MONITORIZACION DE LA HIBRIDACION DURANTE LA PCR.

Método de monitorización a tiempo real de la amplificación de una secuencia de ácidos nucleicos diana en una muestra biológica

, comprendiendo dicho método las etapas de: la amplificación de la secuencia objetivo por la reacción en cadena de la polimerasa en presencia de una cantidad de SYBR™ Green I, comprendiendo dicha reacción en cadena de la polimerasa las etapas de adición a la muestra biológica de SYBR™ Green I, una polimerasa termoestable y cebadores para la secuencia de ácidos nucleicos diana para crear una mezcla de amplificación y el ciclado térmico de la mezcla de amplificación entre, como mínimo, una temperatura de desnaturalización y una temperatura de elongación durante un conjunto de ciclos de amplificación; y la iluminación de la mezcla con una luz a una longitud de onda absorbida por el SYBR™ Green I en, como mínimo, una parte del conjunto de ciclos de amplificación, y la detección de una emisión fluorescente del SYBR™ Green I tras la iluminación de la muestra, estando relacionada dicha emisión fluorescente con la cantidad de ácido nucleico diana amplificado en la muestra, o bien, la iluminación de la muestra con una luz a una longitud de onda absorbida por el SYBR™ Green I posterior a, como mínimo, una parte del conjunto de ciclos de amplificación, y la monitorización de la emisión fluorescente del SYBR™ Green I en la muestra en función de la temperatura de la muestra para generar una curva de fusión para la secuencia diana amplificada.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: UNIVERSITY OF UTAH RESEARCH FOUNDATION.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 210 PARK BUILDING,SALT LAKE CITY, UTAH 84112.

Inventor/es: WITTWER, CARL, T., RASMUSSEN, RANDY P., RIRIE, KIRK M..

Fecha de Publicación: .

Fecha Concesión Europea: 11 de Mayo de 2005.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION G — FISICA > METROLOGIA; ENSAYOS > INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION... > Investigación o análisis de materiales por métodos... > G01N33/58 (en los que intervienen sustancias marcadas (G01N 33/53 tiene prioridad))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS... > Procesos de medida, investigación o análisis en... > C12Q1/68 (en los que intervienen ácidos nucleicos)
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