Composiciones y métodos para prevenir la arritmia cardiaca.

Una composición que comprende una matriz extracelular de mamífero para usar en la prevención de la fibrilación auricular o fibrilación ventricular en donde la composición se administra a una abertura en el saco pericárdico del corazón

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Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2010/024441.

Solicitante: Cormatrix Cardiovascular, Inc.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1615 Village Square Boulevard Suite 5 Tallahassee, FL 32309 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: MATHENY, ROBERT G., LEWIS,BEECHER C.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Medicamentos para el tratamiento de trastornos en... > A61P9/06 (Antiarrítmicos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen sustancias... > A61K35/36 (Piel; Sistema piloso; Uñas; Glándulas sebáceas; Cerumen; Epidermis; Células epiteliales; Queratinocitos; Células de Langerhans; Células del ectodermo (islotes de Langerhans A61K 35/39))
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen sustancias... > A61K35/34 (Músculos; Células del músculo liso; Corazón; Células madre cardiacas; Mioblastos; Miocitos; Cardiomiocitos (músculo liso vascular A61K 35/44))
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Texto extraído del PDF original:

De acuerdo con el propósito de esta invención, como se describe ampliamente en la presente descripción y modalidades, esta invención se relaciona con las composiciones para uso en la prevención de la fibrilación auricular o ventricular en un sujeto. Las ventajas adicionales de las composiciones descritas serán expuestas en parte en la descripción que sigue, y en parte se desprenderán de la descripción, o pueden aprenderse mediante la práctica de las composiciones descritas. Las ventajas de las composiciones descritas se entenderán y cumplirán a través de los elementos y combinaciones indicados particularmente en las reivindicaciones adjuntas. Debe entenderse que tanto la descripción general anterior como la descripción detallada siguiente son sólo ilustrativas y explicativas y no son restrictivas de la invención reivindicada.

Descripción detallada Las composiciones descritas pueden entenderse más fácilmente como referencia de la siguiente descripción detallada de las modalidades particulares, e incluirse el Ejemplo en ella o en la descripción siguiente.

Se describen los materiales, composiciones y componentes que se puede usar en, se pueden usar en conjunto con, se pueden usar en la preparación de o son productos de las composiciones descritas. Estos y otros materiales se describen en la presente, y se entiende que cuando las combinaciones, subconjuntos, interacciones, grupos, etc. de estos materiales se describen mientras que la referencia específica de varias combinaciones individuales y colectivas y permutación de estos compuestos no pueden describirse explícitamente, cada uno se contempla y describe específicamente en la presente descripción. Por ejemplo, si un péptido se describe y discute y se discuten una serie de modificaciones que se pueden hacer a una serie de moléculas que incluyen el péptido, todas y cada combinación y permutación de péptido y las modificaciones que sean posible están específicamente contempladas a menos que se indique específicamente lo contrario. Así, si se describen una clase de las moléculas A, B y C, así como una clase de moléculas D, E, y F y se describe un ejemplo de una combinación de molécula, AD, incluso después, si cada una no se enumera individualmente, cada una se contemplará individual y colectivamente. Así, en este ejemplo, se contemplan específicamente cada una de las combinaciones A-E, A-F, B-D, B-E, B-F, C-D, C-E, y C-F y deben considerarse descritas a partir de la descripción de A, B y C; D, E, y F; y el ejemplo de combinación A-D. Del mismo modo, cualquier subconjunto o combinación de estas se contempla y describe específicamente también. Así, por ejemplo, se contemplan específicamente el subgrupo de A-E, B-F, y C-E y deben considerarse descritos a partir de la descripción de A, B, y C; D, E, y F; y el ejemplo de combinación A-D. Este concepto se aplica a todos los aspectos de esta solicitud, que incluyen, pero no se limitan a, las etapas en los métodos para fabricar y usar las composiciones descritas. Así, existen una gran variedad de etapas adicionales que se pueden realizar, se entiende que cada una de estas etapas adicionales se puede realizar con cualquier modalidad específica o combinación de modalidades de los métodos descritos, y que cada combinación de ese tipo se contempla específicamente y debe considerarse descrita.

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   Aquellos con experiencia en la técnica reconocerán, o serán capaces de determinar usando no más que la experimentación de rutina, numerosos equivalentes para las modalidades específicas de las composiciones descritas en la presente descripción. Se pretende que esos equivalentes se incluyan en las reivindicaciones siguientes.

Se entiende que las composiciones descritas no se limitan a la metodología, protocolos y reactivos particulares descritas, ya que estas pueden variar. Se deberá entender además que la terminología que se usa en la presente descripción es para el propósito de describir modalidades particulares solamente, y no pretende ser limitante del alcance de la presente invención la cual se limitará solamente por las reivindicaciones anexas.

A. Definiciones A menos que se especifique lo contrario, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente tienen el mismo significado que el conocido comúnmente por aquellos con experiencia en la técnica a la que pertenecen las composiciones descritas. Si bien pueden usarse los métodos y materiales similares o equivalentes a los descritos en la presente descripción en la práctica o prueba de las presentes composiciones, los métodos particularmente útiles, dispositivos, y materiales son como los descritos. Nada debe interpretarse en la presente descripción como una admisión de que la presente invención no tiene derecho a preceder dicha descripción en virtud de una invención anterior. No se realiza la admisión de que alguna referencia constituye el arte anterior. La discusión de las referencias declara lo que afirman sus autores, y los solicitantes se reservan el derecho de cuestionar la exactitud y pertinencia de los documentos citados. Se debe destacar que, como se usa en la presente y en las reivindicaciones anexas, las formas del singular “uno" "una y "el/la" incluyen referencias del plural a menos que el contexto claramente establezca lo contrario. Así, por ejemplo, la referencia al "compuesto" incluye una pluralidad de tales compuestos, la referencia al "compuesto" es una referencia a uno o más compuestos y equivalentes de éstos conocidos por aquellos con experiencia en la técnica, y así sucesivamente. "Opcional" u "opcionalmente" significa que el evento, circunstancia, o material descrito posteriormente puede o no ocurrir o estar presente, y que la descripción incluye ejemplos en donde el evento, circunstancia, o material ocurre o está presente y los ejemplos donde esto no ocurre o no está presente. Los intervalos en la presente descripción se pueden expresar como de "aproximadamente" un valor particular y/o hasta "aproximadamente" otro valor particular. Cuando un intervalo de este tipo se expresa, otra modalidad incluye desde un valor particular y/o hasta otro valor particular. Del mismo modo, cuando los valores se expresan como aproximaciones, mediante el uso del antecedente "aproximadamente" se entenderá que el valor particular forma otra modalidad. Se entenderá más aun que los puntos finales de cada uno de los intervalos son significativos tanto en relación con el otro punto final, y independientemente del otro punto final. Se entiende además que hay una serie de valores descritos en la presente, y que cada valor se describe además en la presente como "aproximadamente" ese valor particular, adicionalmente del propio valor. Por ejemplo, si se describe el valor "10", después, "aproximadamente 10" se describe también. Se entiende además que cuando se describe el valor que es "menor que o igual a" el valor, " mayor que o igual al valor" se describen también posibles intervalos entre los valores, como entendido adecuadamente por el técnico con experiencia. Por ejemplo, si se describe el valor "10 ", después "menor que o igual a 10", así como "mayor que o igual a 10" se describe también. Se entiende además que a través de toda la solicitud, los datos se proporcionan en una serie de diferentes formatos, y que estos datos representan los puntos finales y puntos de inicio, e intervalos para cualquier combinación de puntos de datos. Por ejemplo, si un punto de datos particular "10" y un punto de datos particular 15 se describen, se entiende que mayor que, mayor que o igual a, menor que, menor que o igual a, e igual a 10 y 15 se consideran descritos, así como entre 10 y 15. Se entiende además que cada unidad entre dos unidades particulares se describe también. Por ejemplo, si 10 y 15 se describen, entonces 11, 12, 13, y 14 se describen también.

A través de toda la descripción y reivindicaciones de esta especificación, la palabra "comprende" y variaciones de la palabra, tal como "que comprende" y "comprende," significan" que incluyen pero no se limitan a", y no se pretende excluir, por ejemplo, otros aditivos, componentes, enteros o etapas.

B. Composiciones Se describen en la presente composiciones para su uso en la prevención de una arritmia cardiaca en un sujeto. El uso puede comprender administrar al tejido cardíaco del sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una matriz extracelular de mamífero (ECM).

En algunos aspectos, la ECM de mamífero se deriva de una fuente nativa. En algunos aspectos, la ECM de mamífero se produce in vitro usando células de mamífero. En algunos aspectos, la ECM de mamífero se extrae directamente de los tejidos/órganos de mamíferos. En algunos aspectos, la composición que comprende ECM de mamífero y además comprende la ECM sintética.

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   En algunos aspectos, la composición que comprende la ECM de mamífero inhibe la formación de la cicatriz. En algunos aspectos, la composición que comprende la ECM de mamífero favorece la regeneración del tejido dañado. En algunos aspectos, la composición que comprende la ECM de mamífero inhibe la inflamación.

Por "prevenir" o "que previene" se entiende reducir la frecuencia o severidad de una enfermedad o afección. El término no requiere una preclusión absoluta de la enfermedad o afección. En su lugar, este término incluye disminuir la probabilidad de ocurrencia de la enfermedad. Así, se describen composiciones que comprenden una ECM de mamífero para su uso en la reducción de la ocurrencia y/o severidad de una arritmia cardiaca en un sujeto.

El término "terapéuticamente eficaz" significa que la cantidad de la composición usada es la cantidad suficiente para mejorar una o más causas, síntomas, o secuelas de la enfermedad o trastorno. Esta mejora sólo requiere una reducción o alteración, no necesariamente la eliminación, de la causa, síntoma, o secuela de la enfermedad o trastorno.

Como se usa en la presente, el término "tejido cardíaco" incluye el miocardio, el epicardio, endocardio y el pericardio del corazón. El término como se utiliza en la presente, se refiere además a los grandes vasos que conducen hacia o desde el corazón El término como se utiliza en la presente se refiere además a porciones del nervio vago que inervan el corazón Así, el uso comprende la administración de la composición que comprende una ECM de mamífero para el corazón del sujeto. Particularmente, el uso comprende la administración de la composición que comprende una ECM de mamífero para el pericardio del sujeto. Como se usa en la presente descripción, el término "sujeto" significa cualquier persona que sea el objetivo de la administración. El sujeto puede ser un vertebrado, por ejemplo, un mamífero. Así, el sujeto puede ser un ser humano. El término no denota una edad o sexo particular. Así, sujetos adultos y recién nacidos, así como fetos, ya sea hombre o mujer, se pretende que sean cubiertos. Un paciente se refiere a un sujeto aquejado de una enfermedad o trastorno. El término paciente incluye a individuos humanos o veterinarios. Como se utiliza en la presente, los términos "paciente" y "sujeto" se usan de manera intercambiable.

En algunos aspectos, el sujeto del uso descrito se ha identificado como que está en riesgo de desarrollar una arritmia cardiaca. En algunos aspectos, el sujeto del uso descrito ha sufrido cirugía cardiaca, que incluye, pero no se limita a, la cirugía a corazón abierto. En algunos aspectos, el sujeto del uso descrito ha sufrido múltiples procedimientos combinados de corazón, que incluyen, pero no se limitan a, los procedimientos a corazón abierto. En algunos aspectos, el sujeto del uso descrito ha sufrido cirugía de la válvula cardiaca. En algunos aspectos, el sujeto del uso descrito tiene al menos 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, o 85 años. En algunos aspectos, la composición se administra a un sujeto que tuvo un infarto de miocardio. En algunos aspectos, el sujeto del uso descrito tiene enfisema o enfermedad pulmonar obstructiva crónica. En algunos aspectos, el sujeto del uso descrito tiene una historia de arritmia. En algunos aspectos, el uso descrito no comprenden administrar un parche que comprende submucosa del intestino delgado (SIS) a una abertura en el saco pericárdico del corazón. En algunos aspectos, el uso descrito no consiste en administrar un parche que comprende submucosa del intestino delgado (SIS) a una abertura en el saco pericárdico del corazón. En algunos aspectos, la ECM de mamífero no es la SIS. Así, en algunos aspectos, la composición que comprende la ECM de mamífero no consiste en SIS. En algunos aspectos, la composición que comprende la ECM de mamífero no es un parche. En algunos aspectos, el uso descrito no comprende administrar la composición que comprende la ECM de mamífero como un parche a una abertura en el saco pericárdico del corazón. En algunos aspectos, el tejido cardíaco del uso descrito no es el pericardio. En algunos aspectos, el uso descrito no comprende administrar la composición al pericardio. En un aspecto, el uso descrito comprende administrar un parche que comprende submucosa del intestino delgado (SIS) a una abertura en el saco pericárdico del corazón. Las composiciones usadas pueden comprender un agente adicional, tales como fármacos antiarrítmicos, o células no-nativas. En otros aspectos, el uso descrito comprende administrar un parche que comprende la submucosa del intestino delgado (SIS) a una abertura en el saco pericárdico del corazón, pero el uso adicional comprende etapas adicionales. Se describe además en la presente, una composición para uso en la prevención de la arritmia cardiaca en un sujeto, que comprende administrar al tejido cardíaco del sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende una matriz extracelular de mamífero y que comprende además un fármaco antiarrítmico, un fármaco bajo en lípidos, células, una proteína, o una combinación de éstos. 1. Arritmia cardiaca

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   Arritmia cardiaca (referida también como disrritmia) es un término para cualquier grupo grande y heterogéneo de condiciones en las que hay en el corazón una actividad eléctrica anormal. El latido cardíaco (pulso) puede ser demasiado rápido o demasiado lento y puede ser regular o irregular.

