PÉPTIDOS Y DERIVADOS PEPTÍDICOS ASÍ COMO COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS QUE CONTIENEN LOS MISMOS.

Péptidos y derivados peptídicos así como composiciones farmacéuticas que contienen los mismos La presente invención se refiere a péptidos y derivados peptídicos, a la producción de los mismos así como a su uso para preparar un fármaco terapéutica y/o preventivamente activo y a un fármaco farmacéutico de este tipo. El documento EP 1586586 describe el uso de péptidos de la secuencia de la fibrina que poseen efectos antiinflamatorios. Dicho efecto puede basarse en el hecho de que la fibrina y fragmentos de fibrina generados durante la descomposición de la misma se unen a células endoteliales mediante su extremo neo-N-terminal de la cadena Bbeta y a células del torrente sanguíneo mediante la secuencia de la cadena Aalfa, conduciendo de ese modo a la adhesión y transmigración de estas células al tejido. La pareja de unión de la fibrina y fragmentos de fibrina a las células endoteliales es la proteína cadherina endotelial vascular (VE), que se expresa exclusivamente en la unión adherente entre células endoteliales vecinas. Los péptidos según la invención bloquean esta interacción y de ese modo contrarrestan la transmigración de células sanguíneas. Sin embargo, la defensa natural frente a infecciones por los leucocitos en la sangre no se ve afectada de manera adversa. Por tanto, la composición de los mismos, tales como granulocitos, linfocitos y monocitos, no se ve afectada de modo que se mantiene el proceso de defensa natural. El fibrinógeno se produce en el hígado y, en esta forma, es biológicamente inactivo y normalmente se proporciona en la sangre a concentraciones de aproximadamente 3 g/l. La escisión proteolítica de la proenzima protrombina da como resultado la formación de trombina, que separa por escisión los fibrinopéptidos A y B del fibrinógeno. De esta forma, el fibrinógeno se transforma en su forma biológicamente activa. Se generan fibrina y productos de escisión de fibrina. La trombina se forma siempre que se activa la coagulación sanguínea, es decir, con daño al tejido, ya sea de génesis inflamatoria, traumática o degenerativa. La formación de fibrina tal como se media por la trombina es básicamente un proceso protector dirigido a sellar rápidamente cualquier defecto provocado en el sistema vascular. Sin embargo, la formación de fibrina es también un proceso patogénico. La aparición de un trombo de fibrina como causa desencadenante de un infarto de miocardio es uno de los problemas más destacados en medicina humana. El papel que desempeña la fibrina durante la extravasación de células inflamatorias del torrente sanguíneo al tejido, que, por un lado, es un proceso deseado para la defensa frente a microorganismos patógenos o células tumorales en el tejido pero que, por otro lado, es un proceso que, por sí mismo, induce o prolonga el daño producido en el tejido, no se ha examinado hasta la fecha en absoluto o no en un grado suficiente. La fibrina se une a células endoteliales mediante su extremo neo-N-terminal de Bbeta por medio de la secuencia a Bbeta y a células del torrente sanguíneo por medio de la secuencia Aalfa, conduciendo de ese modo a la adhesión y transmigración de células al tejido. Mediante el mecanismo descrito anteriormente, los péptidos o proteínas según la invención pueden impedir la adhesión de células del torrente sanguíneo a células endoteliales de la pared vascular y/o su transmigración posterior de la sangre al tejido. El documento WO9216221 describe polipéptidos que se unen covalentemente a polímeros de cadena larga, como por ejemplo metoxi-polietilenglicol (PEG). La unión de polipéptidos a tales polímeros da como resultado frecuentemente una prolongación de la semivida biológica de estos polipéptidos y retrasa su excreción renal. Puede encontrarse un resumen de estas propiedades en Davis et al., Polymeric Materials Pharmaceuticals for Biomedical Use, págs. 441-451 (1980). La adición de grupos PEG ejerce este efecto de un modo proporcional al peso molecular del péptido PEGilado, ya que, hasta un cierto tamaño de la molécula, la tasa de filtración glomerular es inversamente proporcional al peso molecular. El documento WO2004/101600 describe también nuevos compuestos modificados con poli(etilenglicol) y su uso, en particular con énfasis en péptidos modificados que activan el receptor de eritropoyetina. Ejemplos adicionales para la modificación covalente de péptidos y proteínas con residuos de PEG son interleucinas (Knauf et al., J. Biol Chem. 1988, 263, 15064; Tsutumi et al., J. Controlled Release 1995, 33, 447), interferones (Kita et al., Drug Delivery Res. 1990, 6 157), catalasa (Abuchowski et al., J. Biol. Chem. 1997, 252, 3582). Puede encontrarse una revisión de la técnica anterior en Reddy, Ann. of Pharmacotherapy, 2000, 34, 915. Una semivida biológica prolongada es ventajosa para diversos usos terapéuticos de péptidos. Esto es en particular cierto en casos de enfermedades crónicas en las que está indicada la administración del agente activo a lo largo de un periodo de tiempo prolongado. Con tales indicaciones, esto puede mejorar el cumplimiento del paciente, ya que la aplicación del agente activo una vez al día por ejemplo se aceptará más fácilmente que una infusión continua. Además de aumentar la masa molecular mediante modificación covalente, puede obtenerse una prolongación de la persistencia de los polipéptidos modificándolos de tal manera que se impida su degradación por enzimas proteolíticas (por ejemplo, exo o endoproteasas o peptidasas). 