Polipéptidos homólogos a IL-17 y usos terapéuticos de los mismos.

Ácido nucleico aislado que tiene al menos un 80% de identidad en la secuencia de ácidos nucleicos con:



(a) una secuencia de nucleótidos que codifica los residuos 1 o Y a Z o 667 del polipéptido mostrado en la figura 16, siendo Y cualquier número de 19 a 29 y siendo Z cualquier número de 449 a 459;

(b) la secuencia de nucleótidos mostrada en la figura 5 (SEQ ID NO:15); o

(c) la secuencia codificante de longitud completa de la secuencia de nucleótidos mostrada en la figura 15 (SEQ ID NO:15), en la que dicho ácido nucleico codifica un polipéptido capaz de (i) incrementar la proliferación de linfocitos T en un mamífero y/o (ii) incrementar la infiltración de células inflamatorias en un tejido de un mamífero.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E07016903.

Solicitante: GENENTECH, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1 DNA WAY SOUTH SAN FRANCISCO, CA 94080-4990 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: GODOWSKI, PAUL, J., GURNEY, AUSTIN, L., GODDARD, AUDREY, TUMAS, DANIEL, CHEN, JIAN, WOOD, WILLIAM, I., FONG, SHERMAN, WILLIAMS, P. MICKEY, FILVAROFF, ELLEN, WATANABE, COLIN, K., VANDLEN, RICHARD, L., HILLAN,KENNETH J, YANSURA,DANIEL,G, LI,HANZHONG, GRIMALDI,CHRISTOPHER,J, van Lockeren,Menno.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A61K31/70 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 31/00 Preparaciones medicinales que contienen ingredientes orgánicos activos. › Hidratos de carbono; Azúcares; Sus derivados (sorbitol A61K 31/047).
  • A61K38/17 A61K […] › A61K 38/00 Preparaciones medicinales que contienen péptidos (péptidos que contienen ciclos beta-lactama A61K 31/00; dipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina 2,5-dionas, A61K 31/00; péptidos basados en la ergolina A61K 31/48; que contienen compuestos macromoleculares que tienen unidades aminoácido repartidas estadísticamente A61K 31/74; preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos A61K 39/00; preparaciones medicinales caracterizadas por los ingredientes no activos, p. ej. péptidos como soportes de fármacos, A61K 47/00). › que provienen de animales; que provienen de humanos.
  • A61K38/20 A61K 38/00 […] › Interleuquinas.
  • A61K39/395 A61K […] › A61K 39/00 Preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos (materiales para ensayos inmunológicos G01N 33/53). › Anticuerpos (aglutininas A61K 38/36 ); Inmunoglobulinas; Inmunosuero, p. ej. suero antilinfocitario.
  • C07K14/54 QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Interleuquinas (IL).
  • C07K14/715 C07K 14/00 […] › para citoquinas; para linfoquinas; para interferones.
  • C07K16/24 C07K […] › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › contra citoquinas, linfoquinas o interferones.
  • C07K16/28 C07K 16/00 […] › contra receptores, antígenos celulares de superficie o determinantes celulares de superficie.
  • C12N15/12 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Genes que codifican proteínas animales.
  • C12N15/62 C12N 15/00 […] › Secuencias de ADN que codifican proteínas de fusión.
  • G01N33/53 FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
  • G01N33/566 G01N 33/00 […] › utilizando un soporte específico o proteínas receptoras como reactivos para la formación de uniones por ligando.

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Fragmento de la descripción:

Polipéptidos homólogos a IL-17 y usos terapéuticos de los mismos.

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere generalmente a la identificación y aislamiento de ADN y a la producción recombinante de polipéptidos nuevos con similitud de secuencia con la interleucina-17 y la proteína receptora interleucina-17, designada aquí como polipéptidos "PRO".