Algunas arritmias son emergencias médicas que amenazan la vida y que resultar en un paro cardíaco y muerte súbita. Otras causan síntomas tales como una percepción anormal de los latidos del corazón (palpitaciones) y pueden ser simplemente molestos. Otras pueden no estar en absoluto asociadas con ninguno de los síntomas, sino que predisponen hacia el derrame potencialmente mortal o embolia.

El término de arritmia sinusal se refiere a un fenómeno normal de aceleración y desaceleración suave de la frecuencia cardiaca que se produce con la aspiración y espiración. Generalmente es bastante pronunciado en los niños, y disminuye gradualmente con la edad. Esto se puede presentar además durante los ejercicios de respiración en la meditación que implican inhalación profunda y patrones de contención de la respiración.

Cada latido cardíaco se origina como un impulso eléctrico de una pequeña área de tejido en la aurícula derecha del corazón denominada nodo sinusal o nodo sinoauricular (SA). El impulso inicial produce la contracción de ambas aurículas, después activa el nodo auriculoventricular (o AV) que normalmente es la única conexión eléctrica entre las aurículas y los ventrículos o cámaras de bombeo principales. El impulso se propaga después a través de ambos ventrículos a través de las fibras Purkinje y haz de His que causan una contracción sincronizada del músculo del corazón. Una frecuencia cardiaca inferior a 60 latidos por minuto es una bradicardia. Esto puede causarse mediante una señal lenta desde el nodo sinusal (denominada bradicardia sinusal), una pausa en la actividad normal del nodo sinusal (denominado paro sinusal) o mediante el bloqueo del impulso eléctrico en su camino desde las aurículas a los ventrículos (denominado bloqueo AV o bloqueo cardíaco). El bloqueo cardíaco se presenta en grados y severidad variable. Puede causarse por el envenenamiento reversible del nodo AV (con fármacos que alteran la conducción) o por un daño irreversible en el nodo. La frecuencia cardiaca más rápida que 100 latidos por minuto es una taquicardia. La taquicardia puede resultar en palpitación; sin embargo, la taquicardia no es necesariamente una arritmia. El aumento de la frecuencia cardiaca es la respuesta normal al ejercicio físico o estrés emocional. Esto está mediado por el efecto del sistema nervioso simpático sobre el nodo sinusal, y se denomina taquicardia sinusal. Otras cosas que aumentan la actividad del sistema nervioso simpático en el corazón incluyen las sustancias ingeridas o inyectadas como la cafeína o anfetaminas, y una glándula tiroides hiperactiva (hipertiroidismo). La frecuencia cardiaca puede aumentar con fármacos simpatomiméticos.

La taquicardia que no es taquicardia sinusal resulta de la adición de impulsos anormales que pueden iniciarse por uno de los tres mecanismos: automatismo, reentrada o actividad desencadenada. Automatismo se refiere a la célula del músculo cardíaco disparando un impulso en sí mismo. Todas las células en el corazón tienen la capacidad de iniciar un potencial de acción; sin embargo, sólo algunas de estas células están diseñadas para desencadenar de forma rutinaria los latidos cardiacos. Estas células se encuentran en el sistema de conducción del corazón e incluyen el nodo SA, el nodo AV, haz de His y fibras de Purkinje. El nodo SA es un lugar sencillo especializado en la auricula, que tiene un automatismo superior (un marcapasos más rápido) que el resto del corazón y por lo tanto, generalmente es responsable de establecer la frecuencia cardiaca y el inicio de cada latido cardíaco. Cualquier parte del corazón que inicia un impulso sin esperar por el nodo SA se llama foco ectópico y es, por definición, un fenómeno patológico. Esto puede causar un latido prematuro único de vez en cuando, o si, el foco ectópico dispara más frecuentemente que el nodo SA, se puede producir un ritmo anormal sostenido. Las condiciones que aumentan el automatismo incluyen la estimulación del sistema nervioso simpático y la hipoxia. El ritmo cardíaco resultante depende de donde se inicia la primera señal. Si es el nodo SA, el ritmo permanece normal, pero rápido; si es un foco ectópico, puede resultar en muchos tipos de arritmia. Las arritmias de re-entrada se producen cuando un impulso eléctrico viaja recurrentemente en un círculo cerrado dentro del corazón, en lugar de pasar de un extremo del corazón a otro y detenerse después. Cada célula cardiaca es capaz de transmitir los impulsos en todas las direcciones, pero sólo puede hacerlo una vez dentro de un período corto de tiempo. Normalmente, el potencial de acción del impulso se propagará a través del corazón con la suficiente rapidez para que cada célula sólo responda una vez. Sin embargo, si la conducción es anormalmente lenta en algunas zonas, parte del impulso llegará tarde y potencialmente se tratará como un nuevo impulso. En función del tiempo, esto puede producir un ritmo de circuito anormal sostenido. Los circuitos de reentrada son responsables del aleteo auricular, taquicardias supraventriculares más paroxísticas, y taquicardia ventricular peligrosa. Cuando una cámara entera del corazón está implicada en múltiples circuitos micro-reentrada y por lo tanto el estremecimiento con impulsos eléctricos caóticos, se dice que está en fibrilación. La fibrilación puede afectar la auricula (fibrilación auricular) o el ventrículo (fibrilación ventricular). Si se deja sin tratar, la fibrilación ventricular (FV, o V-fib) puede conducir a la muerte en minutos.

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   Los latidos desencadenados se producen cuando los problemas al nivel de los canales iónicos en las células cardiacas individuales resultan en la propagación anormal de actividad eléctrica y pueden conducir al ritmo anormal sostenido. Los latidos desencadenados son relativamente raros, pero pueden ser el resultado de la acción de fármacos antiarrítmicos.

La arritmia se puede clasificar por frecuencia (normal, taquicardia, bradicardia), o mecanismo (automatismo, reentrada, fibrilación). Es adecuado además clasificar la arritmia por el sitio de origen. Por ejemplo, las arritmias auriculares incluyen contracciones auriculares prematuras (PAC), marcapasos auricular migratorio, taquicardia auricular multifocal, aleteo auricular y fibrilación auricular (Afib). La arritmias de unión incluyen la taquicardia supraventricular (SVT), taquicardia por reentrada nodal AV (la causa más común de la taquicardia paroxística supraventricular (PSVT)), ritmo de la unión, taquicardia de la unión, y el complejo de unión prematura. Las arritmias auriculoventriculares incluyen la taquicardia AV de reentrada (se produce cuando un circuito de reentrada cruza entre las aurículas y los ventrículos en algún lugar diferente al nodo AV). Las arritmias ventriculares incluyen contracciones ventriculares prematuras (PVC) (a veces denominadas latidos extra ventriculares (VEBs)), ritmo acelerado idioventricular, taquicardia ventricular monomórfica, taquicardia ventricular polimórfica y fibrilación ventricular.

Los bloqueos cardiacos (conocidos también como bloqueos AV, las causas más frecuentes de bradicardia) incluyen bloqueo cardíaco de primer grado (intervalo PR mayor de 200 ms de longitud en el ECG de superficie), bloqueo cardíaco de segundo grado (tipo 1 y 2), y bloqueo cardíaco de tercer grado (conocido además como bloqueo cardíaco completo).

Las arritmias cardíacas frecuentemente se detectan primero por auscultación de los latidos cardiacos con un estetoscopio o sintiendo los pulsos periféricos. Estos métodos no pueden generalmente diagnosticar las arritmias específicas, pero puede dar una indicación general de la frecuencia cardiaca y si es regular o irregular. No todos los impulsos eléctricos del corazón producen latidos audibles o palpables; en muchas arritmias cardíacas, los latidos prematuros o anormales no producen una acción de bombeo eficaz y se experimentan como latidos "en salto". La prueba diagnóstica específica más simple para la evaluación del ritmo cardíaco es el electrocardiograma (ECG o EKG abreviado). Un monitor Holter es un registro de EKG durante un periodo de 24 horas, para detectar arritmias que pueden ocurrir brevemente y de manera impredecible a lo largo del día.

El síndrome de muerte súbita por arritmia (SADS) es un término usado para describir la muerte súbita debido al paro cardíaco provocado por una arritmia. Frecuentemente, el sujeto no tiene síntomas antes de morir súbitamente. La causa más común de muerte súbita en Estados Unidos es la enfermedad arterial coronaria. Cada año, aproximadamente 300.000 personas mueren súbitamente de esta causa en los Estados Unidos. SADS puede causarse además mediante, por ejemplo, muchas afecciones hereditarias y enfermedades cardiacas que pueden afectar a personas jóvenes. En los niños, por ejemplo, la miocarditis viral, síndrome de QT largo, síndrome de Brugada, taquicardia ventricular polimórfica catecolaminérgica y miocardiopatía hipertrófica y displasia ventricular derecha arritmogénica pueden causar SADS.

En la presente invención invente, la arritmia cardiaca es la fibrilación auricular o fibrilación ventricular. 2. Administración

En algunos aspectos, la ECM de mamífero es un parche en forma tal como una lámina, tapón, un laminado, un ligamento, una matriz de polímero, una pluralidad de hebras, o una o más tiras. Así, en algunos aspectos, la ECM de mamífero está colocada en contacto directo con el tejido cardíaco de un sujeto durante la cirugía cardiaca. En la presente invención, la composición que comprende la ECM de mamífero se administra a una abertura en el saco pericárdico del corazón. En algunos aspectos, la composición se superpone a la abertura en el saco pericárdico. Así, la composición que comprende la ECM de mamífero se puede administrar a la abertura quirúrgica del pericardio durante o después de la cirugía cardiaca. En donde la ECM de mamífero está en forma sólida tal como una hoja, un tapón, un laminado, un ligamento, una matriz de polímero, una pluralidad de hebras, o una o más tiras, la composición se puede unir al tejido cardíaco usando medios estándar disponibles en la técnica. Por ejemplo, la composición que comprende la ECM de mamífero se puede unir al tejido cardíaco con suturas, bioadhesivos tales como pegamento de fibrina, grapas, y similares. Los compuestos y composiciones descritas que comprenden una ECM de mamífero se pueden administrar de cualquier manera adecuada. Por ejemplo, las composiciones pueden administrarse por vía parenteral (por ejemplo, inyección intramuscular), tópica o similares. Así, en algunos aspectos, la composición que comprende una ECM de mamífero es

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   inyectable. Las composiciones descritas se pueden inyectar en el tejido cardíaco mediante medios ordinarios. Por ejemplo, la composición que comprende una ECM de mamífero puede entregarse al tejido cardíaco a través de una jeringa o un catéter cardíaco o coronario. El cateterismo cardíaco (catéter cardíaco) es la inserción de un catéter en una cámara o vaso del corazón. Esto se puede hacerse tanto con fines de diagnóstico como intervencionista. El cateterismo coronario es un subconjunto de esta técnica, que implica el cateterismo de las arterias coronarias. Así, en algunos aspectos, la composición que comprende una ECM de mamífero puede inyectarse en el miocardio del corazón. Así, en algunos aspectos, la composición que comprende una ECM de mamífero puede inyectarse en el epicardio del corazón. Así, en algunos aspectos, la composición que comprende una ECM de mamífero puede inyectarse en el endocardio del corazón. Así, en algunos aspectos, la composición que comprende una ECM de mamífero puede inyectarse en el pericardio del corazón. En algunos aspectos, la composición que comprende una ECM de mamífero puede inyectarse entre las capas del corazón, por ejemplo, entre el pericardio y el epicardio, entre el epicardio y el miocardio, y entre el miocardio y el endocardio.

