Microesferas de liberación prolongada para administración inyectable, y procedimiento de preparación.

Microesferas de estructura matricial, desprovistas de cualquier vestigio de disolvente orgánico,

que consisten enun principio activo proteico no desnaturalizado y un agente de recubrimiento destinado a prolongar su liberación, yobtenidas por coacervación del agente de recubrimiento en presencia de un fluido supercrítico en una autoclave,para su utilización como medicamento destinado a ser inyectado por vía subcutánea o intramuscular,siendo dicho agente de recubrimiento una mezcla de mono-, di- y triglicéridos, y de ésteres de ácido graso y depolietilenglicol:

- comprendiendo dicha coacervación las etapas de puesta en suspensión y disolución bajo agitaciónrespectivamente del principio activo y del agente de recubrimiento en el fluido supercrítico, y de

- modificación de la temperatura y/o de la presión para desolvatar de manera controlada el agente derecubrimiento y provocar su coacervación sobre el principio activo, manteniéndose la agitación.

Microesferas de liberación prolongada para administración inyectable, y procedimiento de preparación.

La presente invención se refiere al campo de las micropartículas destinadas a ser administradas por vía inyectable, subcutánea o intramuscular.

Existe hoy en día una necesidad de formulaciones farmacéuticas de liberación prolongada, destinadas a la administración de proteínas por vía inyectable, que estén desprovistas de cualquier vestigio de disolventes orgánicos.

Se deben realizar intensos esfuerzos para desarrollar nuevos sistemas eficaces de administración de proteínas. Todas las técnicas clásicas de preparación de sistemas de micropartículas inyectables de liberación controlada, ya sea la preparación de microcápsulas mediante el método de emulsión (aceite/agua) /evaporación de disolvente (Hora et al., Pharm. Res., 7 (1990) , 1190-1194; Jalil, R. et al., L. Microencapsulation, 7 (1990) 294-325) , de coacervación en fase orgánica (Ruiz et al., Pharm. Res., 7 (1990) 928-934; Mc Gee, J.P. et al., J. Controlled Release, 34 (1995) 77-86) o mediante la técnica de doble emulsión (agua/aceite/agua) /evaporación de disolvente (Ogawa, Y et al., Chem. Pharm. Bull., 36 (1988) 1095-1103) conducen a la utilización de disolventes orgánicos. Éstos necesitan unas etapas de control y de dosificación precisa de los niveles de disolventes residuales con el fin de limitar estos niveles y evitar cualquier efecto secundario perjudicial para el paciente. Además, las autoridades gubernamentales establecen normas severas para evitar la contaminación del medioambiente con los disolventes orgánicos inherentes a los procedimientos de producción, y limitar, incluso suprimir, el empleo de disolventes orgánicos en las composiciones farmacéuticas. Por último, en las formulaciones de proteína, pueden aparecer unos problemas de desnaturalización inducidos por el contacto con los disolventes y unos fenómenos indeseables de adsorción en las interfaces disolventes/agua.

La solicitud EP 257 368 tiene por objeto unas microesferas para administración parenteral que contienen una proteína recubierta con un cuerpo graso o con una cera destinados a prolongar la liberación de dicha proteína. Se obtienen por nebulización de una formulación que contiene proteína, una sal y un agente tensioactivo. La proteína y los aditivos se mezclan con la cera o con el cuerpo graso en fusión antes de sufrir una nebulización. En el marco de este procedimiento, la proteína está expuesta a temperaturas elevadas, del orden de 75 a 80ºC, necesarias para proceder a la fusión de la cera. La aplicación de dichas temperaturas provoca la desnaturalización sustancial de la proteína. Las microesferas descritas en la solicitud EP 257 368 están destinadas a un uso veterinario, y los principios activos proteicos formulados no son costosos, de modo que su desnaturalización sustancial durante el procedimiento de preparación no constituye una desventaja seria. La enseñanza de este documento no está adaptada a la formulación de principios activos proteicos particularmente sensibles al calor y cuyo precio de coste es tal que la actividad debe ser preservada en su totalidad.

La presente invención tiene como objeto unas microesferas, como las definidas en la reivindicación 1, destinadas a ser administradas por vía inyectable, que comprenden un principio activo proteico y un agente que recubre el principio activo destinado a prolongar su liberación.