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Las proteínas extracelulares juegan un papel importante en, entre otras cosas, la formación, la diferenciación y el mantenimiento de los organismos multicelulares. El destino de muchas células individuales, es decir, la proliferación, migración, diferenciación, o la interacción con otras células, normalmente se rigen por la información recibida de otras células y/o el entorno inmediato. Esta información se suele transmitir por polipéptidos secretados (por ejemplo, factores mitogénicos, factores de supervivencia, factores citotóxicos, factores de diferenciación, neuropéptidos y hormonas) que es, a su vez, recibida e interpretada por diversos receptores de las células o proteínas de membrana. Estos polipéptidos secretados o moléculas de señalización normalmente pasan por la vía de secreción celular para llegar a su sitio de acción en el medio extracelular.

Las proteínas secretadas tienen diversas aplicaciones industriales, incluyendo los productos farmacéuticos, de diagnóstico, biosensores y biorreactores. La mayoría de los fármacos de proteínas disponibles en la actualidad, tales como agentes trombolíticos, interferones, interleucinas, eritropoyetina, factores estimulantes de colonias, y otras varias citoquinas, son proteínas secretoras. De sus receptores, que son proteínas de membrana, también tienen potencial como agentes terapéuticos o de diagnóstico.

Las proteínas unidas a la membrana y receptores pueden desempeñar un papel importante en, entre otras cosas, la formación, la diferenciación y el mantenimiento de los organismos multicelulares. El destino de muchas células individuales, es decir, proliferación, migración, diferenciación, o interacción con otras células, normalmente se rigen por la información recibida de otras células y/o el entorno inmediato. Esta información se suele transmitir por polipéptidos secretados (por ejemplo, factores mitogénica, factores de supervivencia, factores citotóxicos, factores de diferenciación, neuropéptidos y hormonas) que es, a su vez, recibida e interpretada por diversos receptores de las células o proteínas de membrana. Dichas proteínas unidas a la membrana y receptores de la célula incluyen, pero no están limitados a, los receptores de las citoquinas, receptores quinasas, fosfatasas de los receptores, los receptores implicados en las interacciones célula-célula, y las moléculas de adhesina celular como selectinas e integrinas. Por ejemplo, la transducción de señales que regulan el crecimiento y la diferenciación celular está regulada en parte por la fosforilación de varias proteínas celulares. Quinasas tirosina de proteínas, enzimas que catalizan este proceso, también puede actuar como receptores del factor de crecimiento. Los ejemplos incluyen los receptores de factor de crecimiento de fibroblastos y factor de crecimiento del nervio receptor de factor.

De manera similar a las proteínas secretadas, las proteínas unidas a la membrana y las moléculas de los receptores tienen diversas aplicaciones industriales, incluso como agentes farmacéuticos y de diagnóstico. Inmunoadhesinas receptoras, por ejemplo, pueden ser empleadas como agentes terapéuticos para bloquear las interacciones receptor-ligando. Las proteínas unidas a la membrana también pueden ser empleadas para la detección de péptido o inhibidores de molécula pequeña potenciales de la interacción receptor/ligando relevante.

Se están realizando esfuerzos tanto por la industria y el mundo académico para identificar nuevas proteínas secretadas nativas y el receptor nativo o proteínas unidas a la membrana. Muchos esfuerzos se centran en la selección de las librerías de ADN recombinante de mamíferos para identificar las secuencias que codifican las nuevas proteínas secretadas. Ejemplos de procedimientos y técnicas están descritos en la literatura [ver, por ejemplo, Klein et al., Proc. Natl. Acad. Sci.., 93:7108-7113 (1996) ; U. S. Patent No. 5.536.637) ].