En algunos aspectos, la composición que comprende una ECM de mamífero puede administrarse al septo auricular o ventricular del sujeto. Por ejemplo, en algunos aspectos, la composición que comprende una ECM de mamífero se puede administrar a un defecto septal ventricular. Un defecto septal ventricular (VSD) es un defecto en el septo ventricular, la pared que divide los ventrículos izquierdo y derecho del corazón El septo ventricular consiste en una porción muscular inferior y membranosa superior y está ampliamente inervado con cardiomiocitos conductores. La porción membranosa, que es cerca del nodo auriculoventricular, es más comúnmente afectada en adultos y niños mayores. Los VSD congénitos son colectivamente las cardiopatías congénitas más comunes. En algunos aspectos, la composición que comprende una ECM de mamífero se puede administrar a un defecto septal auricular (ASD). ASD es una forma de cardiopatía congénita que permite el flujo de sangre entre las aurículas izquierda y derecha a través del septo interauricular. El septo auricular es el tejido que divide las aurículas derecha e izquierda. Sin este septo, o si hay un defecto en este septo, es posible que la sangre viaje desde el lado izquierdo del corazón hacia el lado derecho del corazón, o viceversa.[1] Independientemente de las bi-direcciones de comunicación interauricular, esto resulta en la mezcla de sangre arterial y venosa. La mezcla de sangre arterial y venosa puede o no ser hemodinámicamente significativa, aun si es clínicamente significativa. Esta mezcla de sangre puede o no resultar en lo que se conoce como un "shunt". La cantidad de maniobras presente, en su caso, dicta la significación hemodinámica (ver Fisiopatología más abajo). Un "shunt de derecha a izquierda" típicamente posee el escenario más peligroso (ver Fisiopatología más abajo). La ECM de mamífero puede ser en forma de aerosol. Así, en algunos aspectos, la ECM de mamífero se pueden propagar sobre el tejido cardíaco del sujeto. La ECM de mamífero puede ser en forma particulada. La ECM de mamífero particulada se puede administrar mediante la inyección de una composición emulsificada, atomización, estratificación, empaque, pulverización, pintura, u otros tipos similares de aplicación del material particulado seco, la composición líquida, o las composiciones semisólidas.

En algunos aspectos, la composición se administra a la superficie epicárdica del corazón. Así, en algunos aspectos, la composición se inyecta, atomiza, o une a la superficie epicárdica del corazón. La cantidad exacta de las composiciones requeridas puede variar de sujeto a sujeto, dependiendo de la especie, edad, peso y estado general del sujeto, la severidad del trastorno que se trata. Así, no es posible que especificar una cantidad exacta para cada composición. Sin embargo, una cantidad apropiada se puede determinar por el experto en la técnica usando sólo experimentación de rutina dadas las enseñanzas en la presente descripción. Así, las dosis eficaces y calendarios para la administración de las composiciones pueden determinarse empíricamente y hacer tales determinaciones está dentro de la experiencia en la técnica. Los intervalos de dosificación para la administración de las composiciones son aquellos suficientemente grandes como para producir el efecto deseado en el que se afecta el síntoma o trastorno. La dosificación no debe ser tan grande que cause efectos secundarios adversos, tales como reacciones cruzadas no deseadas, reacciones anafilácticas, y similares. Generalmente, la dosis puede variar con la edad, afección, sexo y extensión de la enfermedad en el paciente, la vía de administración, o si otros fármacos se incluyen en el régimen, y se pueden determinar por el experto en la técnica. La dosificación puede variar y puede administrarse en una o más administraciones de dosis diaria, durante uno o varios días. Se puede encontrar en la literatura, la orientación para dosificaciones apropiadas de clases determinadas de productos farmacéuticos. Seguida la administración de la composición descrita para la prevención de la arritmia cardiaca, se puede evaluar la eficacia del uso de varias maneras bien conocidas por el perito con experiencia. Por ejemplo, el experto en la técnica entenderá que una composición descrita en la presente invención es eficaz en la prevención de la arritmia cardiaca en un sujeto usando un electrocardiograma. Las composiciones descritas en la presente invención se pueden administrar profilácticamente en sujetos que están en riesgo de arritmia cardiaca. Las composiciones descritas también se pueden usar además, por ejemplo, como herramientas para aislar y probar nuevos candidatos a fármacos para tratar o prevenir la arritmia cardiaca. Las

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   composiciones descritas se pueden usar también en una variedad de formas como herramientas de investigación. Otros usos se describen, evidencian a partir de la descripción, y/o se entenderán por aquellos con experiencia en la técnica. 3. Terapia de combinación Los usos descritos en la presente descripción pueden comprender además tratar al sujeto con terapias antiarrítmicas convencionales. Por ejemplo, hay muchas clases de medicamentos antiarrítmicos con diferentes mecanismos de acción y diferentes fármacos individuales dentro de estas clases. Así, el uso puede comprenden administrar más aun al sujeto uno o más medicamentos antiarrítmicos.

Algunas arritmias, por ejemplo, la fibrilación auricular, causan coagulación de la sangre dentro del corazón y aumentan el riesgo de embolia y derrame cerebral. Los medicamentos anticoagulantes tales como la warfarina y heparina y antiagregantes plaquetarios tales como la aspirina pueden reducir el riesgo de la coagulación. Así, el uso puede comprender además administrar al sujeto un anticoagulante.

Las arritmias se pueden tratar además eléctricamente, mediante la aplicación de un choque a través del corazón, ya sea externa a la pared torácica, o internamente al corazón a través de electrodos implantados o intra-operacional. La cardioversión se puede lograr ya sea farmacológica o a través de la aplicación de un choque sincronizado con el latido del corazón subyacente. Se usa para el tratamiento de las taquicardias supraventriculares. En la cardioversión electiva, el receptor se seda o anestesia ligeramente para el procedimiento. Por ejemplo, el aleteo auricular se puede tratar mediante cardioversión. Así, el uso puede comprender además tratar al sujeto con la cardioversión. Con la cardioversión sincronizada, el choque reversión se entrega por medio de almohadillas o paletas de una cantidad seleccionada de la corriente eléctrica durante un número predefinido de milisegundos en el momento óptimo en el ciclo cardíaco que corresponde a la onda R del complejo QRS en el ECG. Medir el tiempo del choque de la onda R previene la entrega del choque durante el período vulnerable (o período refractario relativo) del ciclo cardíaco, lo que puede inducir la fibrilación ventricular. La desfibrilación se diferencia de la cardioversión en que el choque no se sincroniza con el ciclo cardíaco. Es necesario para el ritmo caótico de la fibrilación ventricular y se usa además para la taquicardia ventricular con ausencia de pulso. Frecuentemente, se requiere más electricidad para la desfibrilación que para la cardioversión. Debido a que la mayoría de los sujetos con fibrilación ventricular son inconscientes, existe generalmente la necesidad de sedación. Así, el uso puede comprender además tratar el tema con la desfibrilación.

La desfibrilación o cardioversión se puede lograr mediante un desfibrilador cardioversor implantable (ICD). Así, el uso puede comprender además administrar al sujeto un ICD. El tratamiento eléctrico de la arritmia incluye además el ritmo cardíaco. El ritmo temporal puede ser necesario para las causas reversibles de latidos cardíacos muy lentos, o bradicardia, (por ejemplo, por sobredosis de fármaco o infarto de miocardio). Un marcapasos permanente se puede colocar en situaciones donde no se espera que la bradicardia se recupere. Así, el uso puede comprender además administrar al sujeto un marcapasos. Sondas finas se pueden insertar en algunos aspectos a través de los vasos sanguíneos para mapear la actividad eléctrica desde el interior del corazón. Esto permite que áreas anormales de conducción que se localicen con gran precisión, y se destruyan posteriormente con sondas de calor, frío, eléctrica o láser. c. Composiciones El parche de ECM de mamífero se ha demostrado que actúa como un andamio mecánico mientras que el cuerpo recluta las células necesarias para remodelar y reparar el tejido cardíaco. Se describe en la presente la sorprendente capacidad de la ECM de mamífero para prevenir además la arritmia cardiaca. Así, se describe en la presente las composiciones que comprenden la ECM de mamífero para su uso en la prevención de la arritmia cardiaca en un sujeto. Las composiciones descritas pueden ser naturales o sintéticas. Las composiciones pueden ser descelularizadas o comprenden células, tales como las células madre.

Las composiciones descritas en la presente que comprenden la ECM de mamífero pueden estar en la forma de, por ejemplo, un parche, una emulsión, una solución inyectable, un gel, un fluido, una pasta, un polvo, una hebra, una tira, un rocío, un vapor, un aerosol, una crema, o un revestimiento. La composición puede comprender además uno o más componentes adicionales, que incluyen, por ejemplo, una célula, péptido, polipéptido, proteína u otras porciones biológicas. Cuando la composición es un parche, puede estar en la forma seleccionada a partir de una hoja, un laminado, un ligamento, una matriz de polímero, una pluralidad de filamentos, una o más tiras, o una combinación de éstos. Las composiciones descritas en la presente que comprenden ECM de mamífero se pueden elaborar en un particulado y fluidizado como se describe en la patente de Estados Unidos núm. 5.275.826 de Badylak, patente de Estados Unidos

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   núm. 6.579.538 de Spievack, y patente de Estados Unidos núm. 6.933.326 de Griffey. Las composiciones fluidizadas o emulsionadas (las formas líquidas o semisólidas) se pueden presentar en una concentración determinada, por ejemplo a una concentración de la matriz extracelular mayor que aproximadamente 0,001 mg/ml. La concentración de estos componentes líquidos o semisólidos de la composición de la matriz extracelular puede estar en un intervalo a partir de aproximadamente 0,001 mg/ml a aproximadamente 200 mg/ml. Las concentraciones pueden encontrarse además en intervalos más específicos, como por ejemplo el conjunto de intervalos siguiente: aproximadamente 5 mg/ml a aproximadamente 150 mg/ml, aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 125 mg/ml, aproximadamente 25 mg/ml a aproximadamente 100 mg/ml, aproximadamente 20 mg/ml a aproximadamente 75 mg/ml, aproximadamente 25 mg/ml a aproximadamente 60 mg/ml, aproximadamente 30 mg/ml a aproximadamente 50 mg/ml, y aproximadamente 35 mg/ml a aproximadamente 45 mg/ml, y aproximadamente 40 mg/ml a aproximadamente 42 mg/ml. Este conjunto de intervalos es ejemplar y no pretende ser exhaustivo. Se contempla que cualquier valor dentro de cualquiera de estos intervalos específicamente enumerados es un valor razonable y útil para la concentración del líquido, emulsión, gel, pasta u otro líquido o componente semisólido de la composición.

1. Matriz extracelular de mamífero Los materiales de matriz extracelular actúan como un andamio natural para la reparación de los tejidos blandos del cuerpo. Los estudios en animales han demostrado que el material original de matriz extracelular se remodela y es reemplazado por el ejido huésped. La ECM de mamífero es un biomaterial reabsorbible que se ha usado con éxito como un injerto de tejido xenogénico que induce la remodelación constructiva de una variedad de tejidos animales, incluyendo los vasos sanguíneos, vejiga urinaria, duro, pared abdominal, tendones y ligamentos. Ejemplos de la ECM de mamífero incluyen submucosa de intestino delgado (SIS), submucosa de vejiga urinaria (UBS), submucosa del estómago (SS), y submucosa del hígado (LS) o membrana basal hepática (LBM).

El proceso de remodelación incluye la neovascularización rápida y abundante acumulación de células mesenquimales y epiteliales que apoyan la deposición extensiva de una nueva matriz extracelular. La porción no colágena de, por ejemplo, la matriz extracelular SIS se compone de diversas glicoproteínas, tales como ácido hialurónico, heparina, dermatán y sulfato de condroitina A, así como los factores de crecimiento FGF-2 y TGF-β.

Después del procesamiento, la ECM de mamífero puede retener muchas de las proteínas endógenas que actúan como factores de crecimiento y diferenciación. Estos factores estimulan el medio ambiente local para poblar la ECM de mamífero con células que son capaces después de diferenciarse en el tejido original que la ECM de mamífero reemplaza.

La ECM de mamífero es una matriz de andamio de proteínas "estructurales" polimerizadas que se establecen en tres grupos: colágenos, glicoproteínas y proteoglicanos (que tienen repeticiones de glicosaminoglicanos a todo lo largo). Estas moléculas se polimerizan realmente para formar el andamio o matriz de proteínas que existe en interacción dinámica con las células y proteínas funcionales ubicadas muy cerca (ya sea en las células, o unidas a una proteína estructural). Así, la ECM de mamífero incluye además dentro sus proteínas "funcionales" de andamio matriz que interactúan con las proteínas estructurales y con las células que migran o reclutadas, tales como las células madre. La matriz interactúa además con las células que expresan proteína durante la vida y el mantenimiento del propio andamio matriz que reconstruye y mantiene sus componentes. Algunas proteínas pueden ser tanto una proteína estructural como funcional, dependiendo de la configuración de la proteína y la colocación en toda la matriz.

