Microorganismo para la desintoxicación de fumonisinas así como utilización del mismo, procedimiento para la desintoxicación de fumonisinas y aditivo para piensos que contiene el microorganismo.

Microorganismo para la desintoxicación de fumonisinas y de derivados de fumonisinas,

empleándose unas bacterias o levaduras desintoxicadoras, que se escogen entre las cepas DSM 16254 y DSM 16257, asignables al taxón de las Sphingomonadaceae, la cepa DSM 16255, asignable al taxón de las Rhizobiales, la cepa DSM 16256, asignable al taxón de las Microbacteriaceae, la cepa DSM 16253, asignable al taxón de las Rhizobiaceae, la cepa DSM 16252, asignable al taxón de las Alcaligenaceae y Pichia sp. DSM 16562, las cuales transforman a las fumonisinas enzimáticamente, en una reacción de múltiples etapas, en unos metabolitos desaminados.

Microorganismo para la desintoxicación de fumonisinas así como utilización del mismo, procedimiento para la desintoxicación de fumonisinas y aditivo para piensos que contiene el microorganismo El presente invento se refiere a un microorganismo para la desintoxicación de fumonisinas y de derivados de fumonisinas así como a la utilización de bacterias o levaduras, a solas o en combinaciones de dos o más cepas, para la desintoxicación de fumonisinas y de derivados de fumonisinas en alimentos y/o piensos, a un procedimiento para la desintoxicación de fumonisinas y de derivados de fumonisinas mediando utilización de un microorganismo así como a un aditivo para piensos para la desactivación de micotoxinas, en particular de fumonisinas y de derivados de fumonisinas.

Las micotoxinas, que abarcan un gran número de las más diferentes toxinas, constituyen un problema creciente en la moderna industria de los alimentos y piensos, puesto que un gran número de plantas, que son elaboradas posteriormente para formar alimentos o respectivamente para formar piensos, o que respectivamente son alimentadas como piensos directamente a animales, están infestadas con las más diferentes toxinas en las más diferentes concentraciones, de tal manera que, junto al hecho de que se tiene que detectar la respectiva toxina, se tiene que aprovechar o respectivamente encontrar un procedimiento eficiente e inocuo para la desintoxicación o respectivamente para la degradación de las correspondientes toxinas.

Una vía para obtener plantas exentas de toxinas es el intento de cultivar unas denominadas plantas transgénicas, que son resistentes frente a determinadas toxinas, o, mediante empleo de plantas "manipuladas genéticamente", de acceder a unos alimentos que, a causa de la resistencia de las correspondientes plantas frente a las toxinas, estén exentos de las mismas.

Esta vía, junto al hecho de que es extremadamente compleja y complicada, no es indiscutida en muchos países del mundo y por ello se intenta encontrar otro modo de realizar la desintoxicación de las plantas.

A partir del documento de solicitud de patente internacional WO 96/12414 se puede deducir un aditivo para piensos destinado a la desactivación de micotoxinas, en el que una formulación enzimática preparada a partir de organismos que producen enzimas, está contenida en un pienso, escogiéndose los organismos que producen enzimas entre el conjunto de ellos que están capacitados para la fijación de epoxidasas y/o lactonasas.

A partir del documento WO 2004/085624 se pueden deducir transaminasas, desaminasas y aminomutasas, y composiciones de éstas, así como unos procedimientos para la desintoxicación enzimática de toxinas aminadas, por ejemplo de micotoxinas, tales como fumonisinas, en los que los genes que codifican las enzimas habían sido aislados directamente a partir del medio ambiente.

El documento de solicitud de patente de los EE.UU. US 2004/0208956 se refiere a un microorganismo para la desactivación biológica o la desintoxicación de micotoxinas, en particular de una ocratoxina, que se pueden desintoxicar en un medio mínimo.

El documento de patente de los EE.UU. US-A 6.482.511 se refiere a unas composiciones procedentes de procedimientos para la desintoxicación total de fumonisinas mediante unas enzimas aisladas y definidas.

Además, a partir del documento US 6.514.749 B1 se deduce un procedimiento para la identificación de unos organismos, que son capaces de degradar a las fumonisinas, utilizándose estos organismos para el aislamiento de los genes de enzimas, que son responsables de conferir una resistencia a fumonisinas, y los genes son llevados a expresión seguidamente, por ejemplo, en plantas o en microorganismos de la flora ruminal de bovinos.