En este sentido, la presente invención se refiere a la identificación de nuevos polipéptidos y receptores secretados de la familia de la interleucina-17 (IL-17) que han demostrado estar relacionados con las enfermedades inmunomediadas e inflamatorias. Enfermedades inmunes e inflamatorias relacionadas son la manifestación o consecuencia a menudo de varias vías biológicas interconectadas bastante complejas, que en la fisiología normal son críticas para responder al ataque o lesión, iniciar la reparación del ataque o lesión, y montar la defensa innata y adquirida frente a los organismos extraños. La enfermedad o patología se produce cuando estas vías fisiológicas normales causan un ataque o lesión adicional ya sea directamente relacionado con la intensidad de la respuesta, como consecuencia de la regulación anormal o excesiva estimulación, como reacción a la misma, o como una combinación de éstas.

Aunque la génesis de estas enfermedades a menudo involucra vías de varias etapas y a menudo caminos múltiples sistemas y vías biológicos diferentes, la intervención en los puntos críticos en una o más de estas vías puede tener un efecto paliativo o terapéutico. La intervención terapéutica puede ocurrir ya sea por antagonismo de un proceso/vía de detrimento o la estimulación de un proceso/vía beneficioso.

Muchas enfermedades autorelacionadas con el sistema inmune son conocidas y han sido ampliamente estudiados. Esas enfermedades incluyen son las enfermedades inflamatorios inmuno-mediadas (como la artritis reumatoide, enfermedad renal inmuno-mediada, enfermedades hepatobiliares, enfermedad inflamatoria intestinal (EII) , psoriasis y asma) , enfermedades inflamatorias no inmuno mediadas, enfermedades infecciosas, enfermedades de inmunodeficiencia, la neoplasia, etc.

Los linfocitos T (células T) son un componente importante de una respuesta inmune de los mamíferos. Las células T reconocen los antígenos que están asociados con una auto-molécula codificada por los genes del complejo principal de histocompatibilidad (MHC) . El antígeno se puede mostrar junto con las moléculas de MHC en la superficie de células que presentan antígenos, células infectadas por virus, células cancerosas, injertos, etc. El sistema de células T elimina estas células alteradas que representan una amenaza para la salud del mamífero huésped. Las células T incluyen linfocitos colaboradores T y células T citotóxicas. Las células T colaboradoras proliferan de manera extensiva a raíz del reconocimiento de un complejo antígeno-MHC en la presentación de un antígeno de la célula. Las células T colaboradoras también secretan una gran variedad de citocinas, es decir, linfocinas, que desempeñan un papel central en la activación de células B, células T citotóxicas y una variedad de otras células que participan en la respuesta inmune.

Un acto central, tanto en las respuestas inmunes humoral y mediada por células es la activación y expansión clonal de las células T colaboradoras. La activación de células T colaboradoras se inicia por la interacción del receptor de células T (TCR) - complejo CD3 con un antígeno-MHC en la superficie de una célula que presente un antígeno. Esta interacción media en una cascada de eventos bioquímicos que inducen al descanso de células T auxiliares para entrar en un ciclo celular (el G0 a la transición G1) y resulta en la expresión de un receptor de alta afinidad para IL-2 y algunas veces IL-4. La célula T activada avanza a través del ciclo proliferando y diferenciándose en las células de memoria o células efectoras.

Además de las señales mediadas por el TCR, la activación de células T implica coestimulación adicional inducida por citocinas liberadas por las células que presentan antígenos o por medio de interacciones con las moléculas unidas a la membrana de la célula que presenta el antígeno y la célula T. Las citocinas IL-1 e IL-6 se ha demostrado que proporcionan una señal de coestimuladora. Además, la interacción entre la molécula B7 expresada en la superficie de células presentadoras de un antígeno y moléculas CD28 y CTLA-4 expresadas en la superficie de las células T efectúan la activación de células T.... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Ácido nucleico aislado que tiene al menos un 80% de identidad en la secuencia de ácidos nucleicos con:

(a) una secuencia de nucleótidos que codifica los residuos 1 o Y a Z o 667 del polipéptido mostrado en la figura 16, siendo Y cualquier número de 19 a 29 y siendo Z cualquier número de 449 a 459;

(b) la secuencia de nucleótidos mostrada en la figura 5 (SEQ ID NO:15) ; o

(c) la secuencia codificante de longitud completa de la secuencia de nucleótidos mostrada en la figura 15 (SEQ ID NO:15) ,

en la que dicho ácido nucleico codifica un polipéptido capaz de (i) incrementar la proliferación de linfocitos T en un mamífero y/o (ii) incrementar la infiltración de células inflamatorias en un tejido de un mamífero.