La ECM del tejido cardíaco, por ejemplo, se elabora de colágeno tipo I (predominante), III, IV, V, y VI, combinado que son el 92% del peso seco de la matriz. La ECM del tejido cardiaco se elabora además de glicosaminoglicanos (GAGs), que incluyen sulfato de condroitina A y B, de heparano, heparina y ácido hialurónico. Las glicoproteínas tales como la fibronectina y entactina, proteoglicanos tales como decorina y perlecan, y factores de crecimiento tales como factor de crecimiento transformante beta (TGF-β), factor de crecimiento fibroblástico-2 (FGF-2) y factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF), son actores claves en la actividad de la matriz de regeneración del miocardio. Además, la constitución química precisa de la matriz parece desempeñar un papel en su función, que incluye, por ejemplo, qué tipo de colágeno prevalece en la matriz. Así, el resultado de cualquier proceso regenerativo de tejido puede determinarse mediante los componentes estructurales y funcionales del andamio matriz que forman la base del proceso regenerativo.

Las funciones de adhesión celular en la ECM son moléculas que facilitan la adhesión celular (CAMs). Las CAMs pueden ya sea estar disponible de forma endógena o añadidas como un componente adicional de la composición. Las CAMs son glicoproteínas presentadas en la superficie de la membrana celular o transmembrana conectadas a los componentes del citoesqueleto de la célula. Las CAMs específicas incluyen cadherinas que son dependientes de calcio, y se conocen más de 30 tipos. Además trabajando como CAMs están las integrinas que son proteínas que se unen al citoesqueleto de la célula en donde se presentan a la matriz extracelular o a otras células a través de subunidades transmembrana alfa y beta de la proteína integrina. La migración celular, la embriogénesis, la hemostasia y la cicatrización de heridas se facilitan por las integrinas en la matriz. Los sindecanes son proteoglicanos que se combinan con ligandos para iniciar la motilidad y la diferenciación celular. Las inmunoglobulinas proporcionan cualquiera de las respuestas inmunes e inflamatorias necesarias. Las selectinas promueven las interacciones célula-célula.

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   I. Fuentes Nativas y Preparaciones En algunos aspectos, la ECM de mamífero se deriva de la fuente nativa. Los andamios de la matriz extracelular nativa y las proteínas que los forman se pueden encontrar en su medio ambiente natural, es decir, las matrices extracelulares de mamíferos. Estos materiales se pueden preparar para el uso en mamíferos en los procedimientos de injerto de tejido. En algunos aspectos, la ECM de mamífero se extrae de tejido/órganos de mamíferos. Por ejemplo, en algunos aspectos, la ECM de mamífero comprende la membrana basal (o capa epitelial transicional), tunica propria, tunica submucosa, tunica muscularis, tunica serosa, o una combinación de éstos de una fuente de tejido del mamífero. Así, en algunos aspectos, la ECM de mamífero comprende la membrana basal (o capa epitelial transicional) a partir de una fuente de tejido de mamífero. En algunos aspectos, la ECM de mamífero comprende la tunica propria subyacente a partir de una fuente de tejido de mamífero. En algunos aspectos, la ECM de mamífero comprende la tunica submucosa a partir de una fuente de tejido de mamífero. En algunos aspectos, la ECM de mamífero comprende la tunica muscularis a partir de una fuente de tejido de mamífero. En algunos aspectos, la ECM de mamífero comprende la tunica serosa a partir de una fuente de tejido de mamífero. Por ejemplo, la submucosa del intestino delgado (SIS) se describe en la Patente de Estados Unidos núm. 5.275.826; la submucosa de la vegiga urinaria (UBS) se describe en la Patente de Estados Unidos núm. 5.554.389; la submucosa de estómago (SS) se describe en la Patente de Estados Unidos núm. 6.099.567; y la submucosa de hígado (LS) o membrana basal del hígado (LBM) se describe en la Patente de Estados Unidos núm. 6.379.710, que se incorpora en la presente como referencia para las enseñanzas de cómo hacer y usar estas matrices extracelulares nativas. Así, en algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es submucosa de intestino delgado (SIS). En algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es submucosa de la vejiga unrinaria (UBS). En algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es submucosa de estómago (SS). En algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es submucosa de hígado (LS). En algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es membrana basal de hígado (LBM). En algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es de dermis. Por ejemplo, AlloDerm®, producido por la Corporación LifeCell, es una matriz de tejido acelular que se produce de piel humana normal usando técnicas de procesamiento establecidas para eliminar la epidermis y las células dentro de la dermis sin alterar significativamente la bioquímica normal y la arquitectura molecular de la matriz del tejido conectivo. El producto resultante es una forma liofilizada que permite vida en estante prolongada y facilidad de envío sin degradación o pérdida de los componentes de matriz de tejido normal. AlloDerm® puede retener decorina, ácido hialurónico, sulfato de condroitina, nidogen, factores de crecimiento y otras proteínas bioquímicas presentes en tejidos blandos normales. Además, AlloDerm® puede contener las membranas basales de canales vasculares y la orientación de fibras de elastina y colágeno de tejido dérmico de partida. En algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es de fascia. En algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es de tejido parenquimal. En algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es de pericardio. En algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es la matriz extracelular del miocardio, en algunos aspectos, la ECM de mamífero de las composiciones descritas es de tejido de corazón descelularizado, producido, por ejemplo, por perfusión de la arteria coronaria con detergentes (Ott, HC, y otros. Nat Med. 2008 Feb;14(2):213-21).

En algunos aspectos, la ECM de mamífero comprende un andamio de colágeno derivado de una fuente de órgano o tejido de mamífero. El andamio de colágeno de la fuente de mamífero en algunos aspectos puede comprender la membrana basal de la fuente de tejido de mamífero.

En algunos aspectos, la ECM de mamífero se produce in vitro. Por ejemplo, la ECM de mamífero se puede producir a partir de cultivo de células de mamífero. La ECM de mamífero se puede producir a partir de proteínas extraídas de tejido/órganos de mamífero. Por ejemplo, en algunos aspectos, la ECM de mamífero comprende un andamio de colágeno artificial sintetizado a partir de colágeno extraído de una fuente de órgano o tejido de mamífero. El colágeno a partir de fuentes de mamífero se puede recuperar a partir de tejidos que contienen la matriz y usar para formar una composición de la matriz. Las matrices extracelulares se pueden sintetizar a partir de cultivos celulares como en el producto manufacturado por Matrigel™. Adicionalmente, el material de la matriz extracelular dérmica, el material de la matriz extracelular subcutánea, el material de la matriz extracelular del intestino grueso, el material de la matriz extracelular placentaria, el material de la matriz extracelular del omentum, el material de la matriz extracelular del corazón, y el material de la matriz extracelular del pulmón, se pueden usar, derivar y conservar de modo semejante como se ha descrito en la presente para los materiales de SIS, SS, LBM, y UBS. Otras fuentes de tejidos de órganos de membrana basal para el uso de acuerdo con las composiciones descritas incluyen bazo, nódulos de la linfa, glándulas salivales, próstata, páncreas y otras glándulas secretoras. Generalmente, cualquier tejido de un mamífero que tiene una matriz extracelular se puede usar para desarrollar un componente de la matriz extracelular.

La matriz de colágeno se puede seleccionar a partir de una variedad de matrices de colágeno disponibles en el

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   comercio o se puede preparar de una amplia variedad de fuentes naturales de colágeno. La matriz de colágeno para el uso de acuerdo con las composiciones descritas puede comprender colágenos altamente conservados, glicoproteínas, proteoglicanos, y glicosaminoglicanos en su configuración natural y su concentración natural. Los colágenos pueden ser de fuentes animales, de fuentes de planta, o de fuentes sintéticas, todos los que están disponibles y son estándar en la técnica. La proporción del material de andamio en la composición puede ser grande cuando se usa el andamio nativo, por lo que el balance natural de proteínas de la matriz extracelular en los andamios nativos usualmente representa mayor que 90 % del material de la matriz extracelular en peso seco. Así, el componente del andamio de la composición en peso puede ser generalmente mayor que 50 % del peso seco total de la composición. El andamio puede comprender una cantidad de la composición en peso mayor que 60 %, mayor que 70 %, mayor que 80 %, mayor que 82 %, mayor que 84 %, mayor que 86 %, mayor que 88 %, mayor que 90 %, mayor que 92 %, mayor que 94 %, mayor que 96 %, y mayor que 98 % de la composición total.

Las matrices extracelulares nativas que su bioactividad para prevenir la arritmia cardiaca se conserva para la extensión máxima posible se pueden preparar con cuidado. Las funciones claves que se pueden conservar incluyen control o iniciación de la adhesión celular, migración celular, diferenciación celular, proliferación celular, muerte celular (apoptosis), estimulación de la angiogénesis, actividad proteolítica, actividad enzimática, motilidad celular, modulación celular y de proteína, activación de eventos transcripcionales, provisión de eventos de traducción, inhibición de algunas bioactividades, por ejemplo inhibición de la coagulación, atracción de célula de la médula, y quimiotaxis. Las pruebas para determinar estas actividades son estándar en la técnica. Por ejemplo, el análisis del material se puede usar para identificar las moléculas presentes en la composición del material. Además, las pruebas de adhesión celular in vitro se pueden conducir para asegurar que el tejido o la composición es capaz de la adhesión celular.

Las composiciones descritas que comprenden ECM de mamífero se pueden descelularizar para hacerlas no inmunogénicas. En algunos aspectos, el proceso de descelularización se completa con algunas funciones de la proteína clave retenida, ya sea por la sustitución de proteínas incidentalmente extraídas con las células, o añadiendo células exógenas a la composición de la matriz después de la extracción celular, cuyas células producen o portan proteínas involucradas en prevenir la arritmia cardiaca.

Al añadir proteínas a la composición de la matriz extracelular, las proteínas se pueden agregar simplemente con la composición, o cada proteína se puede enlazar covalentemente a una molécula en la matriz. Los procedimientos estándar de enlazamiento de la proteína-molécula se pueden usar para lograr la unión covalente.

Para la descelularización al iniciar con un tejido/órgano fuente como una fuente de ECM de mamífero, se puede usar el proceso de perfusión del tejido/órgano fuente. El tejido/órgano fuente se puede perfundir con un agente de descelularización, por ejemplo 0,1 % ácido peracético, haciendo el órgano acelular. El tejido/órgano fuente se puede después cortar en porciones y almacenar (por ejemplo, en ambiente acuoso, nitrógeno líquido, frío, liofilizado, o presionado en vacío) para el posterior uso. Cualquier agente descelularizante adecuado se puede usar en el proceso de perfusión del tejido/órgano fuente. Con respecto al tejido submucoso, las extracciones se pueden llevar a cabo cerca del pH neutro (en un intervalo de aproximadamente pH 5,5 a aproximadamente pH 7,5) para conservar la presencia de factores de crecimiento en las matrices. Alternativamente, las condiciones acídicas (es decir, menos de pH 5,5) se pueden usar para conservar la presencia de componentes del glicosaminoglicano, a una temperatura en un intervalo entre 0 y 50 grados centígrados. Para regular el medio ambiente acídico o básico de estas extracciones acuosas, un tampón y agente caotrópico (generalmente a una concentración de aproximadamente 2M a aproximadamente 8M) se pueden seleccionar, tal como urea (a una concentración de aproximadamente 2M a 4M), guanidina (a una concentración de aproximadamente 2M a aproximadamente 6M, más típicamente aproximadamente 4M), cloruro de sodio, cloruro de magnesio, y tensoactivos no iónicos o iónicos. La urea a 2M en pH 7,4 proporciona la extracción de FGF-2 y la glicoproteína fibronectina. Usar 4M guanidina con tampón pH 7,4 rinde una fracción que tiene factor de crecimiento transformante beta. (TGF-β). Debido a la estructura colagenosa de la membrana basal y el deseo de minimizar la degradación de la estructura de la membrana durante la disociación celular, la actividad enzimática específica de colágeno se puede minimizar en las soluciones de la enzima usadas en la etapa de disociación celular. Por ejemplo, el tejido/órgano fuente se puede tratar con un agente quelante de calcio o agente caotrópico tal como un detergente suave tal como Tritón 100. La etapa de disociación celular se puede dirigir además usando un agente quelante de calcio o agente caotrópico en ausencia de un tratamiento enzimático del tejido/órgano. El etapa de disociación celular se puede llevar a cabo suspendiendo las partes del tejido fuente en una solución agitada que contiene aproximadamente 0,05 a aproximadamente 2 %, más típicamente aproximadamente 0,1 a aproximadamente 1 % en peso de proteasa, opcionalmente que contiene un agente caotrópico o un agente quelante de calcio en una cantidad eficaz para optimizar la liberación y separación de las células de la membrana basal sin degradación sustancial de la matriz de la membrana. Después de ponerse en contacto el tejido/órgano fuente con la solución de disociación celular durante un tiempo suficiente para liberar todas las células de la matriz, la membrana basal resultante de tejido/órgano se puede enjuagar

