METODOS Y COMPOSICIONES PARA LA CLONACION Y SUBCLONACION DIRIGIDAS UTILIZANDO RECOMBINACION HOMOLOGA.

Método para introducir una secuencia de ADN diana bicatenaria en un vector mediante recombinación homóloga, secuencia de ADN diana que está flanqueada por un primer término de ADN bicatenario por un lado, y por un segundo término de ADN bicatenario por el otro lado, secuencia diana y primer y segundo términos que residen en cualquier molécula de ADN que se replica independientemente o cualquier fuente de ADN, comprendiendo dicho método las etapas siguientes: a)construir un ADN vector que comprende, en el siguiente orden a lo largo de la cadena de ADN vector:

(i) un primer brazo de homología bicatenario;
(ii) un origen de replicación; y
(iii) un segundo brazo de homología bicatenario, siendo la secuencia de una cadena del primer brazo de homología del ADN vector homóloga a la secuencia de una cadena de ADN del primer término que flanquea la secuencia de ADN diana, siendo la secuencia de una cadena del segundo brazo de homología del ADN vector homóloga a la secuencia de una cadena de ADN del segundo término que flanquea la secuencia de ADN diana, siendo la orientación de los dos brazos con relación al inserto deseado la misma que la orientación de las secuencias homólogas con relación al ADN diana de forma que la recombinación entre los brazos de homología y los primer y segundo términos da como resultado que se inserte la secuencia diana deseada entre los brazos de homología, b)introducir dicho ADN vector en una célula; y c)cultivar dicha célula en condiciones de forma que la secuencia de ADN diana se introduzca en el ADN vector entre los brazos de homología, en el que, bajo dichas condiciones de cultivo, dicha célula (i) comprende dicho ADN diana y (ii) expresa una recombinasa bacteriana, siendo tal recombinasa de origen fágico o bacteriano y siendo capaz de mediar la recombinación homóloga, o un equivalente funcional de la misma.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: THE EUROPEAN MOLECULAR BIOLOGY LABORATORY.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: MEYERHOFSTRASSE 1,69117 HEIDELBERG.

Inventor/es: STEWART, FRANCIS, A., ZHANG, YOUMING, MUYRERS, JOEP, PIETER, PAUL.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 10 de Julio de 2000.

Fecha Concesión Europea: 21 de Septiembre de 2005.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/10 (Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/90 (Introducción estable de ADN extraño en el cromosoma)

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Oficina Europea de Patentes, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania, Armenia, Azerbayán, Bielorusia, Ghana, Gambia, Kenya, Kirguistán, Kazajstán, Lesotho, República del Moldova, Malawi, Mozambique, Federación de Rusia, Sudán, Sierra Leona, Tayikistán, Turkmenistán, República Unida de Tanzania, Uganda, Zimbabwe, Burkina Faso, Benin, República Centroafricana, Congo, Costa de Marfil, Camerún, Gabón, Guinea, Malí, Mauritania, Niger, Senegal, Chad, Togo, Organización Regional Africana de la Propiedad Industrial, Swazilandia, Guinea-Bissau, Organización Africana de la Propiedad Intelectual, Organización Eurasiática de Patentes.

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