POLIMERO.

Una composición que comprende un polímero de poliamidoamina (PAA) que comprende un resto colgante disulfuro, sulfhidrilo o sulfhidrilo activado

Polímero.

La presente invención se refiere a polímeros y, en particular, a poliamidoaminas, y a procedimientos para su fabricación. La invención se extiende al uso de dichos polímeros de poliamidoamina para formar composiciones reticuladas e hidrogeles, y al uso de dichas composiciones en diversas aplicaciones biológicas y no biológicas, tales como el suministro de biomoléculas a sitios diana y en sistemas de seguimiento de fluidos.

Las poliamidoaminas lineales (PAA) son polímeros conocidos, que están constituidos por una cadena básica que tiene grupos amido y amino terciario que se disponen regularmente a lo largo de la estructura básica. Las PAA están cargadas positivamente (es decir, son catiónicas) y son degradables en agua porque contienen enlaces amídicos hidrolizables en su cadena básica junto con funciones amínicas terciarias nucleófilas en su posición beta. Los polímeros pueden sintetizarse a partir de una amplia variedad de monoaminas primarias o bisaminas secundarias, que permite ejercer un control total sobre el espaciado y el pKa de los grupos catiónicos a lo largo de la estructura básica.

Las PAA pueden diseñarse para que tengan un intervalo de propiedades fisicoquímicas útiles, dependiendo de qué monómeros o co-monómeros específicos se elijan, y también de su posición a lo largo de la estructura básica. Las PAA han demostrado tener una toxicidad biológica relativamente baja en contraste con muchos otros polímeros catiónicos. Además, los polímeros son altamente hidrófilos y, normalmente, se degradan en medios acuosos a una velocidad que depende de su estructura. La combinación de propiedades fisicoquímicas beneficiosas y una buena biocompatibilidad hacen a las PAA una elección adecuada para su uso en diversas aplicaciones biológicas.

Los polímeros catiónicos tales como PAA tienen aplicaciones potenciales en muchas áreas debido a su carga positiva. Los polímeros cargados positivamente han encontrado uso en la unión de diversas moléculas biológicas cargadas para su purificación (por ejemplo, unión a heparina), y también en la formación de complejos de polielectrolito. El término "polielectrolito" se da para polímeros cuyas unidades de repetición llevan un grupo electrolito, que se disocia en soluciones acuosas (por ejemplo, agua), creando así polímeros cargados. Los polímeros cargados tales como poli(D-lisina) y poli(L-lisina) (PLL) se han usado como sustratos de adhesión celular durante muchos años, aunque su toxicidad les hace problemáticos para este propósito.

Las PAA se han usado también en diversas aplicaciones médicas. Por ejemplo, las PAA pueden actuar como polímeros útiles para la preparación de complejos de polielectrolito para el suministro de biomoléculas con carga útil, tales como construcciones de ADN, a un sitio diana en un paciente. Por ejemplo, in vitro, las PAA con un número diferente de combinaciones de co-monómeros han presentado una buena actividad de transfección para diversas biomoléculas con carga útil. Se sabe que hay diversas barreras físicas que hacen difícil el suministro de una biomolécula con carga útil, tal como ADN plasmídico, al núcleo de las células. Dichas barreras incluyen medios fisiológicos tales como la sangre con altos contenidos de sal y de proteínas, la captación inicial hacia la célula, evitar la degradación en la célula mediante sistemas de endosoma/liposoma, transporte a través del citoplasma al núcleo y cruzar la propia membrana nuclear. Por lo tanto, hay una necesidad de desarrollar nuevos complejos de PAA que presenten un suministro mejorado de biomoléculas con carga útil al sitio diana.