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   una o más veces con solución salina y, opcionalmente, almacenar en un estado hidratado congelado o un estado parcialmente deshidratado hasta que se use como se describe más abajo. La etapa de disociación celular puede requerir varios tratamientos con la solución de disociación celular para liberar sustancialmente todas las células de la membrana basal. El tejido/órgano fuente se puede tratar con una solución de proteasa para eliminar las células componentes, y el material de la matriz extracelular resultante se trata además para eliminar o inhibir cualquier actividad enzimática residual. Por ejemplo, la membrana basal resultante se puede calentar o tratar con uno o más inhibidores de proteasa. La membrana basal u otros andamios de matriz extracelular nativa se pueden esterilizar usando técnicas de esterilización convencionales, que incluyen curtido con glutaraldehído, curtido con formaldehído a pH ácido, tratamiento con óxido de etileno, tratamiento con óxido de propileno, esterilización por gas plasma, radiación gamma, y esterilización con ácido peracético. Se usa preferentemente una técnica de esterilización que no debilita significativamente la resistencia mecánica y las propiedades biotrópicas del material. Por ejemplo, se cree que la radiación gamma fuerte puede causar pérdida de fuerza en el material de injerto. Ejemplo de técnicas de esterilización incluyen exponer el injerto a ácido peracético, irradiación gamma a bajas dosis, esterilización por gas plasma, y dióxido de carbono alta presión/supercrítica. II. ECM Sintética Se describen además composiciones que comprenden la ECM sintética para uso en las composiciones descritas. La ECM sintética para el uso en las composiciones descritas se puede formar usando moléculas sintéticas que se polimerizan mucho como el colágeno nativo y que forman un medio ambiente del andamio que imita el medio ambiente nativo de los andamios de ECM de mamífero. De acuerdo, se pueden usar como componentes de un andamio sintético de la matriz extracelular los materiales tales como fibra de tereftalato de polietileno (Dacron®), politetrafluoroetileno (PTFE), pericardio reticulado con glutaraldehído, polilactato (PLA), poliglicol (PGA), ácido hialurónico, polietilenglicol (PEG), polietileno, nitinol, y colágeno de fuentes no animales (tales como plantas o colágenos sintéticos). Los materiales sintéticos enumerados son estándar en la técnica, y la formación con ellos de hidrogeles y materiales de tipo matriz son además estándar. Su eficacia se puede probar en vivo como se describió con anterioridad, por las pruebas en los mamíferos, junto con los componentes que típicamente constituyen matrices extracelulares nativas, particularmente los factores de crecimiento y células sensibles a ellos. Los materiales de tipo matriz extracelular se describen generalmente en Rosso y otros (Journal of Cellular Physiology 199:174-180, 2004), lo que se incorpora en la presente descripción como referencia para las enseñanzas de cómo hacer y usar estos materiales. Adicionalmente, algunos materiales de tipo matriz- extracelular se enumeran aquí.

Particularmente útil los polímeros biodegradables y/o bioabsorbibles incluyen polilactidas, poliglicólidos, policaprolactona, polidioxano y sus copolímeros aleatorios y de bloque. Ejemplos de polímeros específicos incluyen poli D, L-lactida, polilactida-co-glicolido (85:15) y polilactida-co-glicólido (75:25). Los polímeros biodegradables y/o bioabsorbibles usados en la matriz fibrosa de las composiciones descritas pueden tener un peso molecular en el intervalo de aproximadamente 1.000 a aproximadamente 8.000.000 g/mol, que incluyen aproximadamente 4.000 a aproximadamente 250.000 g/mol. El material fiberizable biodegradable y/o bioabsorbible puede ser un polímero biodegradable y bioabsorbible. Ejemplos de polímeros adecuados se puede encontrar en Bezwada, Rao S. y otros; (1997) Poli(p-Dioxanona) y sus copolímeros, en Handbook of Biodegradable Polymers, A. J. Domb, J. Kost and D. M. Wiseman, editores, Hardwood Academic Publishers, países Bajos, págs. 29-61. El polímero biodegradable y/o bioabsorbible puede contener un monómero seleccionado del grupo que consiste de un glucósido, lactida, dioxanona, caprolactona, carbonato de trimetileno, etilenglicol y lisina. El material puede ser un copolímero aleatorio, copolímero de bloque o mezcla de monómeros, homopolímeros, copolímeros, y/o heteropolímeros que contienen estos monómeros. Los polímeros biodegradables y/o bioabsorbibles pueden contener poliésteres alifáticos lineales biodegradables y bioabsorbibles, tales como poliglicólido (PGA) y su copolímero aleatorio poli(glicólido-co-lactida-) (PGA-co-PLA). La FDA ha aprobado estos polímeros para el uso en aplicaciones quirúrgicas, que incluyen suturas médicas. Una ventaja de estos materiales absorbibles sintéticos es su degradabilidad de la cadena principal de éster mediante una simple hidrólisis en ambientes acuosos, tales como fluidos corporales. Los productos de degradación se metabolizan en última instancia a dióxido de carbono y agua o se pueden excretar a través de los riñones. Estos polímeros son muy diferentes de los materiales basados en celulosa, que no se pueden absorber por el cuerpo.

Otros ejemplos de polímeros biocompatibles adecuados son metacrilatos de polihidroxialquilo que incluyen metacrilato de etilo, y los hidrogeles tales como polivinilpirrolidona, poliacrilamidas, etc. Otros materiales bioabsorbibles adecuados son biopolímeros que incluyen colágeno, gelatina, ácido algínico, quitina, quitosano, fibrina, ácido hialurónico, dextrano, poliaminoácidos, polilisina y copolímeros de estos materiales. Cualquier polímero de tipo glicosaminoglicano (GAG) se puede usar. GAGs pueden incluir, por ejemplo, heparina, sulfato de condroitina A o B, y ácido hialurónico, o sus análogos sintéticos. Cualquier combinación, copolímero, polímero o mezcla de estos de los ejemplos anteriores se contempla para el uso de acuerdo a las composiciones descritas. Tales materiales bioabsorbibles se pueden preparar por métodos conocidos. Los ácidos nucleicos a partir de cualquier fuente se pueden usar como un biomaterial polimérico. Las fuentes incluyen los ácidos nucleicos de origen natural, así como ácidos nucleicos sintetizados. Los ácidos nucleicos adecuados para el

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   uso en las composiciones descritas incluyen formas de origen natural de los ácidos nucleicos, tales como ADN (que incluyen las estructuras A, B y Z), ARN (que incluyen ARNm, ARNt, y ARNr juntos o separados) y ADNc, así como cualquier forma sintética o artificial de polinucleótidos. Los ácidos nucleicos usados en las composiciones descritas se pueden modificar en una variedad de maneras, que incluyen mediante reticulación, modificaciones intra-cadena tales como metilación y caperuza, y por copolimerización. Adicionalmente, otras moléculas beneficiosas se pueden conectar a las cadenas de ácidos nucleicos. Los ácidos nucleicos pueden tener secuencias de origen natural o secuencias artificiales. La secuencia del ácido nucleico puede ser irrelevante para muchos aspectos de la descripción. Sin embargo, secuencias especiales se pueden usar para prevenir cualquier efecto significativo debido a la propiedades codificantes de la información de los ácidos nucleicos, para obtener respuestas celulares particulares o para regir la estructura física de la molécula. Los ácidos nucleicos se pueden usar en una variedad de estructuras cristalinas tanto en biomateriales terminados como durante sus procesos de producción. La estructura cristalina del ácido nucleico se puede influenciar por las sales usadas con el ácido nucleico. Por ejemplo, las sales de ADN de Na, K, Bi, y Ca todas tienen diferentes velocidades de precipitación y diferentes estructuras cristalinas. Adicionalmente, el pH influye en la estructura cristalina de los ácidos nucleicos.

Las propiedades físicas de los ácidos nucleicos se pueden influenciar por la presencia de otras características físicas. Por ejemplo, la inclusión de bucles en horquilla puede resultar en biomateriales más elásticos o pueden proporcionar sitios de escisión específicos. Los polímeros de ácidos nucleicos y copolímeros producidos se pueden usar para una variedad de aplicaciones de ingeniería de tejidos, que incluyen aumentar la resistencia a la tensión del tejido, mejorar la cicatrización de la herida, acelerar la cicatrización de la herida, como molde para la formación de tejido, para guiar la formación de tejido, para estimular el crecimiento del nervio, para mejorar la vascularización en los tejidos, como un adhesivo biodegradable, como recubrimiento del dispositivo o implante, o para mejorar la función de un tejido o parte del cuerpo. Los polímeros se pueden usar además más específicamente como suturas, andamios y apósitos para heridas. El tipo de nucleico polímero o copolímero de ácido usado puede afectar a la química resultante y la estructura física del biomaterial polimérico. III. Combinaciones La composición descrita en la presente puede comprender combinaciones de ECM de mamífero a partir de dos o más fuentes o en dos o más formas distintas. Así, las composiciones pueden comprender cualquier combinación de ECMs de mamíferos nativas y/o sintéticas descritas en la presente. Así, por ejemplo, la composición puede comprender combinaciones de ECM de mamífero a partir de fuentes tales como, por ejemplo, pero no se limita a, submucosa de intestino delgado, membrana basal de hígado, submucosa de estómago, submucosa de la vejiga urinaria, membrana basal placentaria, membrana basal de páncreas, submucosa del intestino grueso, membrana intersticial de pulmón, submucosa del tracto respiratorio, matriz extracelular del corazón, matriz dérmica, y generalmente la matriz extracelular de cualquier tejido fetal de mamífero. Cualquiera de estas fuentes de tejidos pueden proporcionar matriz extracelular que se puede manipular después en la forma determinada (forma líquida, semisólida, o sólida), para uso en una composición.

Las combinaciones de ECM de mamífero a partir de dos o más fuentes pueden ser sólidos mezclados, líquidos mezclados, emulsiones mezcladas, geles mezclados, pastas mezcladas, o sólidos particulados mezclados. Todas estas composiciones son mezclas de matrices extracelulares a partir de dos o más fuentes, por ejemplo mezclas de polvos o particulados a partir de dos o más matrices extracelulares, mezclas de pastas a partir de dos o más matrices extracelulares, mezclas de emulsiones o geles a partir de dos o más matrices extracelulares y mezclas de líquidos a partir de dos o más matrices extracelulares. Las composiciones se pueden hacer a partir de tres fuentes de tejidos de mamíferos, cuatro fuentes de tejidos de mamíferos, cinco fuentes de tejidos de mamíferos, seis fuentes de tejidos de mamíferos, y, posiblemente, hasta diez o más fuentes de tejido. Estas fuentes de tejidos pueden ser del mismo mamífero (por ejemplo la misma vaca, el mismo cerdo, el mismo roedor, el mismo humano, etc.), la misma especie de mamífero (por ejemplo vaca, cerdo, roedor, humano), o de diferentes especies de mamíferos (por ejemplo matriz de hígado de un cerdo, submucosa del intestino delgado de una vaca, y submucosa de la vejiga urinaria de un perro, todo mezclado en la composición).

Las composiciones pueden comprender dos o más matrices líquidas (de diferentes fuentes de tejidos) combinadas juntas. La composición puede ser dos o más matrices de emulsión (de diferentes fuentes de tejidos) combinadas juntas. La composición puede ser dos o más matrices particuladas (de diferentes fuentes de tejidos) combinadas juntas. La composición puede ser una mezcla líquida de dos o más matrices extracelulares.