2. Ácido nucleico aislado que tiene al menos un 80% de identidad en la secuencia de ácidos nucleicos con la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo ATCC de número de acceso PTA-1082, en el que dicho ácido nucleico codifica un polipéptido capaz de (i) incrementar la proliferación de linfocitos T en un mamífero y/o (ii) incrementar la infiltración de células inflamatorias en un tejido de un mamífero.

3. Vector que comprende el ácido nucleico según la reivindicación 1.

4. Vector según la reivindicación 3, unido operativamente a secuencias de control reconocidas por una célula huésped transformada con el vector.

5. Célula huésped que comprende el vector según la reivindicación 4.

6. Célula huésped según la reivindicación 5, en la que dicha célula es una célula CHO, una célula de E. Coli, una célula de levadura o una célula de insecto infectada con Baculovirus.

7. Polipéptido aislado que tiene al menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con los residuos 1 o Y a Z o 667 del polipéptido mostrado en la figura 16, siendo Y cualquier número de 19 a 29 y siendo Z cualquier número de 449 a 459; en el que dicho polipéptido es capaz de (i) incrementar la proliferación de linfocitos T en un mamífero y/o (ii) incrementar la infiltración de células inflamatorias en un tejido de un mamífero.

8. Polipéptido aislado que tiene al menos un 80% de identidad en la secuencia de aminoácidos con una secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia codificante de longitud completa del ADNc depositado bajo ATCC de número de acceso PTA-1082, en el que dicho polipéptido es capaz de (i) incrementar la proliferación de linfocitos T en un mamífero y/o (ii) incrementar la infiltración de células inflamatorias en un tejido de un mamífero.

9. Proceso para producir el polipéptido PRO según la reivindicación 7 u 8, que comprende cultivar una célula huésped bajo condiciones adecuadas para la expresión de dicho polipéptido y recuperar dicho polipéptido del cultivo celular, en el que dicha célula huésped comprende un vector unido operativamente a secuencias de control reconocidas por la célula huésped, comprendiendo dicho vector una secuencia que codifica dicho polipéptido PRO.

10. Molécula quimérica que comprende un polipéptido según la reivindicación 7 u 8, fusionada a una secuencia de aminoácidos heteróloga.

11. Molécula quimérica según la reivindicación 10, en la que dicha secuencia de aminoácidos heteróloga es una secuencia de epítopo etiqueta o una región Fc de una inmunoglobulina

12. Anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido según la reivindicación 7 u 8.

13. Anticuerpo según la reivindicación 12, en el que dicho anticuerpo es un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo humanizado o un anticuerpo de cadena sencilla.

14. Composición de materia que comprende (a) un polipéptido según la reivindicación 7 u 8 o (b) un antagonista de dicho polipéptido, seleccionado entre un anticuerpo que se une específicamente a dicho polipéptido, o una molécula de ácido nucleico antisentido, ribozima o de triple hélice que actúa contra un ácido nucleico que codifica el polipéptido según la reivindicación 7 u 8, en combinación con un portador.

15. Composición de materia que comprende un anticuerpo que se une específicamente al polipéptido según la reivindicación 7 u 8, en combinación con un portador.

16. Composición de materia según la reivindicación 14 ó 15, en la que dicho portador es un portador farmacéuticamente aceptable.

17. Composición de materia según la reivindicación 14 ó 15, que es útil para el tratamiento de una enfermedad relacionada con el sistema immune en un mamífero.

18. Composición de materia según la reivindicación 14 ó 15, que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de dicho polipéptido, antagonista o anticuerpo.