Además de las aplicaciones médicas de las PAA, tales como sistemas de suministro de ADN para su uso en pacientes, también hay considerables aplicaciones para el uso de complejos de PAA en el suministro y protección de biomoléculas con carga útil activas en el entorno. Sin embargo, en muchas aplicaciones medioambientales, donde la molécula con carga útil puede exponerse a condiciones extremas, la estabilidad del complejo PAA-biomolécula es una consideración importante y, por lo tanto, es vital que el complejo esté suficientemente estabilizado para que sea eficaz. Adicionalmente, un problema significativo con el uso de PAA en muchas aplicaciones es que los polímeros tienen una tendencia a agregarse e interaccionar con superficies cargadas, tales como suelos y minerales. Por consiguiente, para reducir la agregación y evitar la interacción de las PAA con dichas superficies cargadas, se han usado PAA estabilizadas estéricamente complejadas con una superficie PEGilada. La PEGilación en entornos altamente salinos ha demostrado aumentar la estabilización contra la agregación no deseada de los complejos de PAA.

Los complejos de PAA para su uso en dichas aplicaciones médicas y medioambientales se han desarrollado también con la incorporación de co-polímeros de bloque de polietilenglicol (PEG) para aumentar la semi-vida de los complejos que circulan en la sangre. Por lo tanto, se han desarrollado procedimientos para producir complejos estabilizados estéricamente que incorporan PAA y PEG. Sin embargo, aunque los complejos de polielectrolito que se producen por estos procedimientos son razonablemente estables en algunos entornos, padecen el problema de que carecen de estabilidad en entornos biológicos de alto contenido de sal y alta concentración de proteínas. Los complejos PAA-PEG, por lo tanto, se desestabilizan rápidamente y finalmente se disgregan, liberando de esta manera la molécula con carga útil de la biomolécula en áreas lejos del sitio diana pretendido. Por consiguiente, tienen una aplicación limitada en entornos de altas concentraciones de sal y/o proteína. Para evitar que ocurra esta disgregación, los complejos de PAA pueden estabilizarse usando reticulaciones físicas entre las cadenas de PAA próximas. Además, para entornos marinos, donde existen altas concentraciones de sal y ambientes contaminados donde están presentes altas concentraciones de diversos agentes químicos, la estabilización de los complejos de PAA por reticulación física sería también altamente deseable.

Debido a su naturaleza hidrófila, cuando están reticuladas, las PAA pueden formar hidrogeles. Los hidrogeles de PAA tienen el potencial de actuar como estructuras de soporte en aplicaciones de ingeniería tisular. Adicionalmente, los hidrogeles basados en PAA han demostrado actuar también como sustratos biodegradables y biocompatibles para técnicas de cultivo celular.

Las PAA reticuladas pueden obtenerse por diversos procedimientos. Por ejemplo, PAA que llevan enlaces vinilo que están distribuidos regularmente a lo largo de la cadena principal, obtenidas por co-polimerización con monómeros adecuados, tales como alil amina pueden emplearse para resinas reticuladas mediante post-polimerización por radicales. Otro procedimiento es emplear aminas multi-funcionales como agentes de reticulación entre cadenas de PAA próximas. Por ejemplo, los diaminoalcanos contienen cuatro hidrógenos móviles y se comportan como monómeros tetrafuncionales, lo que favorece las conexiones intercadena o las reticulaciones entre cadenas de PAA próximas.

Por lo tanto, hay una necesidad significativa para la preparación de complejos de PAA reticulados, reducibles, (es decir, reversibles), que puedan usarse en diversas aplicaciones médicas y medioambientales, por ejemplo, para suministrar moléculas con carga útil biológicas. Un número de grupos de investigación han concebido estrategias en las que los complejos de polielectrolito con polímeros catiónicos como polietilenimina (PEI) y poli-L-lisina (PLL) pueden estabilizarse por reticulación. Un procedimiento anterior usaba reticulantes de escisión para estabilizar la superficie de los complejos de polielectrolito pre-formados. Otra estrategia implica la oligomerización de plantillas en la que se usan policationes muy pequeños, que después se polimerizan y/o se reticulan en presencia de ADN. En una modificación de esta estrategia, un oligómero más grande se reticula o enlaza usando enlaces disulfuro para dar una cadena lineal de pequeños segmentos de poli-ión, que se ensamblan por separado, o con el ADN para dar un polímero de alto peso molecular, reducible. Pueden usarse uniones no reducibles, aunque menos activas en términos de actividad de transfección de ADN.