Unas toxinas, que se pueden encontrar frecuentemente en particular en el maíz, y que, después de su consumición, dan lugar a graves perjuicios, son las fumonisinas o respectivamente los derivados de fumonisinas, que ciertamente se pueden degradar en ensayos de laboratorio mediante unos microorganismos ya conocidos, para las cuales, sin embargo, no se ha encontrado hasta la fecha ningún microorganismo que pueda llevar a cabo una tal degradación en las más diferentes concentraciones de la toxina y en diferentes entornos de nutrición. Además de esto, los microorganismos conocidos necesitan, para realizar esta degradación, unos intervalos de tiempo no insignificantes de más que 24 h, por lo que tales microorganismos no se pueden emplear convenientemente a una escala industrial o respectivamente comercial.

Otro problema adicional relacionado con las micotoxinas en el caso de alimentos y piensos consiste en que, debido al hecho de que se producen cada vez más piensos mixtos o respectivamente alimentos, que contienen un número múltiplo de cereales o respectivamente de variedades de cereales, de que se presentan al mismo tiempo varias micotoxinas en un mismo alimento o respectivamente pienso, y de que parece que es necesario realizar una degradación conveniente o respectivamente deliberada de las mismas. Además de esto, en unos estudios recientes, se comprobó que las toxinas pueden mostrar unas interacciones combinatorias unas con otras, que refuerzan aún más el efecto nocivo de las toxinas individuales. Así, por ejemplo, por Harvey se informó en 1996 que se llega a unos efectos sinérgicos de fumonisinas y del desoxinivalenol en el caso de cerdos. Adicionalmente, se presupone que el número múltiplo de las toxinas, que pueden estar contenidas, por ejemplo, en piensos, pueden conducir en el caso de animales a unos efectos inmunosupresores, que deben de ser atribuidos a la aparición paralela de micotoxinas.

El presente invento tiene por objetivo, por fin, poner a disposición unos microorganismos para la desintoxicación de fumonisinas y de derivados de fumonisinas, que, por una parte, puedan degradar a la toxina de un modo extremadamente rápido, y que, por otra parte, junto a la rápida degradación, puedan llevar a cabo la degradación también en presencia de las más diferentes concentraciones de sustancias nutrientes. Finalmente, el presente invento tiene por objetivo poner a disposición un microorganismo o respectivamente unas combinaciones de microorganismos que, junto a las fumonisinas, pueda (n) degradar a todavía otras toxinas a solas o en combinación, con el fin de acceder a un pienso exento de toxinas, en particular en el caso del empleo las más diferentes plantas para piensos.

Para resolver los problemas planteados por estas misiones, de acuerdo con el presente invento se pone a disposición un microorganismo para la desintoxicación de fumonisinas y de derivados de fumonisinas, empleándose unas bacterias o levaduras desintoxicadoras, escogidas entre las cepas DSM 16254 y DSM 16257, asignables al taxón de las Sphingomonadaceae, la cepa DSM 16255, asignable al taxón de las Rhizobiales, la cepa DSM 16256, asignable al taxón de las Microbacteriaceae, la cepa DSM 16253, asignable al taxón de las Rhizobiaceae, la cepa DSM 16252, asignable al taxón de las Alcaligenaceae y Pichia sp. DSM 16562, que transforman a las fumonisinas enzimáticamente, en una reacción de múltiples etapas, en metabolitos desaminados. Los microorganismos arriba mencionados no sólo están en la situación de transformar enzimáticamente a las fumonisinas, en una reacción de múltiples etapas, en metabolitos desaminados, sino que pueden realizar esto en unos períodos de tiempo extremadamente cortos y también en presencia de entornos complejos, tal como por ejemplo en piensos o alimentos, es decir en presencia de varias fuentes de carbono o respectivamente de las más diferentes fuentes de carbono, y en particular en presencia de una oferta en exceso de una sustancia nutriente.

En particular, los microorganismos pueden ser descritos brevemente de la siguiente manera. La cepa DSM 16254 se debe de asignar, después de una secuenciación parcial del ADNr 16S con el cebador 27 forward (hacia delante)

(longitud de la secuencia 689 pb (pares de bases) ) , al taxón de las Sphingomonadaceae. La secuencia parcial del ADNr 16S tiene la siguiente secuencia de bases:

realizándose que el microorganismo es gram negativo, forma pequeños bastoncillos, que se presentan predominantemente en células individuales y que forman parcialmente estructuras de cadenas filamentosas.