Por ejemplo, una composición puede comprender una combinación de SIS en forma de hoja, particulada, emulsión, gel o líquida con SS, o LBM, o UBS en forma de hoja, particulada, emulsión, gel o líquido. Por ejemplo, una composición puede comprender una combinación de SS en forma de hoja, particulada, emulsión, gel o líquida con SIS, o LBM, o UBS en forma de hoja, particulada, emulsión, gel o líquido. Por ejemplo, una composición puede comprender una combinación de LBM en forma de hoja, particulada, emulsión, gel o líquida con SS, o SIS, o UBS en forma de hoja, particulada, emulsión, gel o líquido. Por ejemplo, una composición puede comprender una combinación de UBS en

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   forma de hoja, particulada, emulsión, gel o líquida con SS, o SIS, o LBM en forma de hoja, particulada, emulsión, gel o líquido. Las composiciones descritas pueden comprender combinaciones de ECM de mamífero de una o más fuentes pero en dos o más formas distintas. Por ejemplo, una composición puede comprender una matriz de gel combinado con una matriz particulada. En algunos aspectos, la ECM de mamífero en forma particulada se puede espolvorear en ECM de mamífero en una forma de hoja. En algunos aspectos, la composición puede comprender una combinación de SIS, SS, o LBM, o UBS en forma de hoja, emulsión, gel o líquido con SIS, SS, o LBM, o UBS en forma particulada. En algunos aspectos, la composición puede comprender una combinación de SIS, SS, o LBM, o UBS en forma particulada, emulsión, gel o líquida con SIS, SS, o LBM, o UBS en forma de hoja. En algunos aspectos, la composición puede comprender una combinación de SIS, SS, o LBM, o UBS en forma de hoja, particulada, gel o líquida con SIS, SS, o LBM, o UBS en forma de emulsión. En algunos aspectos, la composición puede comprender una combinación de SIS, SS, o LBM, o UBS en forma de hoja, particulada, emulsión, o líquida con SIS, SS, o LBM, o UBS en forma de gel. En algunos aspectos, la composición puede comprender una combinación de SIS, SS, o LBM, o UBS en forma de hoja, particulada, emulsión, o gel con SIS, SS, o LBM, o UBS en forma líquida. Como se describe en la presente, la composición que comprende ECM de mamífero se puede preparar para la consistencia preferida. Por ejemplo, ECM de mamífero se puede preparar como una combinación de gel y particulado en una relación óptima para prevenir la disipación en el torrente sanguíneo. Por ejemplo, la composición que comprende ECM de mamífero puede comprender aproximadamente 40% de ECM en forma de gel y aproximadamente 60% de ECM en forma particulada seca. Así, se describe en la presente una composición que comprende ECM de mamífero tanto en forma de gel como particulada seca, en donde la forma de gel comprende aproximadamente 10, 15, 20, 25, 30, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 50% de la ECM en la composición. Así, la forma particulada seca puede comprender aproximadamente 90, 85, 80, 75, 70, 65, 64, 63, 62, 61, 60, 59, 58, 57, 56, 55, 50% de la ECM en la composición. La selección de las concentraciones de las composiciones líquidas o semisólidas (líquidos, geles, emulsiones o pastas) es importante. Por ejemplo, las formas líquidas se pueden presentar en un intervalo de concentraciones, desde muy diluidas a aproximadamente 0,001 mg/ml a mayores concentraciones de hasta aproximadamente 200 mg/ml. Las concentraciones además se pueden encontrar en intervalos más específicos tales como, por ejemplo, el conjunto de intervalos siguientes: de aproximadamente 5 mg/ml a aproximadamente 150 mg/ml, de aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 125 mg/ml, de aproximadamente 25 mg/ml a aproximadamente 100 mg/ml, de aproximadamente 20 mg/ml a aproximadamente 75 mg/ml, de aproximadamente 25 mg/ml a aproximadamente 60 mg/ml, de aproximadamente 30 mg/ml a aproximadamente 50 mg/ml, de aproximadamente 35 mg/ml a aproximadamente 45 mg/ml, y de aproximadamente 40 mg/ml a aproximadamente 42 mg/ml. Este conjunto de intervalos es ilustrativo y no pretende ser exhaustivo. Se contempla que cualquier valor dentro de cualquiera de estos intervalos enumerados específicamente es un valor razonable y útil de una concentración de un componente líquido o semisólido de la composición. La emulsión puede ser más concentrada que una forma líquida y puede retener una forma que puede ser útil en la aplicación de la composición de matriz a ciertas partes del cuerpo, de ahí su caracterización como una "semisólida". La emulsión se puede concentrar suficiente para formar formas como un tapón u otra configuración adecuada para el lugar en que se aplica la composición de la matriz. La emulsión gruesa se puede pintar o de cualquier otra forma aplicar en el lugar como una pasta, y espolvorear con el sólido particulado en la parte superior de la emulsión. El sólido particulado se puede reconstituir para formar la emulsión, o se pueden aplicar secas como un polvo particulado que puede espolvorear la región en el sujeto que se trata.

El particulado seco o particulado reconstituido que forma una emulsión de dos o más ECM de mamífero se puede mezclar juntos en alguna proporción. Por ejemplo, 50% de SIS se puede mezclar con 50% de SS en un vial. Esta mezcla se puede fluidizar después mediante la hidratación en un tampón adecuado, por ejemplo solución salina. La hidratación se puede alcanzar a una concentración deseada de la mezcla de ECM de mamífero, por ejemplo en un intervalo de aproximadamente 0,001 mg/ml a aproximadamente 200 mg/ml. Las concentraciones además se pueden encontrar en intervalos más específicos tales como por ejemplo el conjunto de intervalos siguientes: de aproximadamente 5 mg/ml a aproximadamente 150 mg/ml, de aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 125 mg/ml, de aproximadamente 25 mg/ml a aproximadamente 100 mg/ml, de aproximadamente 20 mg/ml a aproximadamente 75 mg/ml, de aproximadamente 25 mg/ml a aproximadamente 60 mg/ml, de aproximadamente 30 mg/ml a aproximadamente 50 mg/ml, de aproximadamente 35 mg/ml a aproximadamente 45 mg/ml, y de aproximadamente 40 mg/ml a aproximadamente 42 mg/ml. Este conjunto de intervalos es ilustrativo y no pretende ser exhaustivo. Se contempla que cualquier valor dentro de cualquiera de estos intervalos enumerados específicamente es un valor razonable y útil de una concentración de un componente líquido o semisólido de la composición. Cuanto menor sea la concentración de la matriz extracelular más será la composición líquida. Cuanto mayor sea la

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   concentración de la matriz extracelular más se aproxima la composición a la emulsión tipo gel o consistencia semisólida. La relación de las mezclas de las dos (o más) matrices extracelulares en cualquier composición dada de diferentes fuentes (o la misma fuente) pueden ser desiguales. Así, por ejemplo, LBM puede estar presente al 75% y SIS puede estar presente al 25%, es decir una relación 3:1). Cualquier relación adecuada se puede usar: 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, y así sucesivamente. Donde 3 o más fuentes de tejido de la matriz extracelular se representan en la composición, puede ocurrir el mismo tipo de equilibrio o desequilibrio de las cantidades de las matrices. Por ejemplo, para la matriz extracelular a partir de 3 fuentes, cada fuente puede estar presente en proporciones iguales, es decir, 1:1:1 (33%/33%/33%). Alternativamente, una cantidad desproporcionada del particulado puede ser de una fuente, por ejemplo 2:1:1 (50%/25%/25%). Del mismo modo, las tres fuentes pueden estar presentes en cantidades desproporcionadas, por ejemplo, 50%/30%/20%. Las dos o más ECMs de mamíferos pueden ser fluidizadas (o emulsionadas) por separado y las composiciones fluidizadas o emulsionadas se mezclan entre sí. Como otra alternativa, las dos o más ECMs de mamíferos pueden ser fluidizadas o emulsionadas por separado y se administran por separado. Adicionalmente, las dos o más ECMs de mamíferos pueden permanecer en forma sólida particulada y se mezclan conjuntamente en un frasco para la administración como un particulado de combinación sólido. La rehidratación de una mezcla de ECM de mamífero particulado seco se puede obtener justo antes de usar.

2. Proteínas Las composiciones descritas que comprenden ECM de mamífero pueden comprender además proteínas exógenas, tales como las encontradas normalmente en ECM de mamífero. La proteína puede ser un colágeno, un proteoglicano, una cadena de glicosaminoglicano (GAG), una glicoproteína, un factor de crecimiento, una citoquina, una proteína asociada a la superficie celular, una molécula de adhesión celular (CAM), un factor de crecimiento angiogénico, un ligando endotelial, una matrikina, una metaloproteasa de la matriz, una cadherina, una inmunoglobulina, un colágeno de fibrilla, un colágeno no fibrilar, un colágeno de la membrana basal, un multiplexin, un proteoglicano rico en leucina pequeña, decorina, biglicano, una fibromodulina, keratocan, lumican, epifican, un proteoglicano heparán sulfato, perlecan, agrina, testican, sindecán, glipicano, serglicina, selectina, un lectican, aggrecano, versicano, nuerocan, brevican, dominio-44 citoplasmático (CD-44), factor estimulante de macrófago, proteína precursora de amiloide, heparina, sulfato de condroitina B (dermatan sulfato), sulfato de condroitina A, sulfato de heparano, ácido hialurónico, fibronectina (Fn), tenascina, elastina, fibrilina, laminina, nidogen/entactina, fibulin I, fibulin II, integrina, una molécula transmembrana, factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), factor de crecimiento epidérmico (EGF), factor de crecimiento transformante alfa (TGF-alfa), factor de crecimiento transformante beta (TGF-β), factor de crecimiento de fibroblastos-2 (FGF-2) (llamado además factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF)), trombospondina, osteopontina, enzima convertidora de angiotensina (ACE), o un factor de crecimiento epitelial vascular (VEGF). Esta lista no pretende ser exhaustiva.

Así, las composiciones descritas en la presente que comprende una ECM de mamífero puede comprender colágeno I y III, elastina, laminina, CD44, hialuronano, sindecán, bFGF, HGF, PDGF, VEGF, Fn, tenascina, heparina, sulfato de heparán, sulfato de condroitina B, integrinas, decorina, TGF-β, o una combinación de estos. 3. Células

En algunos aspectos, las composiciones descritas en la presente que comprenden ECM de mamífero comprenden además una o más células, en donde las células no comprenden células madre embrionarias humanas. En algunos aspectos, las células son no nativas, es decir, heterólogas a la ECM de mamífero. En algunos aspectos, las células son células madre. Una lista no exhaustiva de células madre incluye un cardiomiocito fetal, un miofibroblasto, una célula madre mesenquimal, un cardiomiocito autotrasplantado expandido, un adipocito, una célula totipotente, una célula pluripotente, una célula madre de la sangre, un mioblasto, una célula madre adulta, una célula de médula ósea, una célula mesenquimal, una célula madre embrionaria no humana, una célula parenquimal, una célula epitelial, una célula endotelial, una célula mesotelial, un fibroblasto, un osteoblasto, un condrocito, una célula exógena, una célula endógena, una célula madre, una célula madre hematopoyética, una célula madre pluripotente, una célula progenitora derivada de la médula ósea, una célula progenitora, una célula miocárdica, una célula esquelética, una célula fetal, una célula embrionaria no humana, una célula indiferenciada, una célula progenitora multi-potente, una célula progenitora unipotente, un monocito, un cardiomiocito, un mioblasto cardíaco, un mioblasto esquelético, un macrófago, una célula endotelial capilar, una célula xenogénica, una célula alogénica, una célula madre adulta, y una célula madre postnatal.

En algunos aspectos, las células madre tienen el potencial de diferenciarse en células de tejido cardíaco. Así, en algunos aspectos, las células madre son pluripotentes. En algunos aspectos, las células madre son angioblastos o hemangioblastos. En algunos aspectos, las células madre son mioblastos. Las células madre se pueden derivar y mantener usando métodos estándar para cultivo de células madre.

4. Productos Farmacéuticos

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   Las composiciones descritas en la presente que comprenden ECM de mamífero pueden comprender además cualquier sustancia conocida o recién descubierta que se puede administrar al corazón de un sujeto. Por ejemplo, las composiciones descritas en la presente que comprenden ECM de mamífero pueden comprender además un agente antiarrítmico. Agentes antiarrítmicos son un grupo de productos farmacéuticos que se usan para suprimir ritmos rápidos y/o irregulares del corazón (arritmias cardiacas). La clasificación de Vaughan Williams, introducidaen 1970, es uno de los esquemas de clasificación más ampliamente usados para los agentes antiarrítmicos. Este esquema clasifica a un fármaco basado en el mecanismo primario de su efecto antiarrítmico. Existen cinco clases principales en la clasificación Vaughan Williams de agentes antiarrítmicos: los agentes de Clase I interfieren con el canal de sodio (Na+); los agentes de Clase II son agentes anti-sistema nervioso simpático (la mayoría de los agentes en esta clase son los bloqueadores beta); los agentes de Clase III afectan el flujo de potasio (K +); los agentes de Clase IV afectan los canales de calcio y el nodo AV; y los agentes de clase V funcionan por mecanismos desconocidos u otros.

Los agentes Clase Ia incluyen Quinidina, Procainamida, y Disopiramida. Los agentes Clase Ib incluyen Lidocaina, Fenitoína, y Mexiletina. Los agentes Clase Ic incluyen Flecainida, Propafenona, y Moricizina. Los agentes Clase II incluyen Propranolol, Esmolol, Timolol, Metoprolol, y Atenolol. Los agentes Clase III incluyen Amiodarona, Sotalol, Ibutilida, y Dofetilida. Los agentes Clase IV incluyen Verapamilo, y Diltiazem. Los agentes Clase V incluyen Adenosina y Digoxina.