Hay varias razones para el uso de estas diversas estrategias para reticular los polielectrolitos. En general, policationes más pequeños no condensan el ADN eficazmente o de forma estable. Sin embargo, la toxicidad de los polímeros catiónicos normalmente depende del peso...

1. Una composición que comprende un polímero de poliamidoamina (PAA) que comprende un resto colgante disulfuro, sulfhidrilo o sulfhidrilo activado.

2. Una composición de acuerdo con la reivindicación 1, en la que la composición comprende un polímero de poliamidoamina (PAA) lineal que comprende un resto colgante disulfuro, sulfhidrilo o sulfhidrilo activado.

3. Una composición de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la que la composición está adaptada para formar reticulaciones entre los restos colgantes disulfuro, sulfhidrilo o sulfhidrilo activado.

4. Una composición de acuerdo con la reivindicación 3, en la que la composición reticulada es reducible, de manera que tras la reducción de la composición reticulada, las reticulaciones entre las cadenas de polímero se rompen.

5. Una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que el polímero de PAA contiene grupos repetidos X e Y representados por la fórmula general I:

(Fórmula I){-[X]-[Y]-}_n

en la que,

n es entre 5 y 500;

los grupos X, que pueden ser iguales o diferentes, son grupos que contienen amida de la fórmula

-[-L¹-CO-NR¹-L₂-NR₂-CO-L³-]-

en la que

L¹ y L³ representan, independientemente, grupos etileno opcionalmente sustituidos;

L² representa una cadena de alquileno opcionalmente sustituida, y

R¹ y R² representan, independientemente, hidrógeno o un grupo alquilo opcionalmente sustituido;

y los grupos Y, que pueden ser iguales o diferentes, representan grupos derivados de amina de la fórmula:

-[-NR³-]- hskip0.3cm o hskip0.3cm -[NR⁴-L⁴-NR⁵-] -

en la que

R³, R⁴ y R⁵ representan grupos alquilo opcionalmente sustituidos, y

L⁴ representa un grupo alquileno opcionalmente sustituido;

o R⁴, R⁵ y L⁴, junto con los átomos de nitrógeno a los que están unidos, forman un anillo opcionalmente sustituido,

con la condición de que al menos alguno de R³, R⁴ y R⁵ contenga grupos disulfuro, sulfhidrilo o sulfhidrilo activado.

6. Una composición de acuerdo con la reivindicación 5, en la que R¹ y R² son hidrógeno.

7. Una composición de acuerdo con la reivindicación 5, en la que R¹ y/o R² representa un grupo alquilo opcionalmente sustituido que contiene una cadena C₁-C₂₀.

8. Una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en la que R³, R⁴ y R⁵ representan grupos alquilo opcionalmente sustituidos que contienen una cadena C₁-C₂₀.

9. Una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 8, en la que L² y L⁴ representan cadenas de alquileno opcionalmente sustituido que contienen 1-10 átomos de carbono.

10. Una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 9, en la que cualquiera de L¹, L², L³ y L⁴ están sustituidos, seleccionándose los sustituyentes entre alquilo, alcoxi, acilo, acilamino, carboxi, ciano, halo, hidroxi, nitro, trifluorometilo y amino.

11. Una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 10, en la que al menos alguno de R³, R⁴ y R⁵ están sustituidos con grupos seleccionados entre sulfhidrilo, sulfhidrilo activado y -S-S-R⁶, en la que R⁶ representa alquilo opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados entre alquilo, alcoxi, acilo, acilamino, carboxi, ciano, halo, hidroxi, nitro, trifluorometilo y amino.

