Inhibidores polipeptídicos de HSP27 quinasa y usos de los mismos.

Un vehículo polipéptido aislado que tiene la secuencia de aminoácidos YARAAARQARAKALARQLGVAA

Inhibidores polipeptïdicos de HSP27 quinasa y usos de los mismos

Declaraciïn de Financiaciïn del Gobierno El Gobierno de Estados Unidos a travïs del Instituto Nacional de Salud ha proporcionado ayuda financiera para este proyecto segïn la subvenciïn de NIH/NHLBI nïmero R01 HL58027. Por lo tanto, el Gobierno de Estados Unidos puede poseer ciertos derechos con respecto a la presente invenciïn

Campo de la invenciïn La invenciïn estï en el campo de la biologïa celular y molecular, polipïptidos, descubrimiento de fïrmacos y mïtodos terapïuticos de uso. 15

Sumario de la invenciïn La presente invenciïn proporciona un polipïptido aislado que tiene la secuencia de aminoïcidos YARAAARQARAKALARQLGVAA, asï como dispositivos biomïdicos y composiciones que lo comprenden.

La presente divulgaciïn incluye un polipïptido que comprende o consiste en una secuencia de acuerdo con fïrmula general I:

Z1-X1-X2-X3-X4 X5-X6-X7-X8-X9-X10-Z2

donde Z1 y Z2 estïn de forma independiente ausentes o son dominios de transducciïn; X1 se selecciona del grupo que consiste en KA, KKA y KKKA, o estï ausente; X2 se selecciona del grupo que consiste en G, L, A, V, I, M, Y, W y F, o es un aminoïcido alifïtico; X3 se selecciona del grupo que consiste en V, L, I, A, G, Q, N, S, T y C, o es un aminoïcido alifïtico; X4 se selecciona del grupo que consiste en Q, N, H, R y K; X5 se selecciona del grupo que consiste en Q y N; X6 se selecciona del grupo que consiste en C, A, G, L, V, I, M, Y, W y F o es un aminoïcido alifïtico; X7 se selecciona del grupo que consiste en S, A, C, T y G o es un aminoïcido alifïtico; X8 se selecciona del grupo que consiste en V, L, I y M;

X9 estï ausente o es cualquier aminoïcido; y X10 estï ausente o es cualquier aminoïcido;

donde al menos una de las siguientes es cierta:

(a) X3 es N y X6 no es G;

(b) X6 es G y X3 no es N;

(c) X2 no es L;

(d) X4 no es R;

(e) X5 no es Q; 45 (f) X6 no es L;

(g) X8 no es V;

(h) X10 estï ausente; o

(i) X9 y X10 estïn ausentes; y

donde cuando X1 estï ausente, entonces Z1 es un dominio de transducciïn que termina en KA.

En diversas divulgaciones adicionales X4 es R; X5 es Q y/o X8 es V. En diversas divulgaciones adicionales, X3 se selecciona del grupo que consiste en A, G, Q y N.

En una divulgaciïn, al menos uno de Z1 y Z2 es un dominio de transducciïn.

En otro aspecto, la presente invenciïn proporciona composiciones, que comprenden el polipïptido YARAAARQARAKALARQLGVAA de la presente invenciïn y un vehïculo farmacïuticamente aceptable.

La presente divulgaciïn incluye secuencias de ïcido nucleico aisladas que codifican un polipïptido de la presente invenciïn. En divulgaciones adicionales, la presente solicitud divulga vectores de expresiïn recombinantes que comprenden las secuencias de ïcido nucleico divulgadas, y cïlulas hospedadoras transfectadas con los vectores de expresiïn recombinantes.

En otro aspecto, la invenciïn proporciona dispositivos biomïdicos, donde los dispositivos biomïdicos comprenden el polipïptido YARAAARQARAKALARQLGVAA de la presente invenciïn dispuesto en o sobre el dispositivo biomïdico.

En diversas realizaciones, dichos dispositivos biomïdicos incluyen endoprïtesis vasculares, injertos, shunts, injertos de endoprïtesis vasculares, dispositivos de angioplastia, catïteres de globo, fïstulas, apïsitos y cualquier dispositivo de suministro farmacolïgico implantable.

Tambiïn se divulgan mïtodos para uno o mïs de los siguientes usos terapïuticos

(a) reducir la proliferaciïn y/o migraciïn de cïlulas del mïsculo liso; (b) promover la relajaciïn del mïsculo liso;

(c) aumentar la frecuencia contrïctil del mïsculo cardiaco; (d) aumentar la frecuencia de relajaciïn del mïsculo cardiaco; (e) promover la curaciïn de heridas; (f) tratar y/o reducir los trastornos fibrïticos y/o queloides; (g) reducir la formaciïn de cicatrices; (h) alterar las adhesiones focales; (i) regular la polimerizaciïn de actina; y (j) tratar o reducir la incidencia de uno o mïs de hiperplasia de la ïntima, estenosis, reestenosis, aterosclerosis, tumores y metïstasis de cïlulas del mïsculo liso, espasmo del mïsculo liso, angina, angina de Prinzmetal (vasoespasmo coronario) , isquemia, ictus, bradicardia, hipertensiïn, hipertrofia cardiaca y otros daïos de ïrganos finales asociados con la hipertensiïn (incluyendo pero sin limitaciïn insuficiencia renal e ictus) ,