Así, las composiciones descritas en la presente que comprenden ECM de mamíferos pueden comprender además uno o más de Quinidina, Procainamida, Disopiramida, Lidocaína, Fenitoína, Mexiletina, Flecainida, Propafenona, Moricizina, Propranolol, Esmolol, Timolol, Metoprolol, Atenolol, Amiodarona, Sotalol, Ibutilida, Dofetilida, Verapamilo, Diltiazem, Adenosina y Digoxina.

Las composiciones proporcionadas pueden comprender además uno o más antibióticos (por ejemplo, Aminoglucósidos, Cefalosporinas, Cloranfenicol, Clindamicina, Eritromicinas, Fluoroquinolonas, Macrólidos, Azolidas, Metronidazol, Penicilinas, Tetraciclinas, Trimetoprim-sulfametoxazol, y Vancomicina).

Las composiciones proporcionadas pueden comprender además uno o más esteroides (por ejemplo, Andranes (por ejemplo, Testosterona), Colestanos (por ejemplo, Colesterol), Ácidos cólicos (por ejemplo, Ácido cólico), Corticosteroides (por ejemplo, Dexametasona) Estraenos (por ejemplo, Estradiol) y Pregnanos (por ejemplo, Progesterona).

Las composiciones proporcionadas pueden comprender además uno o más clases de analgésicos narcóticos y no narcóticos, que incluyen, pero no limitado a, Morfina, Codeína, Heroína, Hidromorfona, Levorfanol, Meperidina, Metadona, Oxidona, Propoxifeno, Fentanilo, Metadona, Naloxona, Buprenorfina, Butorfanol, Nalbufina, y Pentazocina. Las composiciones proporcionadas pueden comprender además uno o más agentes antiinflamatorios, que incluyen, pero no limitado a, Alclofenac, Dipropionato de Alclometasona, Acetonida de Algestona, alfa amilasa, Amcinafal, Amcinafida, Amfenac sodio, Clorhidrato de amiprilosa, Anakinra, Anirolac, Anitrazafeno, Apazona, Balsalazida disódico, Bendazac, Benoxaprofeno, Clorhidrato de bencidamina, Bromelains, Broperamol, Budesonida, Carprofeno, Cicloprofeno, Cintazona, Cliprofen, Clobetasol Propionato, Clobetasone Butirato, Clopirac, Cloticasone Propionato, Cormethasona Acetato, Cortodoxona, Decanoato, Deflazacort, Delatestril, Depo-Testosterona, Desonida, Desoximetasona, Dexametasona Dipropionato, Diclofenaco potásico, Diclofenaco sódico, Diacetato de diflorasona, Diflumidona sódica, Diflunisal, Difluprednato, Diftalona, Dimetil sulfóxido, Drocinonida, Endrisona, Enlimomab, Enolicam sódico, Epirizol, Etodolac, Etofenamato, Felbinac, Fenamol, Fenbufen, Fenclofenac, Fenclorac, Fendosal, Fenpipalona, Fentiazac, Flazalona, Fluazacort, Ácido flufenámico, Flumizol, Acetato de flunisolida, Flunixin, Flunixin Meglumina, Fluocortin butilo, Acetato de fluometolona, Fluquazona, Flurbiprofeno, Fluretofen, Propionato de Fluticasona, Furaprofen, Furobufen, Halcinonida, Propionato de halobetasol, Acetato de Halopredona, Ibufenac, Ibuprofeno, Ibuprofeno aluminio, Ibuprofeno Piconol, Ilonidap, Indometacina, Indometacina sódica, Indoprofeno, Indoxol, Intrazol, Acetato de isoflupredona, Isoxepaco, Isoxicam, Ketoprofeno, Clorhidrato de Lofemizol, Lomoxicam, Loteprednol Etabonato, Meclofenamato sódico, Ácido meclofenámico, Dibutirato de Meclorisona, Ácido mefenámico, Mesalamina, Meseclazona, Mesterolona, Metandrostenolona, Metenolona, Acetato de Metenolona, metilprednisolona Suleptanato, Momiflumato, Nabumetone, Nandrolona, Naproxeno, Naproxeno Sódico, Naproxol, Nimazona, Olsalazina sódica, Orgoteina, Orpanoxina, Oxandrolano, Oxaprozin, Oxifenbutazona, Oximetolona, Clorhidrato de paranilina, Polisulfato de Pentosan sodio, glicerato de fenbutazona sódica, Pirfenidona, Cinamato de piroxicam, Piroxicam, Piroxicam Olamina, Pirprofeno, Prednazate, Prifelone, Ácido prodolico, Proquazona, Proxazole, Proxazol citrato, Rimexolona, Romazarit, Salcolex, Salnacedin, Salsalato, Cloruro de Sanguinarium, Seclazona, Sermetacin, Stanozolol, Sudoxicam, sulindaco, suprofeno, Talmetacina, Talniflumato, Talosalato, Tebufelona, Tenidap, Tenidap Sódico, Tenoxicam, Tesicam, Tesimida, Testosterona, Mezclas de testosterona, Tetrydamina, Tiopinac, Tixocortol Pivalato, Tolmetina, Tolmetina Sódica, Triclonida, Triflumidato, Zidometacina, y Zomepirac sódico. Las composiciones proporcionadas pueden comprender además uno o más fármacos hipolipemiantes. Como se utiliza en la presente, el término " fármaco hipolipemiante" se refiere a un fármaco que se pueden administrar a un sujeto para

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   reducir los niveles séricos de varios lípidos asociados a enfermedades del corazón, que incluyen, pero no se limitan a, colesterol, lipoproteína de baja densidad (LDL), lipoproteína de muy baja densidad (VLDL) y triglicéridos. Por ejemplo, los fármacos hipolipemiantes pueden ser estatinas, que incluyen, pero no se limita a, Lovastatina, Simvastatina, Atorvastatina, Fluvastatina, Pravastatina, Rosuvastatina, Cervistatin y Pitavastatina. Se contempla que cualquier fármaco estatina, ahora conocido o desarrollado en el futuro, que temga propiedades reductoras de lípidos y/o antiinflamatorias puede ser usado en las composiciones descritas en la presente descripción. Las composiciones proporcionadas pueden comprender además uno o más agentes anti-histamínicos, que incluyen, pero no se limita a, Etanolaminas (como carbinoxamina difenhidramina) Etilendiamina (como pirilamina tripelennamina), Alquilamina (como clorfeniramina, dexclorfeniramina, bromfeniramina, triprolidina), astemizol, loratadina, fexofenadina, BroFeniramina, Clemastina, Acetaminofén, y Pseudoefedrina. Las composiciones proporcionadas pueden comprender además uno o más fármacos antineoplásico, que incluyen, pero no limitado a, Acivicina, Aclarubicina, Clorhidrato de Acodazol, AcrQnine, Adozelesina, Aldesleukina, Altretamina, Ambomicina, Acetato de Ametantrona, Aminoglutetimida, Amsacrina, Anastrozol, Antramicina, Asparaginasa, Asperlin, Azacitidina, Azetepa, Azotomicina, Batimastat, Benzodepa, Bicalutamidae, Bisantreno Clorhidrato, Bisnafida Dimesilato, Bizelesina, Sulfato de Bleomicina, Brequinar sodio, Bropirimina, Busulfan, Cactinomicina, Calusterona, Caracemida, Carbetimer, Carboplatino, carmustina, Clorhidrato de Carubicina, Carzelesin, Cedefmgol, Clorambucil, Cirolemicina, Cisplatino, Cladribina, Crisnatol Mesilato, Ciclofosfamida, Citarabina, Dacarbazina, Dactinomicina, Clorhidrato de Daunorubicina, Decitabina, Dexormaplatino, Dezaguanina, Dezaguanina Mesilato, Diaziquona, Docetaxel, Doxorubicina, Clorhidrato de Doxorrubicina, Droloxifeno, Citrato de Droloxifeno, Propionato de Dromostanolona, Duazomicina, Edatrexato, Eflomitina Clorhidrato, Elsamitrucino, Enloplatino, Enpromato, Epipropidina, Clorhidrato de Epirubicina, Erbulozol, Clorhidrato de Esorubicina, Estramustina, Fosfato de Estramustina sódico, Etanidazol, Aceite Etiodizado I 131, Etopósido, Etopóido Fosfato, Etoprina, Clorhidrato de Fadrozol, Fazarabina, Fenretinida, Floxuridina, Fosfato de Fludarabina, Fluorouracil, Flurocitabina, Fosquidona, Fostriecin sodio, Gemcitabina, Clorhidrato de Gemcitabina, Oro Au 198, Hidroxiurea, Idarubicina Clorhidrato, Ifosfamida, Ilmofosina, Interferón Alfa-2a, Interferón Alfa-2b, Interferón Alfa-n1, Interferón Alfa-n3, Interferón Beta- I a, Interferón Gamma- Ib, Iproplatino, Clorhidrato de Irinotecan, Acetato de Lanreotide, Letrozol, Acetato de Leuprolida, Clorhidrato de Liarozol, Lometrexol sodio, Lomustina, Clorhidrato de losoxantrona, Masoprocol, Maitansina, Mecloretamina Clorhidrato, Acetato de Megestrol, Melengestrol Acetato, Melfalán, Menogaril, Mercaptopurina, Metotrexato, Metotrexato sodio, Metoprina, Meturedepa, Mitindomide, Mitocarcin, Mitocromin, Mitogillin, Mitomalcin, Mitomicina, Mitosper, Mitotano, Mitoxantrona Clorhidrato, Ácido Micofenólico, Nocodazol, Nogalamicina, Ormaplatino, Oxisuran, Paclitaxel, Pegaspargase, Peliomicina, Pentamustina, Peplomicina sulfato, Perfosfamida, Pipobroman, Piposulfan, Piroxantrona clorhidrato, Plicamicina, Plomestana, Porfimer sodio, Porfiromicina, Prednimustina, Procarbazina Clorhidrato, Puromicina, Puromicina Clorhidrato, Pirazofurin, Riboprina, Rogletimida, Safmgol, Safingol Clorhidrato, Semustina Simtrazena, Sparfosato sodio, Sparsomicina, Spirogermanium Clorhidrato, Spiromustina, Spiroplatino, Estreptonigrina, Streptozocin, Cloruro de estroncio Sr 89, Sulofenur, Talisomicina, Taxano, Taxoide, Tecogalan sodio, Tegafur, Teloxantrona Clorhidrato, Temoporfin, Tenipósido, Teroxirone, Testolactona, Tiamiprina, Tioguanina, tiotepa, Tiazofurin, Tirapazamina, Topotecan clorhidrato, Toremifeno citrato, Trestolone acetato, Triciribina fosfato, Trimetrexato, Trimetrexato Glucuronato, Triptorelin, Tubulozol Clorhidrato, Mostaza de Uracilo, Uredepa, Vapreotide, Verteporfin, Vinblastina Sulfato, Vincristina Sulfato, Vindesina, Vindesina Sulfato, Vinepidina sulfato, Vinglicinato sulfato, Vinleurosina Sulfato, Vinorelbina tartrato, Vinrosidina Sulfato, Vinzolidina Sulfato, Vorozol, Zeniplatino, Zinostatino, y Zorubicin Clorhidrato.

La composición proporcionada en la presente descripción puede comprender además uno o más radiosensibilizadores, que incluyen, pero no se limita a, gemcitabina, 5-fluorouracilo, pentoxifilina, y vinorelbina. 5. Portadores La ECM de mamífero descrita se puede combinar, conjugar o acoplar con o a los portadores y otras composiciones para ayudar a la administración, entrega u otros aspectos de la ECM y su uso. Por conveniencia, tales composiciones en la presente descripción se refieren como portadores. Los portadores pueden, por ejemplo, ser una molécula pequeña, producto farmacéutico, ácido graso, marcador detectable, etiqueta de conjugación, nanopartícula, o enzima.