12. Una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 11, en la que en la Fórmula I, n es entre 20 y 100.

13. Una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 12, en la que el peso molecular del polímero de PAA está entre 1500 Da y 120.000 Da.

14. Un procedimiento para preparar un polímero de poliamidoamina (PAA) que comprende un resto colgante disulfuro, sulfhidrilo, o sulfhidrilo activado, comprendiendo el procedimiento hacer reaccionar un compuesto de bisacriloílo con una amina primaria y/o una di-amina secundaria, una o ambas de las cuales contiene un grupo disulfuro.

15. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 14, en el que el compuesto de bisacriloílo usado el procedimiento tiene la fórmula II:

(Fórmula II)-CH₂=CH-CO-NR¹-L²-NR²-CO-CH=CH₂

en la que R¹, R², y L² son como se han definido respecto a la Fórmula I.

16. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 15, en el que R¹ y R² son hidrógeno.

17. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 15 o la reivindicación 16, en el que L² es un grupo CH₂.

18. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 14 a 17, en el que el compuesto de bisacriloílo es bisacrilamida de metileno (MBA).

19. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 14 a 18, en el que cuando se usa una amina primaria que contiene un disulfuro, la amina primaria que contiene un grupo disulfuro tiene la fórmula III:

(Fórmula III)NH₂-R³

en la que R³ es como se ha definido en la Fórmula I.

20. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 19, en el que R³ representa un grupo alquilo sustituido con -S-S-R⁶, en la que R⁶ es como en la reivindicación 11.

21. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 14 a 20, en el que la amina primaria que contiene un grupo de disulfuro es cistamina, que puede estar no protegida.

22. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 14 a 20, en el que la amina primaria es cistamina, uno de cuyos grupos amina lleva un grupo protector.

23. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de la reivindicaciones 14 a 22, en el que cuando se usa una di-amina secundaria que contiene un disulfuro, la di-amina secundaria tiene la Fórmula IV:

(Fórmula IV)H-NR⁴-L⁴-NR⁵-H

en la que R⁴, R⁵ y L⁴ son como se han definido respecto a la Fórmula I.

24. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 23, en el que R⁴ o R⁵ representan un grupo alquilo sustituido con -S-S-R⁶, en la que R⁶ y es como se ha definido en la reivindicación 11.

25. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 14 a 24, en el que el procedimiento implica el uso de moléculas de amina que no contienen ningún grupo disulfuro.

26. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 14 a 25, en el que la di-amina secundaria tiene la Fórmula V:

(Fórmula V)CH₃-NH-CH₂-CH₂-NH-CH₃

27. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 14 a 26, en el que la di-amina secundaria es dimetiletilendiamina (DMEDA), como se muestra en los Esquemas 1 y 4, o 2-metil-piperazina, como se muestra en los Esquemas 2 y 3.

28. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 14 a 27, comprendiendo el procedimiento hacer reaccionar un compuesto de bisacriloílo de Fórmula II, con una amina primaria que contiene un grupo de disulfuro de Fórmula III, con una di-amina secundaria de Fórmula V.

29. Un hidrogel que comprende una pluralidad de cadenas de polímero de poliamidoamina (PAA) que están reticuladas mediante grupos de unión que contienen enlaces disulfuro reducibles.

30. Un hidrogel de acuerdo con la reivindicación 29 que comprende la composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 o que se prepara usando el procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 14 a 28.

31. Un hidrogel de acuerdo con cualquiera de la reivindicación 29 o la reivindicación 30, en el que el hidrogel reticulado es reducible, en el que las reticulaciones entre las cadenas de polímero de PAA se rompen cuando se reduce el hidrogel.

32. Un hidrogel de acuerdo con la reivindicación 31, en el que el hidrogel de PAA reticulado es reducible después de entrar en contacto con un agente reductor, por ejemplo, ditiotreitol (DTT), metabisulfito sódico o glutatión.