hipertensiïn pulmonar (de pulmïn) , asma (broncoespasmo) , toxemia del embarazo, parto prematuro, preeclampsia/eclampsia, enfermedad o fenïmeno de Raynaud, uremia hemolïtica, isquemia mesentïrica no oclusiva, fisura anal, acalasia, impotencia, migraïa, lesiïn muscular isquïmica asociada con espasmo del mïsculo liso, vasculopatïa, tal como vasculopatïa de trasplante; bradiarritmia, bradicardia, insuficiencia cardiaca congestiva, miocardio aturdido, hipertensiïn pulmonar, disfunciïn diastïlica, gliosis; enfermedad pulmonar obstructiva crïnica, osteopenia, disfunciïn endotelial, e inflamaciïn; donde el mïtodo comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad eficaz para llevar a cabo el o los usos terapïuticos de uno o mïs polipïptidos o composiciones divulgados o de la invenciïn, o equivalentes funcionales de los mismos.

Descripciïn detallada de la invenciïn Dentro de la presente solicitud, a no ser que se indique de otro modo, las tïcnicas utilizadas pueden encontrarse en cualquiera de varias referencias bien conocidas tales como: Molecular Cloning: A Laborator y Manual (Sambrook, et al., 1989, Cold Spring Harbor Laborator y Press) , Gene Expression Technology (Methods in Enzymology, Vol. 185, editado por D. Goeddel, 1991. Academic Press, San Diego, CA) , “Guide to Protein Purification” en Methods in Enzymology (M.P. Deutshcer, ed., (1990) Academic Press, Inc.) ; PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications (Innis, et al. 1990. Academic Press, San Diego, CA) , Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique, 2ï Ed. (R.I. Freshney. 1987. Liss, Inc. Nueva York, NY) , y Gene Transfer and Expression Protocols, pp. 109-128, ed. E.J. Murray, The Humana Press Inc., Clifton, N.J.

Se usa predominantemente en el presente documento la designaciïn de una ïnica letra para aminoïcidos. Como se conoce bien por un experto en la materia, dichas designaciones de una ïnica letra son las siguientes:

A es alanina; C es cisteïna; D es ïcido aspïrtico; E es ïcido glutïmico; F es fenilalanina; G es glicina; H es histidina; I es isoleucina; K es lisina; L es leucina; M es metionina; N es asparagina; P es prolina; Q es glutamina; R es arginina; S es serina; T es treonina; V es valina; W es triptïfano; e Y es tirosina.

Como se usa en el presente documento, las formas singulares “un” y “el” incluyen referentes plurales a no ser que el contexto claramente dicte otra cosa. Por ejemplo, la referencia a un “polipïptido” significa uno o mïs polipïptidos.

La presente invenciïn proporciona un polipïptido aislado que tiene la secuencia de aminoïcidos YARAAARQARAKALARQLGVAA, asï como dispositivos biomïdicos y composiciones que los comprenden.

La presente divulgaciïn incluye un polipïptido que comprende o consiste en una secuencia de acuerdo con fïrmula general I:

Z1-X1-X2-X3-X4 X5-X6-X7-X8-X9-X10-Z2

donde Z1 y Z2 estïn de forma independiente ausentes o son dominios de transducciïn; X1 se selecciona del grupo que consiste en KA, KKA y KKKA, o estï ausente;

X2 se selecciona del grupo que consiste en G, L, A, V, I, M, Y, W y F, o es un aminoïcido alifïtico; X3 se selecciona del grupo que consiste en V, L, I, A, G, Q, N, S, T y C, o es un aminoïcido alifïtico; X4 se selecciona del grupo que consiste en Q, N, H, R y K; X5 se selecciona del grupo que consiste en Q y N; X6 se selecciona del grupo que consiste en C, A, G, L, V, I, M, Y, W y F o es un aminoïcido alifïtico; X7 se selecciona del grupo que consiste en S, A, C, T y G o es un aminoïcido alifïtico; X8 se selecciona del grupo que consiste en V, L, I y M; X9 estï ausente o es cualquier aminoïcido; y X10 estï ausente o es cualquier aminoïcido;

donde al menos una de las siguientes es cierta:

(a) X3 es N y X6 no es G;

(b) X6 es G y X3 no es N;

(c) X2 no es L;

(d) X4 no es R; 5 (e) X5 no es Q;

(f) X6 no es L;

(g) X8 no es V;

(h) X10 estï ausente; o

(i) X9 y X10 estïn ausentes; y

donde cuando X1 estï ausente, entonces Z1 es un dominio de transducciïn que termina en KA.

Ademïs... [Seguir leyendo]

1. Un vehïculo polipïptido aislado que tiene la secuencia de aminoïcidos YARAAARQARAKALARQLGVAA.

2. Un dispositivo biomïdico que comprende el polipïptido de acuerdo con la reivindicaciïn 1 dispuesto en o sobre dicho dispositivo biomïdico.

3. El dispositivo biomïdico de acuerdo con la reivindicaciïn 2, seleccionïndose dicho dispositivo biomïdico de la lista que consiste en: una endoprïtesis vascular, un injerto, un shunt, un injerto de endoprïtesis vascular, un dispositivo de angioplastia, un catïter de globo, una fïstula, un apïsito y un dispositivo de suministro farmacolïgico implantable.

4. Una composiciïn que comprende el polipïptido de acuerdo con la reivindicaciïn 1 y un vehïculo farmacïuticamente aceptable.