Péptido que puede unirse a la molécula MHC de clase I y II sin procesamiento adicional y que se selecciona de entre los péptidos siguientes de la proteína básica de la mielina péptidos siguientes:

YKSAHKGFKGVDAQG (134-148), KSAHKGFKGVDAQGT (135-149), SAHKGFKGVDAQGTL (136-150), AHKGFKGVDAQGTLS (137-151), HKGFKGVDAQGTLSK (138-152), GFKGVDAQGTLSKIF (140-154)

La presente invención se refiere a péptidos de la proteína básica de la mielina. En particular, la presente invención se refiere a péptidos que comprenden una parte de la región 131 a 158 de la proteína básica de la mielina y su utilización en el tratamiento y/o la prevención de una enfermedad.

ANTECEDENTES

En la respuesta inmune adaptativa, los linfocitos T pueden reconocer los epítopos internos de los antígenos de proteína. Las células presentadoras de antígenos (APC) adquieren antígenos de proteína y los degradan en pequeños fragmentos peptídicos. Un péptido se puede unir a una de las moléculas de los principales complejos de histocompatibilidad (MHC) de clase I o II dentro de las células y ser transportado a la superficie de la célula. Cuando se presenta en la superficie de la célula junto con la molécula MHC, el péptido puede ser reconocido por una célula T (mediante el receptor de la célula T (TCR)), en cuyo caso el péptido es un epítopo de célula T.

Los epítopos de célula T tienen una función central en la respuesta inmune adaptativa a todo antígeno, ya no sea propio o foráneo. La función central que tienen los epítopos de célula T en las enfermedades hipersensibilidad (que comprende las alergias, las enfermedades autoinmunes y el rechazo de los trasplantes) se ha demostrado mediante la utilización de modelos experimentales. Es posible inducir enfermedades inflamatorias o alérgicas mediante la inyección de péptidos sintéticos (basados en la estructura de los epítopos de célula T) en combinación con un adyuvante.

Por el contrario, se ha demostrado que es posible inducir tolerancia inmunológica hacia epítopos de péptido particulares mediante la administración de los epítopos de péptido en forma soluble. Se ha demostrado que la administración de antígenos peptídicos solubles es un medio efectivo para inhibir la enfermedad en la encefalomielitis autoinmune experimental (EAE-un modelo de la esclerosis múltiple (EM)) (Metzler y Wraith, Int. Immunol. 5:1159-1165 (1993); Liu y Wraith, Int. Immunol. 7:1255-1263 (1995); Anderton y Wraith, Eur. J. Immunol., 28:1251-1261 (1998)), y en modelos experimentales de artritis, diabetes y uveoretinitis (revisado en Anderton y Wraith (1998) anterior). También se ha demostrado esto como una forma de tratamiento de una enfermedad en curso en EAE

(Anderton y Wraith (1998) anterior).

La utilización de péptidos tolerogénicos en el tratamiento o prevención de una enfermedad ha atraído una atención considerable. Una razón para ello es que se ha demostrado que ciertos epítopos tolerogénicos pueden regular negativamente la respuestas de las células T a diferentes antígenos en el mismo tejido. Este fenómeno, conocido como “supresión vecinal” significa que debe ser posible inducir tolerancia a más de un epítopo (preferentemente todos los epítopos) en un antígeno determinado, y a más de un antígeno de una enfermedad determinada, utilizando un péptido tolerogénico en particular (Anderton y Wraith (1998) anterior). Esto obviaría la necesidad de identificar todos los antígenos patógenos en una enfermedad en particular.

Los pépdidos también son una opción favorable para la terapia por su coste relativamente bajo y el hecho de que los análogos peptídicos se pueden producir con propiedades inmunológicas modificadas. En consecuencia los péptidos se pueden modificar con el fin de alterar sus interacciones con MHC o TCR.

Un posible problema con esta estrategia es que se ha demostrado que no todos los péptidos que actúan como epítopos de célula T son capaces de inducir tolerancia. El péptido 89 a 101 de la proteína básica de mielina (MBP) es un antígeno inmunodominante después de la inmunización y también es un inmunógeno muy efectivo tanto en términos de cebar la reactividad de las células T como en la inducción EAE. Sin embargo, este péptido ha demostrado no ser efectivo en inducir tolerancia cuando se administra en disolución (Anderton y Wraith (1998) anterior).

Se han propuesto múltiples explicaciones para la jerarquía observada en la capacidad de los epítopos de célula T para inducir tolerancia (revisado en Anderton y Wraith (1998) anterior). En particular, se ha propuesto que existe una correlación entre la afinidad del péptido hacia la MHC y la tolerogenicidad (Liu y Wraith (1995) anterior), pero esto no coincide con algunas de las observaciones. Por ejemplo, MBP [89 a 101], que no es tolerogénico, se une a I-As con una afinidad relativamente elevada. Por consiguiente, no es obvio predecir que péptidos inducirán tolerancia.