2   Usando diversos ejemplos, se ha mostrado que es necesario adaptar la modificación apropiada para cada péptido de modo que se impida una influencia significativa sobre el efecto farmacodinámico en comparación con el péptido no modificado. En este contexto, puede hacerse referencia a lo siguiente: calcitonina (Lee et al. Pharm. Res. 1999, 16, 813), hormona liberadora de hormona de crecimiento (Esposito et al., Advanced Drug Delivery Reviews, 2003, 55, 1279), péptido 1 similar al glucagón (Lee et al., Bioconjugate Res. 2005, 16, 377), así como el antagonista del receptor de hormona de crecimiento Pegvisomant (Ross et al., J. Clin. Endocrin. Metab. 2001, 86, 1716). Las revisiones de Caliceti y Veronese (Adv. Drug Deliv. Rev. 2003, 55 1261) y de Harris y Chess (Nature Rev. Drug Discovery 2003, 2, 214) comentan que en el caso de diseñar conjugados de péptido o proteína-PEG, es necesario tener en cuenta la estructura de la sustancia original, el peso molecular del péptido y el polímero, el número de cadenas de polímero conjugadas así como la química del ligador, de modo que se obtenga un conjugado de péptido-PEG eficaz. Sorprendentemente, se ha encontrado que péptidos derivados de la cadena del fragmento de fibrina Bbeta(15-42), en el que uno o varios aminoácidos de la secuencia de fibrina natural se han sustituido por otros aminoácidos, así como derivados modificados en el extremo C-terminal de la secuencia peptídica, tienen también fuertes efectos antiinflamatorios. Lo mismo se aplica a péptidos y derivados peptídicos cuya modificación impide su destrucción por proteasas o peptidasas, así como a conjugados de péptido-PEG derivados de la secuencia básica del fragmento de fibrina Bbeta(15-42). Por tanto, la invención se refiere a péptidos modificados que se derivan de la cadena del fragmento de fibrina Bbeta(15-42) y en los que uno o varios de los aminoácidos de la secuencia se han sustituido por peptidomiméticos o aminoácidos codificados genéticamente o no codificados genéticamente. Pueden existir como péptidos libres o como derivado C-terminal y/o estar unidos a un polímero de polietilenglicol (PEG), y tienen efectos antiinflamatorios y/o de estabilización del endotelio. Por ejemplo, los ésteres o las amidas pueden tenerse en cuenta como derivados C-terminales. La invención se refiere a péptidos y derivados peptídicos de la siguiente fórmula general II, H2N-GHRPLDKKREEAPSLRPAPPPISGGGYR-X17 (II), en la que X17 indica NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y siendo hidrógeno o alquilo (C1-C10), o un residuo C(NR2R3)-(S-succinimido)-(PEG5-40K), estando unido el residuo de succinimida mediante el átomo de C 3 al átomo de azufre del residuo de cisteína, así como a las sales fisiológicamente aceptables de los mismos. Una materia lo más altamente preferida de la invención son derivados peptídicos de fórmula (III), H2N-GHRPLDKKREEAPSLRPAPPPIS-X19-X20-X21-YR-X17 (III) en la que dos de los residuos X19, X20 y X21 son cada uno un residuo de glicina y el restante es un residuo C-(Ssuccinimido)-(PEG5-40K), estando unido el residuo de succinimido al átomo de azufre del residuo de cisteína mediante el átomo de C 3, y en la que X17 indica NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y siendo hidrógeno o alquilo (C1-C10), así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos.... [Seguir leyendo]

H2N-GHRPLDKKREEAPSLRPAPPPISGGGYR-X17 (II), X17 indica NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y siendo hidrógeno o alquilo (C1-C10), o un residuo C(NR2R3)- (S-succinimido)-(PEG5-40K), estando unido el residuo de succinimida al átomo de azufre del residuo de cisteína mediante el átomo de C 3, así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos. 2. Péptido o péptido de fórmula (II) en la que: H2N-GHRPLDKKREEAPSLRPAPPPISGGGYR-X17 (II), X17 indica NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y siendo hidrógeno, o sales fisiológicamente aceptables del mismo. 3. Péptido o derivado peptídico de fórmula (II) en la que: H2N-GHRPLDKKREEAPSLRPAPPPISGGGYR-X17 (II), X17 indica un residuo C(NR2R3)-(S-succinimido)-(PEG5-40K), estando unido el residuo de succinimida al átomo de azufre del residuo de cisteína mediante el átomo de C 3 y siendo R2 y R3 idénticos y siendo hidrógeno, o sales fisiológicamente aceptables del mismo. 4. Derivados peptídicos de fórmula (III) H2N-GHRPLDKKREEAPSLRPAPPPIS-X19-X20-X21-YR-X17 (III), en la que dos de los residuos X19, X20 y X21 son cada uno un residuo de glicina y el restante es un residuo C-(Ssuccinimido)-(PEG5-40K), estando unido el residuo de succinimido al átomo de azufre del residuo de cisteína mediante el átomo de C 3, y en la que X17 indica NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y siendo hidrógeno o alquilo (C1-C10), así como las sales fisiológicamente aceptables de los mismos. 5. Derivado peptídico de fórmula (III) H2N-GHRPLDKKREEAPSLRPAPPPIS-X19-X20-X21-YR-X17 (III), en la que dos de los residuos X19, X20 y X21 son cada uno un residuo de glicina y el restante es un residuo K-(PEG5- 40K), estando unido el residuo de PEG mediante el átomo de nitrógeno en la cadena lateral del residuo de lisina, y en la que X17 indica NR2R3, siendo R2 y R3 idénticos o diferentes y siendo hidrógeno o alquilo (C1-C10), así como las sales fisiológicamente aceptables del mismo. 6. Composición farmacéutica de fármaco, que contiene un péptido o derivado peptídico según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5. 18