La cepa DSM 16257 pertenece, después de una secuenciación parcial del ADNr 16S (con el cebador 30 reverse (inverso) , longitud conseguida de la secuencia 426 pb) asimismo al taxón Sphingomonadaceae. Se establece... [Seguir leyendo]

1. Microorganismo para la desintoxicación de fumonisinas y de derivados de fumonisinas, empleándose unas bacterias o levaduras desintoxicadoras, que se escogen entre las cepas DSM 16254 y DSM 16257, asignables al taxón de las Sphingomonadaceae, la cepa DSM 16255, asignable al taxón de las Rhizobiales, la cepa DSM 16256, asignable al taxón de las Microbacteriaceae, la cepa DSM 16253, asignable al taxón de las Rhizobiaceae, la cepa DSM 16252, asignable al taxón de las Alcaligenaceae y Pichia sp. DSM 16562, las cuales transforman a las fumonisinas enzimáticamente, en una reacción de múltiples etapas, en unos metabolitos desaminados.

2. Microorganismo de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque las bacterias o levaduras son estabilizadas en forma de polvos, líquidos o geles.

3. Microorganismo de acuerdo con la reivindicación1 ò 2, caracterizado porque las bacterias o levaduras, junto a una fumonisina y a derivados de fumonisinas, desintoxican por lo menos a una micotoxina adicional, que se escoge entre las zearalenonas, las aflatoxinas o las ocratoxinas.

4. Utilización de bacterias o levaduras a solas o en combinaciones de dos o más cepas, que se escogen entre las cepas DSM 16254 y DSM 16257, asignables al taxón de las Sphingomonadaceae, la cepa DSM 16255, asignable al taxón de las Rhizobiales, la cepa DSM 16256, asignable al taxón de las Microbacteriaceae, la cepa DSM 16253, asignable al taxón de las Rhizobiaceae, la cepa DSM 16252, asignable al taxón de las Alcaligenaceae y Pichia sp. DSM 16562, para la desintoxicación de fumonisinas y de derivados de fumonisinas en alimentos y/o piensos.

5. Utilización de acuerdo con la reivindicación 4, caracterizada porque las bacterias o las levaduras se emplean adicionalmente para la desintoxicación de por lo menos una micotoxina adicional, que se escoge entre las zearalenonas, las aflatoxinas o las ocratoxinas.

6. Utilización de acuerdo con la reivindicación 4 ó 5, caracterizada porque se emplean unos cultivos mixtos de bacterias y/o levaduras para la desintoxicación de las micotoxinas.

7. Utilización de acuerdo con la reivindicación 4, 5 ó 6 para la desintoxicación de unas bajas concentraciones de micotoxinas, en particular de 100 μg/kg a 500 mg/kg, de manera preferida de 250 μg/kg a 25 mg/kg, de fumonisinas y de derivados de fumonisinas, de 10 μg/kg a 10 mg/kg, de manera preferida de 40 μg/kg a 2 mg/kg, de zearalenonas o respectivamente de derivados de zearalenonas, de 1 μg/kg a 2 mg/kg, de manera preferida de 10 μg/kg a 750 μg/kg, de aflatoxinas, de 1 μg/kg a 2 mg/kg, de manera preferida de 5 μg/kg a 500 μg/kg, de ocratoxinas.

8. Utilización de acuerdo con una de las reivindicaciones 4 hasta 7, caracterizada porque se emplea una combinación o respectivamente un cultivo mixto, que contiene adicionalmente por lo menos otra bacteria adicional o una levadura, que se escoge entre: Sphingomonas sp. DSM 14170 y DSM 14167, Stenotrophomonas nitritreducens DSM 14168, Stenotrophomonas sp. DSM 14169, Ralstonia eutropha DSM 14171, Eubacterium sp. DSM 14197, Trichosporon mycotoxinivorans DSM 14153, Cr y ptococcus sp. DSM 14154, Rhodotorula yarrowii DSM 14155, Trichosporon mucoides DSM 14156, Trichosporon dulcitum DSM 14162 o Eubacterium DSM 11798, para la desintoxicación de micotoxinas, en particular de fumonisinas y de derivados de fumonisinas, de zearalenonas o respectivamente de derivados de zearalenonas, de ocratoxinas, de tricotecenos y/o de aflatoxinas, para la desintoxicación de unas micotoxinas que se presentan en común, en particular de una fumonisina y de derivados de fumonisinas, de zearalenonas o respectivamente de derivados de zearalenonas, de aflatoxinas, o de ocratoxinas.