En el contexto de la presente invención se ha demostrado que si un epítopo de péptido es del tamaño adecuado para ser presentado por APC inmaduro sin procesamiento del antígeno, puede inducir tolerancia inmunológica (solicitud de patente internacional número PCT/GB01/03702). La observación de que algunos péptidos de célula T son tolerogénicos y otros son incapaces de inducir tolerancia puede, por consiguiente, ser explicada por el hecho de que algunos epítopos necesitan procesamiento adicional antes de ser capaces de ser presentados por una molécula MHC. Estos epítopos que necesitan procesamiento adicional no inducen tolerancia cuando se administran en forma soluble, a pesar de su capacidad para inducir enfermedad cuando se inyectan en combinación con un adyuvante.

Los epítopos que no requieren procesamiento adicional son capaces de inducir tolerancia y se han denominado “apítopos” (epíTOPOS Independientes del Procesamiento de Antígenos) en el contexto de la presente invención.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

Se ha examinado la región 131 a 158 de MBP y descubrieron un número de péptidos que pueden ser presentados a las células T por células presentadoras de antígenos fijadas.

Estos péptidos se definen como apítopos, debido a que pueden ser capaces de unirse a la clase I y II de MHC sin procesamiento adicional.

Se han identificado asimismo dos epítopos mínimos en la región 131 a 158 de la proteína básica de la mielina que son reconocidos por clones particulares de células T. El péptido puede comprender uno o ambos de estos epítopos que son MBP 142 a 152 y 140 a 148.

En un primer aspecto, la presente invención proporciona un péptido capaz de unirse a una molécula MHC clase I o II sin procesamiento adicional y que se selecciona de entre los siguientes péptidos básicos de mielina:

YKSAHKGFKGVDAQG (134-148), KSAHKGFKGVDAQGT (135-149), SAHKGFKGVDAQGTL (136-150), AHKGFKGVDAQGTLS (137-151), HKGFKGVDAQGTLSK (138-152), GFKGVDAQGTLSKIF (140-154).

En un segundo aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende uno o más péptidos según el primer aspecto de la invención.

La presente invención proporciona también la utilización de un péptido según el primer aspecto de la presente invención para la producción de un medicamento de utilización en el tratamiento y/o la prevención de la esclerosis múltiple.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS

La figura 1 muestra la respuesta del clon EM60:D2 de células T a la presentación por APC de péptidos MBP anidados en la región 131 a 158.

La figura 2 muestra la respuesta del clon N5 de células T a la presentación por APC del péptido 140 a 154 de MBP.

La figura 3 muestra la respuesta del clon N5 de células T a la presentación por APC de péptidos anidados en la región 136 a 157 de MBP.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

En un primer aspecto, la presente invención se refiere a un péptido.

Péptidos

El término “péptido” en sentido normal se refiere a una serie de residuos, típicamente L-aminoácidos, conectados uno al otro típicamente mediante enlaces peptídicos entre los grupos α-amino y carboxílicos de aminoácidos adyacentes. El término comprende péptidos modificados y análogos sintéticos de péptidos.

Un péptido de la presente invención puede ser de una longitud cualquiera que sea capaz de unirse a una molécula MHC de clase I o II sin procesamiento adicional.

Los péptidos que se unen a las moléculas MHC de clase I son típicamente de una longitud comprendida entre 7 y 13 aminoácidos, más frecuentemente de entre 8 y 10 aminoácidos. La unión de los péptidos se estabiliza en sus dos extremos mediante contactos entre átomos de la cadena principal del péptido...

Reivindicaciones

1. Péptido que puede unirse a la molécula MHC de clase I y II sin procesamiento adicional y que se selecciona de entre los péptidos siguientes de la proteína básica de la mielina péptidos siguientes:

YKSAHKGFKGVDAQG (134-148), KSAHKGFKGVDAQGT (135-149), SAHKGFKGVDAQGTL (136-150), AHKGFKGVDAQGTLS (137-151), HKGFKGVDAQGTLSK (138-152), GFKGVDAQGTLSKIF (140-154).

2. Péptido según la reivindicación 1, que es el péptido GFKGVDAQGTLSKIF (140 a 154) de la proteína básica de la mielina.

3. Composición farmacéutica que comprende uno o más de los péptidos según la reivindicación 1 ó 2.

4. Composición farmacéutica según la reivindicación 3, que comprende entre 1 y 15 péptidos tolerogénicos de la proteína básica de la mielina.

5. Composición farmacéutica según la reivindicación 3 ó 4, en forma de un kit, en la que alguno o cada uno de los péptidos se proporcionan por separado para la administración por separado, simultánea o secuencial.

6. Péptido según la reivindicación 1 ó 2 para la administración intranasal.

7. Utilización de un péptido según la reivindicación 1 ó 2 en la preparación de un medicamento destinado a la utilización en la prevención y/o el tratamiento de la esclerosis múltiple.