Métodos y composiciones para modular el crecimiento de células pluripotenciales y la diferenciación.

Una composición para uso en un método para tratar un sujeto, en la que dicho sujeto se caracteriza por exhibir opresentar degeneración muscular o agotamiento muscular

, caracterizada por modular la proliferación, diferenciacióno tanto la proliferación como la diferenciación de células pluripotenciales musculares CD45+:Sca1+, comprendiendola composición Wnt 7a y un vehículo o diluyente farmaceúticamente aceptable; en la que las células pluripotencialesmusculares CD45+:Sca1+ no son células pluripotenciales embrionarias humanas

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/CA2004/000941.

Solicitante: OTTAWA HOSPITAL RESEARCH INSTITUTE.

Inventor/es: .

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION G — FISICA > METROLOGIA; ENSAYOS > INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION... > Investigación o análisis de materiales por métodos... > G01N33/50 (Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre, de orina; Investigación o análisis por métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Investigación o análisis inmunológico (procedimientos de medida, de investigación o análisis diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto; procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas... > Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas;... > C07K14/47 (de mamíferos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen péptidos... > A61K38/17 (que provienen de animales; que provienen de humanos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen sustancias... > A61K35/12 (Sustancias procedentes de mamíferos; Composiciones que comprenden tejidos o células indeterminadas; Composiciones que comprenden células madre no embrionarias; Células modificadas genéticamente (células madre no caracterizadas A61K 35/545; vacunas o preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos A61K 39/00))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas... > Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas;... > C07K14/475 (Factores de crecimiento; Reguladores de crecimiento)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen sustancias... > A61K35/34 (Músculos; Células del músculo liso; Corazón; Células madre cardiacas; Mioblastos; Miocitos; Cardiomiocitos (músculo liso vascular A61K 35/44))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales,... > C12N5/077 (Células mesenquimales, p. ej. Células óseas, células cartilaginosas, Células del estroma de la médula ósea, células adiposas o células musculares)

PDF original: ES-2433493_T3.pdf

 

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Fragmento de la descripción:

Métodos y composiciones para modular el crecimiento de células pluripotenciales y la diferenciación

Campo de la invención La presente invención pertenece al campo de los terapéuticos de células pluripotenciales y en particular a composiciones para inducir o inhibir el compromiso de linaje o la proliferación de células pluripotenciales.

Antecedentes de la invención La familia Wnt de genes codifica más de veinte glucoproteínas segregadas ricas en cisteína que actúan por medio de unión a receptores Frizzled (Fzd) sobre células diana. La unión de Wnt a Fzd puede iniciar la señalización por medio de uno o varios mecanismos. En el mecanismo denominado canónico, la activación de Disheveled conduce a la inactivación de la glucógeno sintasa quinasa-3β (GSK-3β) , una serina-treonina quinasa citoplasmática. La dianagsk-3β, β-catenina, se estabiliza de este modo y experimenta translocación hasta el núcleo en el que activa la transcripción dependiente del (factor celular-T) TCF de promotores específicos (Wodarz, 1998; Dierick, 1999) . En el mecanismo de polaridad tisular plano o no canónico, la unión de Wnt a Fzd también activa Disheveled (Krasnow y col., (1995) . Development 121, 4095-4102) que en este caso activa RhoA, una pequeña proteína g (Strutt y col., (1997) . Nature 387, 292-295) . Posteriormente, Rhoa señaliza a través de JNK (quinasa terminal Jun N) y Rock (Rho asociada a quinasa) (Boutros y col., (1998) . Cell 94, 109-118) para regular la dinámica citoesquelética durante la gastrulación. Las proteínas Wnt también se conocen por señalizar a través de la modulación de calcio intracelular. Se piensa que esto activa la proteína quinasa C (PKC) (Sheldahl y col., (1999) . Curr Biol 9, 695-698) y conduce a la translocación nuclear del factor de transcripción NFAT.

Recientemente, se ha determinado que los mecanismos de señalización de Wnt son capaces de dirigir la determinación de destino celular en varios tejidos, incluyendo riñón (Labus, 1998; Vainio, 2000) , CNS (Patapoutian, 2000) , hematopoyético (Van Der Berg, 1998) y músculo esquelético (Cossu, 1999) . También se ha implicado la señalización Wnt en la cicatrización de heridas de pos-nacimiento y en la regeneración tisular en pez cebra e hidra (Hobmayer 2000; Labus, 1998; Poss, 2000) .

Se ha descrito la implicación de la señalización de Wnt en la proliferación y diferenciación de células pluripotenciales hematopoyéticas procedentes del tejido fetal o de médula ósea. Por ejemplo las patentes de EE.UU. Nos 5.851.984 y 6.159.462 describen el uso de polipéptidos Wnt para mejorar la proliferación, diferenciación y/o mantenimiento de las células progenitoras o pluripotenciales hematopoyéticas y la patente de EE.UU. nº 6.465.249 describe el uso de β-catenina para la expansión in vitro del progenitor o de las células pluripotenciales, en particular células pluripotenciales hematopoyéticas. La patente de EE.UU. nº 6.165.748 describe nuevas proteínas, las proteínas de Frazzled, que están implicadas en los mecanismos de señalización Wnt y su uso para inducir la expresión de factores y/o la diferenciación de tejidos y órganos. La solicitud de patente canadiense nº 2.353.804 describe el uso de Wnt3a para estimular la miogénesis en células de carcinoma embrionarias P19 y sugiere que la miogénesis se puede controlar por medio de la modulación de la actividad Wnt, en particular que la miogénesis se puede inhibir por medio de la inhibición de un polipéptido Wnt.

