren grupos que contienen fósforo, p. ej. Quinasas (2.7))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/55 (Hidrolasas (3))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que... > C12N1/21 (modificados por la introducción de material genético extraño)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones... > C12N9/14 (Hidrolasas (3.))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS... > Procesos de medida, investigación o análisis en... > C12Q1/70 (en los que intervienen virus o bacteriófagos)

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda.

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