33. Un procedimiento para preparar un hidrogel que comprende una pluralidad de cadenas de polímero de poliamidoamina (PAA) que están reticuladas mediante grupos de unión que contienen enlaces disulfuro reducibles, comprendiendo el procedimiento: (i) hacer reaccionar un compuesto de bisacriloílo con una amina primaria y/o una di-amina secundaria, una o ambas de las cuales contiene un grupo disulfuro, para formar cadenas de polímero de PAA y (ii) permitir que se formen enlaces disulfuro reducibles entre las cadenas de polímero de PAA.

34. Una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o un hidrogel de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32, comprendiendo la composición o hidrogel un co-polímero de poliamidoamina (PAA) que comprende un resto colgante disulfuro, sulfhidrilo, o sulfhidrilo activado y PEG.

35. Un procedimiento para preparar una composición que comprende un co-polímero de polietilenglicol (PEG) y poliamidoamina (PAA), que comprende un resto colgante disulfuro, sulfhidrilo, o sulfhidrilo activado, que puede estar reticulado o no, comprendiendo el procedimiento poner en contacto monómeros de poliamidoamina (PAA) que comprenden un resto colgante disulfuro, sulfhidrilo o sulfhidrilo activado con PEG terminado en amina; y permitir que se forme el co-polímero correspondiente.

36. Una composición de suministro para suministrar una molécula con carga útil, comprendiendo la composición de suministro una molécula con carga útil combinada con la composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o un hidrogel de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32.

37. Un procedimiento para preparar la composición de suministro de acuerdo con la reivindicación 36, comprendiendo el procedimiento poner en contacto una molécula con carga útil con la composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o un hidrogel de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32 y exponer la mezcla a condiciones tales que la molécula con carga útil se combina con la composición o hidrogel, formando de esta manera una composición de suministro con carga útil de acuerdo con la reivindicación 36.

38. Una partícula de soporte adaptada durante su uso para llevar una molécula con carga útil a un sitio diana, comprendiendo la partícula de soporte la composición de acuerdo con la reivindicación 36, en la que la molécula con carga útil es capaz de ser activa cuando la partícula es al menos adyacente al sitio diana.

39. Una partícula de soporte de acuerdo con la reivindicación 38, en la que la molécula con carga útil comprende un compuesto o biomolécula biológicamente activo.

40. Una partícula de soporte de acuerdo con la reivindicación 38 o la reivindicación 39, en la que la molécula con carga útil comprende una célula entera, parte de una célula, un virus, fago, un microorganismo, un orgánulo, una partícula de virus, etc., un aminoácido, péptido, proteína, enzima, anticuerpo o un polisacárido.

41. Una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 40, en la que la molécula con carga útil comprende un ácido nucleico o un derivado del mismo.

42. Una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 41, en la que la molécula con carga útil comprende ADN o ADNc o ARN (por ejemplo, ARNm, ARNsi o ARNt).

43. Una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 42, en la que la partícula de soporte está en un intervalo de tamaño de 10 nm a 500 nm.

44. Una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 43, en la que la partícula de soporte comprende poliamidoamina (PAA) PEGilada y no PEGilada.

45. Una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 44, en la que la composición basada en PAA comprende un co-polímero de PEG-PAA-PEG o PEG-PAA, y un homopolímero de PAA, conteniendo ambos grupos sulfhidrilo colgantes.

46. Una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 45, en la que la proporción de PEG:PAA total es entre 1:4 y 1:17, preferentemente entre las proporciones de 1:9 a 1:12.

47. Una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 46, en la que la proporción de PAA:ácido nucleico (AN) es entre 0,5:1 y 2,0:1, preferentemente entre 1:1 y 1,5:1.