Las composiciones descritas se pueden usar terapéuticamente en conjunto con un portador farmacéuticamente aceptable. Por " farmacéuticamente aceptable" se entiende un material que no es biológicamente o de cualquier otra forma no deseable, es decir, el material se puede administrar al sujeto, junto con la composición, sin causar cualquier efecto biológico no deseable o interactuar en una manera perjudicial con cualquiera de los demás componentes de la composición farmacéutica en la que está contenido. El portador, se podría naturalmente, seleccionar para minimizar cualquier degradación del ingrediente activo y para minimizar cualquier efecto secundario adverso en el sujeto, que serían bien conocidos por un experto en la técnica. Los portadores adecuados y sus formulaciones se describen en Remington: The Science and Practice of Pharmacy (19na edición) ed. A.R. Gennaro, Mack Publishing Company, Easton, PA 1995. Típicamente, una cantidad adecuada de una sal farmacéuticamente aceptable se usa en la formulación para hacer la formulación isotónica. Ejemplos de

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   portador farmacéuticamente aceptable incluyen, pero no se limitan a, solución salina, solución de Ringer y solución de dextrosa. El pH de la solución es preferentemente de aproximadamente 5 a aproximadamente 8, y con mayor preferencia de aproximadamente 7 a aproximadamente 7,5. Portadores adicionales incluyen las preparaciones de liberación sostenida, tales como matrices semipermeables de polímeros hidrofóbicos sólidos que contienen la composición, cuyas matrices están en forma de artículos con forma de, por ejemplo, películas, liposomas o micropartículas. Resultarán evidentes para las personas experimentadas en la técnica que ciertos portadores pueden ser más preferibles dependiendo de, por ejemplo, la vía de administración y la concentración que se administra de la composición.

Los portadores farmacéuticos son conocidos por aquellos con experiencia en la técnica. Estos serían más típicamente portadores estándar para la administración de fármacos a los humanos, que incluyen soluciones tales como agua estéril, solución salina y soluciones tamponadas a pH fisiológico. Las composiciones farmacéuticas pueden incluir portadores, espesantes, diluyentes, tampones, conservantes, agentes tensioactivos y similares, adicionalmente a la molécula de elección. Las composiciones farmacéuticas pueden incluir además uno o más ingredientes activos tales como agentes antimicrobianos, agentes antiinflamatorios, anestésicos y similares. Las preparaciones para la administración parenteral incluyen emulsiones, suspensiones o soluciones estériles acuosas o no acuosas. Los ejemplos de solventes no acuosos son propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales como aceite de oliva, y ésteres orgánicos inyectables como oleato de etilo. Los portadores acuosos incluyen agua, soluciones alcohólicas/acuosas, emulsiones o suspensiones, incluyendo solución salina y medios tamponados. Los vehículos parenterales incluyen solución de cloruro sódico, dextrosa de Ringer, dextrosa y cloruro sódico, aceites fijos y de Ringer lactato. Los vehículos intravenosos incluyen reponedores de fluidos y nutrientes, reponedores de electrolitos (tales como los basados en dextrosa de Ringer), y similares. Conservantes y otros aditivos pueden estar presentes, tales como, por ejemplo, antimicrobianos, antioxidantes, agentes quelantes, y gases inertes y similares. Las formulaciones para la administración tópica pueden incluir pomadas, lociones, cremas, geles, gotas, supositorios, atomizadores, líquidos y polvos. Portadores farmacéuticos convencionales, acuosos, en polvo o bases oleosas, espesantes y similares pueden ser necesarios o deseables. Las composiciones para la administración oral incluyen polvos o gránulos, suspensiones o soluciones en agua o medio no acuoso, cápsulas, sobres o comprimidos. Espesantes, aromatizantes, diluyentes, emulsionantes, coadyuvantes de dispersión o aglutinantes pueden ser deseables.

Algunas de las composiciones se pueden administrar potencialmente como una sal de adición de ácido o base farmacéuticamente aceptable, formada por la reacción con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido perclórico, ácido nítrico, ácido tiociánico, ácido sulfúrico y ácido fosfórico, y ácidos orgánicos tales como ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido láctico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido malónico, ácido succínico, ácido maleico y ácido fumárico, o mediante la reacción con una base inorgánica tal como hidróxido de sodio, hidróxido de amonio, hidróxido de potasio, y bases orgánicas tales como mono-, di-, trialquil y aril aminas y etanolaminas sustituidas. D. Métodos para preparar las composiciones Las composiciones descritas en la presente se pueden hacer usando cualquier método conocido por los expertos en la técnica para ese reactivo en particular o compuesto a menos que de cualquier otra forma se indique específicamente. Por ejemplo, la Patente de Estados Unidos núm. 5.275.826, la Patente de Estados Unidos núm. 5.554.389, la Patente de Estados Unidos núm. 6.099.567, yla Patente de Estados Unidos núm. 6.379.710, se describen en la presente como referencia de los métodos para preparar las composiciones que comprenden la submucosa del intestino delgado (SIS), submucosa de la vejiga urinaria (UBS), submucosa de estómago (SS), y submucosa de hígado (LS) o membrana basal del hígado (LBM), respectivamente. E. EJEMPLOS

Los siguientes ejemplos se plantean para proporcionar a las personas de habilidad ordinaria en la técnica una descripción completa y descripción de cómo los compuestos, composiciones, artículos y/o dispositivos reivindicados en la presente descripción se elaboran y evalúan y se pretenden que sean puramente ilustrativos y no pretenden limitar la descripción. Se han hecho esfuerzos para asegurar la precisión con respecto a los números (por ejemplo, cantidades, temperatura, etc.), pero algunos errores y desviaciones no deberían ser contabilizados. A menos que se indique de cualquier otra forma, las partes son partes en peso, la temperatura es en °C o es a temperatura ambiente, y la presión es o próxima a la atmosférica. 1. Ejemplo 1: Evaluación Retrospectiva del Nuevo Inicio de Fibrilación Auricular Postoperatoria en Pacientes que reciben el CorMatrix® ECM™.

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   Una revisión de las historias clínicas retrospectiva, multicentro, de dos brazos, se condujo en la que se usó el CorMatrix® ECM™. El objetivo de este ensayo retrospectivo fue evaluar si la utilización de CorMatrix®ECM™ para reconstruir la barrera pericárdica normal puede resultar en una velocidad inferior del nuevo inicio de fibrilación auricular postoperatoria en comparación con los pacientes que no se sometieron a cierre pericárdico.

CorMatrix® ECM™ se puede usar para la reconstrucción y reparación del pericardio a continuación de la cirugía a corazón abierto. El pericardio intacto, proporciona restricción pasiva al corazón que previene la sobre dilatación y que ayuda a modular cambios volumétricos abruptos. Al reconstruir el pericardio con CorMatrix® ECM™, el pericardio natural se puede restaurar. El propósito de este ensayo clínico retrospectivo fue evaluar si existe una reducción observada en el nuevo inicio de fibrilación auricular postoperatoria mediante el análisis de pacientes que tuvieron su pericardio nativo reconstruido con la CorMatrix® ECM™ en comparación con aquellos que no se sometieron a cierre pericárdico a continuación de los procedimientos de injerto de la derivación de la arteria coronaria aislada (CABG). La CorMatrix® ECM™ se suministró en hojas de cuatro capas de varias dimensiones, que se pueden cortar a la medida según el médico considere necesario para el procedimiento. La definición del nuevo inicio de fibrilación auricular postoperatoria usado para este estudio retrospectivo se basa en la definición usada en la Base de datos Cirugía Cardiaca de Adultos 2007 de la Sociedad de Cirujanos Torácicos (STS). La definición es como sigue: "Indique si el paciente tuvo un nuevo inicio de Fibrilación Auricular/Aleteo (AF) que requiere el tratamiento. No incluye recurrencia de AF que había estado presente antes de la operación. No incluye pacientes que tuvieron fibrilación auricular preoperatoria (tratado o no tratado). El evento debe ser de nuevo origen. Todos los pacientes se obligaron a cumplir los siguientes criterios de inclusión para ser incluidos como parte de este ensayo clínico retrospectivo: esta operación cardiaca fue la operación cardiaca primera o primaria del sujeto, y el sujeto se habrá sometido a un procedimiento CABG aislado. Los pacientes no se incluyeron como parte de este ensayo clínico retrospectivo si uno o más de los siguientes criterios de exclusión se cumple: antecedentes de fibrilación auricular, antecedentes de cirugía a corazón abierto, antecedentes de pericarditis, antecedentes de amiodarona en los últimos seis meses y cirugía valvular concomitante.

Los pacientes que tuvieron sus pericardio nativos reconstruidos con la CorMatrix® ECM™ tuvieron una disminución estadísticamente significativa en la incidencia de A-fib en comparación con aquellos que no se sometieron a cierre pericárdico a continuación de los procedimientos CABG aislados. La incidencia habitual de la A-fib es de alrededor de 25%. Para estos estudios, la incidencia A-fib fue entre 4% y 8% (1/25 y 4/52).

2. Ejemplo de Referencia 1: La modulación de la Remodelación Cardiaca con Emulsión de la Matrix Acelular se asocia con la Proliferación de Miofibroblastos y Angiogénesis a través del Reclutamiento de Células c-kit Positivas después del Infarto de Miocardio

La degradación de la matriz extracelular nativa (ECM) se ha asociado con la remodelación cardiaca de mala adaptación después del infarto. Como se muestra en la presente descripción la emulsión de la matriz acelular xenogeneica inyectada en el miocardio infartado promovió la proliferación de miofibroblastos y la angiogénesis mediante el reclutamiento de células del huésped c-kit positivas.

Sesenta y cuatro ratas se sometieron a 45 minutos de isquemia regional seguido de 3, 7, 21 y 42 días de reperfusión. El examen histológico se realizó mediante tinción inmunohistoquímica, y la función cardiaca se analizó usando ecocardiografía. La emulsión ECM (30 -50 µl) se inyectó en el área en el miocardio de riesgo después de la reperfusión y la localización de la emulsión se confirmó con tinción Masson Trichome. A los 7 días de reperfusión, la población de células c-kit positivas dentro del área de emulsión aumentó significativamente en relación con el control (32±0,6* vs.

15±3/1000 núcleos), consistente con la expresión significativamente mejorada de factor de células madre de 31 kDa detectado por Transferencia de Tipo Western. Junto con este cambio, los miofibroblastos se acumularon en la región de emulsión con un grado significativo en comparación con el control (59±8* vs. 30±3/HPF). Inmunorreactividad fuerte de VEGF se observó en el área de la emulsión y la angiogénesis se mejoró significativamente con respecto al control, evidenciado por aumento de la densidad de los vasos de músculo liso positivos a α-actina (70±10* vs. 20±4/HPF) y los vasos positivos a vWF (95±14* vs. 34±8/HPF), respectivamente. A los 42 días de reperfusión, la ecocardiografía mostró mejoras en el volumen sistólico final (0,3±0,1* vs. 0,6±0,3 ml)), acortamiento fraccionado (33±5* vs. 24±6%) y fracción de eyección (67±6* vs. 53±10%) en el grupo de emulsión. El espesor de la pared del tabique anterior medio infartado en el grupo de emulsión fue además significativamente mayor que en el Control (0,19±0,02* vs. 0,15±0.02cm).

La inyección intramiocárdica de una emulsión de matriz extracelular acelular en el miocardio reperfundido/isquémico atenuó la remodelación cardiaca de mala adaptación y la función cardíaca conservada, potencialmente mediada por proliferación de miofibroblastos mejorada y la angiogénesis a través de reclutamiento de células c-kit positivas.* p<0,05 emulsión vs. control.

E10744236 ES 2 553 762 T3 19-11-2015   Reivindicaciones 1.

Una composición que comprende una matriz extracelular de mamífero para usar en la prevención de la fibrilación auricular o fibrilación ventricular en donde la composición se administra a una abertura en el saco pericárdico del corazón.

2.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la matriz extracelular de mamífero se selecciona a partir del grupo que consiste de submucosa de intestino delgado, submucosa de vejiga urinaria, submucosa de estómago, submucosa de hígado, y membrana basal de hígado.

3.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la matriz extracelular de mamífero no es submucosa de intestino delgado.

4.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la matriz extracelular de mamífero se produce in vitro a partir del cultivo de células de mamíferos.

5.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la composición comprende además la matriz extracelular sintética.

6.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la matriz extracelular de mamífero se selecciona a partir del grupo de tejidos consistente de dermis, fascia, pericardio, tejido del parénquima, y matriz extracelular del miocardio.

7.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la matriz extracelular de mamífero es un andamio de colágeno de una fuente de tejido de mamífero.

8.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la matriz extracelular de mamífero es un parche, inyectable, en una forma fluidizada, emulsionada, un polvo o un aerosol, o se atomiza sobre el tejido cardíaco.

9.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el uso es en un sujeto que se ha sometido a una operación de corazón.

10.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el uso es en un sujeto que ha tenido un infarto de miocardio.

11.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la composición comprende además, un fármaco antiarrítmico, un fármaco hipolipemiante, o un fármaco antiinflamatorio.

12.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la composición además comprende células, en donde las células no comprenden células madre embrionarias humanas.

13.

La composición para usar de acuerdo con la reivindicación 12, en donde las células son células madre que no comprenden células madre embrionarias humanas.