Las micropartículas según la invención, que contienen un principio activo proteico, se distinguen de las micropartículas de la técnica anterior por su estructura matricial, por la ausencia de cualquier vestigio de disolvente orgánico y por el hecho de que el principio activo proteico no está desnaturalizado.

Las micropartículas según la invención están desprovistas de cualquier vestigio de disolvente orgánico, son susceptibles de ser obtenidas según un procedimiento de recubrimiento que implica la puesta en contacto bajo agitación del principio activo y del agente de recubrimiento en un fluido supercrítico, siendo dicho agente de recubrimiento soluble en el fluido supercrítico. El principio activo proteico es insoluble en el fluido supercrítico y no está desnaturalizado.

El tamaño medio de las micropartículas según la invención está comprendido entre 0, 1 y 150 μm.

Su contenido en principio activo está comprendido entre el 0, 5 y el 50% en peso, preferentemente entre el 3 y el 20% en peso.

Se ha puesto en evidencia que la realización de un procedimiento de preparación de micropartículas mediante una técnica que utiliza un fluido supercrítico y un agente de recubrimiento soluble en este fluido permite obtener unas microesferas con propiedades ventajosas.

La solicitud EP 706 821 describe el recubrimiento de sustancias activas particuladas en el caso en el que el agente de recubrimiento utilizado es soluble en el CO2 supercrítico. Después de la solubilización en el CO2 supercrítico, el agente de recubrimiento se pone en contacto con la proteína a recubrir en un reactor cerrado bajo agitación. Unas modificaciones de presión y de temperatura en el mismo conducen a la desolvatación del agente de recubrimiento y por lo tanto a su precipitación sobre la sustancia activa. Este método no hace intervenir ni disolvente orgánico, ni agua, y se realiza a una temperatura relativamente baja. Más precisamente, las partículas de sustancia activa son puestas en suspensión en el CO2 supercrítico, y después el agente de recubrimiento se disuelve en la suspensión. La presión y/o la temperatura disminuyen después de manera controlada para reducir la solubilidad del recubrimiento en el fluido supercrítico y provocar el depósito del recubrimiento en la superficie de las partículas de sustancia activa. La capa de recubrimiento puede ser monomolecular o alcanzar hasta 100 μm de espesor. El tamaño de las partículas encapsuladas está comprendido entre 20 nm y 500 μm. El recubrimiento es un cuerpo graso o un polímero biodegradable soluble en el CO2 supercrítico. El depósito del recubrimiento se efectúa entre 30 y 45ºC, entre 70 y 280 bar durante 30 minutos hasta 4 horas, bajo agitación.

La realización del procedimiento según la invención consiste en poner en suspensión un principio activo bajo agitación en un fluido supercrítico que contiene por lo menos un agente de recubrimiento disuelto en el mismo, y después en modificar las condiciones de presión y/o de temperatura del medio para asegurar la coacervación de las partículas, por desolvatación del agente de recubrimiento alrededor de las partículas de principio activo, es decir asegurar la coacervación de las partículas mediante modificación fisicoquímica del medio. Este procedimiento conduce a unas micropartículas matriciales que contienen varias partículas de principio activo proteico.

Se ha descubierto, en el marco de la presente invención, que adaptando el valor de ciertos parámetros del procedimiento, en particular el contenido en principio activo equivalente a la relación principio activo/agente de recubrimiento, el modo de agitación, y la relación agente de recubrimiento/fluido supercrítico, se obtienen unas microesferas con propiedades ventajosas que presentan una estructura matricial.

El fluido supercrítico utilizado preferentemente es el CO2 supercrítico (CO2SC) , las condiciones de funcionamiento iniciales típicas de este procedimiento son de aproximadamente 30 a 45ºC y de 75 a 280 105 Pa, aunque se pueden utilizar unos valores más elevados de uno o del otro de los dos parámetros o lo dos, con la condición por supuesto de que los valores más elevados no tengan ningún efecto perjudicial o de degradación sobre el principio activo durante el revestimiento, ni sobre los agentes de recubrimiento.

Este procedimiento implica la puesta en suspensión en una autoclave, de un principio activo no soluble en el fluido supercrítico, y después la introducción en esta autoclave del agente de recubrimiento que se encuentra en el estado de soluto en el fluido supercrítico.