48. Una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 47, en la que el número de restos colgantes disulfuro, sulfhidrilo o sulfhidrilo activado del componente PEG-PAA es como mínimo seis, preferentemente ocho, y en la que la cantidad de restos colgantes disulfuro, sulfhidrilo o sulfhidrilo activado en el componente PAA es entre 0,5 y 2 veces la del componente PEG-PAA, preferentemente entre 1 y 1,5 veces la del componente PEG-PAA.

49. Una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 48, preparándose la partícula de soporte haciendo reaccionar PAA PEGilada con PAA no PEGilada, seguido de contacto de la composición resultante con ácido nucleico.

50. Un sistema de seguimiento de fluido para seguir el flujo de fluido, comprendiendo el sistema una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 49, y un medio de detección para detectar la molécula con carga útil.

51. Un procedimiento de seguimiento de fluido, comprendiendo el procedimiento las etapas de:

(i) aplicar una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 49 que comprende una molécula con carga útil detectable a un fluido, en una primera localización; y

(ii) detectar la molécula con carga útil en una segunda localización del fluido.

52. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 51, comprendiendo el procedimiento una etapa de aislar la partícula del fluido en la segunda localización antes de la detección de la molécula con carga útil con el medio de detección.

53. Un procedimiento de acuerdo con cualquiera de la reivindicación 51 o la reivindicación 52, en el que el procedimiento comprende una etapa de aislar la molécula con carga útil de la partícula de soporte antes de la detección.

54. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 53, en el que la etapa de aislamiento comprende reducir la partícula de soporte para liberar la molécula con carga útil antes de la detección.

55. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 54, en el que la molécula con carga útil comprende ácido nucleico, tal como ADN, que puede detectarse usando un medio de detección adecuado, por ejemplo, PCR.

56. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 55, en el que la molécula con carga útil comprende un oligonucleótido monocatenario.

57. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 a 56, en el que la molécula con carga útil comprende un compuesto de soporte, que puede ser ADN de soporte.

58. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 57, en el que el ADN de soporte se degrada para dar una preparación principalmente de moléculas de ADN monocatenario de secuencia mixta con aproximadamente el mismo tamaño que el ácido nucleico de detección.

59. Una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 o de las reivindicaciones 34 ó 36, o un hidrogel de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32, o una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 49, para su uso como un medicamento.

60. Una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o de las reivindicaciones 34 ó 36, o un hidrogel de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32, o una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 49, para su uso en el tratamiento de una afección médica caracterizada por pérdida o lesión tisular.

61. Una composición de acuerdo con la reivindicación 60, en la que la afección caracterizada por pérdida o lesión tisular incluye el tratamiento de heridas y daños relacionados, trastornos degenerativos tisulares y pérdida de la función tisular.

62. Una composición de acuerdo con la reivindicación 61, en la que los trastornos degenerativos tisulares que pueden tratarse incluyen trastornos neurodegenerativos del disco intervertebral, degeneración de cartílago o hueso tal como osteoartritis, osteoporosis, trastornos degenerativos del hígado, trastornos degenerativos del riñón, atrofia muscular, lesión o pérdida de nervios.

63. Uso de una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o de las reivindicaciones 34 ó 36, o un hidrogel de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32, o una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 49 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección médica caracterizada por pérdida o lesión tisular.

64. Un medio de soporte celular que comprende la composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o de las reivindicaciones 34 ó 36, o un hidrogel de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32, y al menos una célula.

65. Un procedimiento para preparar un medio de soporte celular de acuerdo con la reivindicación 63, comprendiendo el procedimiento las etapas de:

(i) poner en contacto la composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o de las reivindicaciones 34 ó 36, o un hidrogel de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32 con al menos una célula; y

(ii) exponer el hidrogel o composición a condiciones tales que la al menos una célula esté soportada sobre el mismo o en su interior, formando de esta manera un medio de soporte celular.

66. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o de las reivindicaciones 34 ó 36, o un hidrogel de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32, o una partícula de soporte de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 a 49; y un excipiente farmacéuticamente aceptable.