9. Procedimiento para la desintoxicación de fumonisinas y de derivados de fumonisinas mediando utilización de un microorganismo de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 hasta 4, que comprende una transformación enzimática de fumonisinas en un metabolito desaminado, en un pienso, que contiene un número de gérmenes de 103/g del pienso a 108/g del pienso, en particular de 2x104/g del pienso a 5x106/g del pienso, en una reacción de múltiples etapas.

10. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 9, caracterizado porque la desintoxicación se lleva a cabo en condiciones acuosas en un medio mínimo o en entornos complejos con una aportación de nutrientes y fuentes de carbono en exceso.

11. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 9 ó 10, caracterizado porque se lleva a cabo en el transcurso de 15 min a 12 h, en particular de 15 min a 2 h.

12. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 9, 10 ó 11, caracterizado porque por lo menos una micotoxina adicional, que se escoge entre las zearalenonas, las aflatoxinas o las ocratoxinas, es transformada en un producto de degradación no tóxico.

13. Procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones 9 hasta 12, caracterizado porque se emplea una combinación o respectivamente un cultivo mixto, que contiene adicionalmente por lo menos otra bacteria adicional o

una levadura, que se escoge entre Sphingomonas sp. DSM 14170 y DSM 14167, Stenotrophomonas nitritreducens DSM 14168, Stenotrophomonas sp. DSM 14169, Ralstonia eutropha DSM 14171, Eubacterium sp. DSM 14197, Trichosporon mycotoxinivorans DSM 14153, Cr y ptococcus sp. DSM 14154, Rhodotorula yarrowii DSM 14155, Trichosporon mucoides DSM 14156, Trichosporon dulcitum DSM 14162 o Eubacterium DSM 11798, para la desintoxicación de micotoxinas, en particular de fumonisinas y de derivados de fumonisinas, de zearalenonas o respectivamente de derivados de zearalenonas, de ocratoxinas, de tricotecenos y/o de aflatoxinas.

14. Procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones 9 hasta 12, caracterizado porque para la desintoxicación de alimentos y/o piensos, los microorganismos son mezclados con los alimentos y/o piensos en cada caso en una proporción de 0, 01 % en peso a 1, 5 % en peso, en particular de 0, 05 % en peso a 0, 7 % en peso.

15. Aditivo para piensos destinado a la desactivación de micotoxinas, en particular de fumonisinas y de derivados de fumonisinas, caracterizado porque el aditivo para piensos contiene un microorganismo de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 hasta 4 en un número de gérmenes de 2x108/kg del aditivo para piensos a 2x1015/kg del aditivo para piensos, en particular de 1x109/kg del aditivo para piensos a 5x1012/kg del aditivo para piensos.

16. Aditivo para piensos de acuerdo con la reivindicación 15, caracterizado porque él contiene adicionalmente por lo menos otra bacteria adicional o una levadura, que se escoge entre Sphingomonas sp. DSM 14170 y DSM 14167, Stenotrophomonas nitritreducens DSM 14168, Stenotrophomonas sp. DSM 14169, Ralstonia eutropha DSM 14171, Eubacterium sp. DSM 14197, Trichosporon mycotoxinivorans DSM 14153, Cr y ptococcus sp. DSM 14154, Rhodotorula yarrowii DSM 14155, Trichosporon mucoides DSM 14156, Trichosporon dulcitum DSM 14162 o Eubacterium DSM 11798, para la desintoxicación de micotoxinas, en particular de fumonisinas y de derivados de fumonisinas, de zearalenonas o respectivamente de derivados de zearalenonas, de ocratoxinas, de tricotecenos y/o de aflatoxinas.

17. Utilización de un aditivo para piensos de acuerdo con la reivindicación 15 ó 16 para la desactivación de las fumonisinas B1, B2 y B3 y de derivados de fumonisinas, de zearalenonas o respectivamente de derivados de zearalenonas, de zearalenol, de glicósidos de zearalenona, de las aflatoxinas B1, B2, G1, G2, M1, M1, de desoxinivalenol (DON) , de la toxina T-2, de la toxina HT-2, del nivalenol, del monoacetoxi-escirpenol, del diacetoxiescirpenol, del tricodermol, de la verrucarina, de la rorodina, del acetil-desoxinivalenol, de la isotricodermina, de la hidroxi-isotricodermina, de la calonectrina, del tetraol T-2, del triol T-2, del desacetil-neosolaniol, del neosolaniol, de acetil-neosolaniol, del esporotriquiol, del tricotriol, del sambucinol y de la culmorina y/o de las ocratoxinas A, B, C, D.