19. Artículo de fabricación, que comprende: un recipiente, una etiqueta sobre dicho recipiente; y una composición de materia que comprende (a) un polipéptido según la reivindicación 7 u 8 o (b) un antagonista de dicho polipéptido seleccionado entre un anticuerpo que se une específicamente a dicho polipéptido, o una molécula de ácido nucleico antisentido, ribozima o de triple hélice que actúa contra un ácido nucleico que codifica el polipéptido según la reivindicación 7 u 8, o (c) un anticuerpo que se une específicamente a dicho polipéptido, contenido en dicho recipiente, en el que la etiqueta sobre dicho recipiente indica que dicha composición de materia se puede utilizar para tratar una enfermedad relacionada con el sistema inmune.

20. Polipéptido según la reivindicacion 7 u 8, o un antagonista de dicho polipéptido seleccionado entre un anticuerpo que se une específicamente a dicho polipéptido, o una molécula de ácido nucleico antisentido, ribozima o de triple hélice que actúa contra un ácido nucleico que codifica el polipéptido según la reivindicación 7 u 8, para utilizar en un método de tratamiento de un trastorno relacionado con el sistema inmune en un mamífero con necesidad del mismo.

21. Anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido según la reivindicación 7 u 8, para utilizar en un método de tratamiento de un trastorno relacionado con el sistema inmune en un mamífero con necesidad del mismo.

22. Método para determinar la presencia de un polipéptido PRO9877 en una muestra sospechosa de contener dicho polipéptido, comprendiendo dicho método exponer dicha muestra a un anticuerpo anti-PRO9877 según la reivindicación 12, y determinar la unión de dicho anticuerpo a un componente de dicha muestra, en el que el polipéptido PRO9877 es tal como se define en las reivindicaciones 7 u 8.

23. Método de diagnóstico de una enfermedad relacionada con el sistema immune en un mamífero, comprendiendo dicho método detectar el nivel de expresión de un gen que codifica el polipéptido PRO9877 (a) en una muestra de análisis de células de tejido obtenidas del mamífero, y (b) en una muestra de control de células de tejido normal conocido del mismo tipo de células, en el que un nivel de expresión de dicho gen superior o inferior en la muestra de análisis en comparación con la muestra de control es indicativo de la presencia de una enfermedad relacionada con el sistema inmune en el mamífero de que se obtuvieron las células de tejido de análisis, en el que el polipéptido PRO9877 es tal como se define en las reivindicaciones 7 u 8.

24. Método de diagnóstico de una enfermedad relacionada con el sistema immune en un mamífero, comprendiendo dicho método (a) poner en contacto un anticuerpo anti-PRO9877 según la reivindicación 12 con una muestra de análisis de células de tejido obtenida de dicho mamífero y (b) detectar la formación de un complejo entre el anticuerpo y el polipéptido en la muestra de análisis, en el que la formación de dicho complejo es indicativa de la presencia de una enfermedad relacionada con el sistema inmune en el mamífero del que se obtuvieron las células de tejido de análisis, en el que el polipéptido PRO9877 es tal como se define en las reivindicaciones 7 u 8.

25. Método de identificación de un compuesto que inhibe la actividad de un polipéptido PRO9877, comprendiendo dicho método poner en contacto las células que normalmente responden a dicho polipéptido con (a) dicho polipéptido y (b) un compuesto candidato, y determinar la falta de respuesta por dicha célula a (a) , en el que el polipéptido PRO9877 es tal como se define en las reivindicaciones 7 u 8.

26. Método de identificación de un compuesto que inhibe la expresión de un gen que codifica un polipéptido PRO9877, comprendiendo dicho método poner en contacto células que expresan normalmente dicho polipéptido con un compuesto candidato y determinar la falta de expresión de dicho gen, en el que el polipéptido PRO9877 es tal como se define en las reivindicaciones 7 u 8.

27. Método según la reivindicación 26, en el que dicho compuesto candidato es un ácido nucleico antisentido.

 

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