La solicitud de patente de EE.UU. nº 20010055790 describe nuevos polipéptidos Wnt 7a; el uso de polipéptidos Wnt

7a y polinucleótidos en el tratamiento de determinadas enfermedades; y métodos de evaluación de la función Wnt 7a y los niveles, con fines de diagnóstico y para la identificación de moduladores potenciales de Wnt 7a.

La solicitud de patente de EE.UU. nº 20030040051 describe un conjunto de nuevos miembros de la familia de genes de Frizzled de vertebrados y métodos de identificación de compuestos que afectan a la unión de un Wnt a los polipéptidos codificados por estos genes.

Rudnicki Michael A, FASEB JOURNAL, Vol. 17, nº. 4-5, marzo de 2003, páginas Abstratct nº. 487.1 describe la regulación molecular de la especificación de células pluripotenciales adultas en músculo. Se afirma que los mioblastos primarios expresan Wnt 5a y un co cultivo de células pluripotenciales adultas CD45+/Sca-1+ con 55 fibroblastos que expresan Wnt fue suficiente para inducir su especificación miogénica.

Las células pluripotenciales presentan potencial para proporcionar un beneficio en una variedad de configuraciones clínicas, pero se han encontrado un número de limitaciones a muchas aplicaciones incluyendo, por ejemplo, la obtención de un número suficiente de células diana y la estimulación de la diferenciación terminal de estas células pluripotenciales para dar lugar a células maduras y específicas de tejidos.

Existe la necesidad en la técnica de métodos y composiciones que sean capaces de modular la proliferación, diferenciación o tanto la proliferación como la diferenciación de células pluripotenciales.

Se proporciona esta información de antecedentes con la finalidad de hacer que la información conocida por el solicitante sea de posible relevancia para la presente invención. No necesariamente se pretende admitir, ni se debe interpretar, que cualquier información anterior constituye la técnica anterior con respecto a la presente invención.

Es un objetivo de la invención solucionar estas desventajas de la técnica anterior.

El objetivo anterior se alcanza por medio de las combinaciones de características de las reivindicaciones principales, comentando las sub-reivindicaciones realizaciones más ventajosas de la invención.

Sumario de la invención Los inventores describen el uso de mecanismos de señalización de Wnt para modular la diferenciación de células pluripotenciales. De acuerdo con un aspecto de la presente invención, se proporciona un método para modular la proliferación de una población de células pluripotenciales adultas que comprende poner en contacto dicha población con uno o más moduladores de los mecanismos de señalización Wnt.

Los inventores describen un método para inducir el compromiso de linaje de una población de células pluripotenciales adultas para dar lugar a células progenitoras que comprende poner en contacto dicha población con uno o más activadores de los mecanismos de señalización Wnt.

Los inventores describen un método para aumentar la supervivencia de una población de células pluripotenciales adultas que comprende poner en contacto dicha población con uno o más activadores de los mecanismos de señalización Wnt.

Los inventores describen un método para inducir la diferenciación terminal de una población de células pluripotenciales miogénicas que comprende poner en contacto dicha población con uno o más activadores de los mecanismos de señalización Wnt.

Los inventores describen un método para inducir la proliferación y/o el compromiso de linaje de una población de células pluripotenciales residentes en un tejido adulto que comprende poner en contacto dichas células con uno o más activadores de los mecanismos de señalización de Wnt.

Los inventores describen un compuesto que se une y que inhibe la actividad de una proteína soluble relacionada de Frizzled y que es capaz de inducir la proliferación y/o el compromiso de linaje de células pluripotenciales adultas.

Los inventores describen un compuesto que se une y que inhibe la actividad de un receptor de Frizzled y que es 35 capaz de inhibir la proliferación y/o el compromiso de linaje de células... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Una composición para uso en un método para tratar un sujeto, en la que dicho sujeto se caracteriza por exhibir o presentar degeneración muscular o agotamiento muscular, caracterizada por modular la proliferación, diferenciación o tanto la proliferación como la diferenciación de células pluripotenciales musculares CD45+:Sca1+, comprendiendo la composición Wnt 7a y un vehículo o diluyente farmaceúticamente aceptable; en la que las células pluripotenciales musculares CD45+:Sca1+ no son células pluripotenciales embrionarias humanas.

2. La composición para uso de acuerdo con la reivindicación 1, que además comprende una o más células 10 pluripotenciales musculares CD45+:Sca1+.

3. El uso de Wnt 7a, para la preparación de un medicamento para tratar un sujeto, en el que dicho sujeto se caracteriza por exhibir o presentar degeneración muscular o agotamiento muscular, caracterizado por modular la proliferación, diferenciación o tanto la proliferación como la diferenciación de células pluripotenciales musculares CD45+:Sca1+ de dicho sujeto, en el que las células pluripotenciales musculares CD45+:Sca1+ no son células pluripotenciales embrionarias humanas.

4. El uso de la reivindicación 3, en el que el medicamento además comprende una o más células pluripotenciales musculares CD45+:Sca1+.

2.

5. Un método ex vivo para modular la proliferación, diferenciación o tanto la proliferación como la diferenciación de una población de células pluripotenciales musculares CD45+:Sca1+ que comprende poner en contacto dicha población con una composición que comprende Wnt 7a, y un vehículo o diluyente; en el que las células pluripotenciales musculares CD45+:Sca1+ no son células pluripotenciales embrionarias humanas.

2.

6. Un método de acuerdo con la reivindicación 5, en el que la composición además comprende una o más células pluripotenciales musculares CD45+:Sca1+.