La presión y/o la temperatura se modifican después con el fin de disminuir la solubilidad del agente de recubrimiento en el fluido. Así, la afinidad del agente de recubrimiento para el principio activo aumenta de tal manera que este recubrimiento se adsorbe alrededor del principio activo. Una vez depositado este agente de recubrimiento sobre el principio activo, se despresuriza la autoclave y se recuperan las micropartículas.

Para realizar este procedimiento, se coloca el principio activo a revestir en una autoclave equipada con un agitador, y después se presuriza el sistema introduciendo en la autoclave un fluido llevado a condiciones supercríticas.... [Seguir leyendo]

1. Microesferas de estructura matricial, desprovistas de cualquier vestigio de disolvente orgánico, que consisten en un principio activo proteico no desnaturalizado y un agente de recubrimiento destinado a prolongar su liberación, y

obtenidas por coacervación del agente de recubrimiento en presencia de un fluido supercrítico en una autoclave, para su utilización como medicamento destinado a ser inyectado por vía subcutánea o intramuscular,

siendo dicho agente de recubrimiento una mezcla de mono-, di- y triglicéridos, y de ésteres de ácido graso y de polietilenglicol:

- comprendiendo dicha coacervación las etapas de puesta en suspensión y disolución bajo agitación respectivamente del principio activo y del agente de recubrimiento en el fluido supercrítico, y de

-modificación de la temperatura y/o de la presión para desolvatar de manera controlada el agente de 15 recubrimiento y provocar su coacervación sobre el principio activo, manteniéndose la agitación.

2. Microesferas para su utilización como medicamento según la reivindicación 1, caracterizadas porque su tamaño medio está comprendido entre 0, 1 y 150 μm.

3. Microesferas para su utilización como medicamento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizadas porque su contenido en principio activo está comprendido entre el 0, 5 y el 50% en peso, preferentemente entre el 3 y el 20% en peso.

4. Microesferas para su utilización como medicamento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizadas porque el principio activo proteico es una proteína seleccionada de entre la proteína correspondiente a la hormona paratiroidea, la hormona de crecimiento, el factor estimulador de colonias de granulocitos, el factor estimulador de colonias de macrófagos de granulocitos, el péptido vasoactivo intestinal, la hormona liberadora de tirotropina, la arginina vasopresina, la angiotensina, la insulina, la somatotropina, el antígeno HBS del virus de la hepatitis B, el activador de tejido plasminógeno, los factores de coagulación VIII y IX, la glucosilceramidasa, la sargramostima, la lenograstina, la filgrastina, la interleucina 2, la dornasa α, la molgramostima, la PEG-L-asparaginasa, la PEGadenosina desaminasa, la hirudina, el eptacog α, la eritropoyetina y los factores de crecimiento nervioso.

5. Microesferas para su utilización como medicamento según la reivindicación 4, caracterizadas porque el principio activo es la eritropoyetina. 35

6. Microesferas para su utilización como medicamento según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizadas porque el principio activo proteico es un péptido seleccionado de entre la triptorelina, la bombesina, la calcitonina, la hormona paratiroidea, el péptido liberador de gastrina, la hormona liberadora de hormona luteinizante, el factor liberador de hormona de crecimiento y la amilina.

7. Microesferas para su utilización como medicamento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizadas porque la concentración en agente de recubrimiento en el fluido supercrítico está comprendida entre 1, 5 y 4, 5 g/l, preferentemente es igual a 2 g/l aproximadamente.

8. Microesferas para su utilización como medicamento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizadas porque se obtienen a una temperatura de coacervación comprendida entre 30 y 45ºC, a una presión de coacervación comprendida entre 100 y 280·105 Pa, preferentemente entre 180 y 220·105 Pa, y bajo una agitación cuya velocidad está comprendida entre 100 y 1000 rpm, preferentemente es igual a 450 rpm.

9. Microesferas para su utilización como medicamento según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizadas porque se coloca un inserto en la autoclave, y porque la puesta en suspensión y la disolución del principio activo y del agente de recubrimiento se realizan respectivamente en el inserto.

10. Microesferas para su utilización como medicamento según la reivindicación 9, caracterizadas porque dicho 55 inserto está provisto de dos sinterizados que permiten la entrada y la salida del fluido supercrítico.