INHIBIDORES DE SERINA PROTEASAS.

La presente invención se refiere a compuestos que inhiben la actividad serina proteasa, particularmente la actividad de la proteasa NS3-NS4A del virus de la hepatitis C. Como tal, actúan interfiriendo con el ciclo vital del virus de la hepatitis C y también son útiles como agentes antivirales. La invención se refiere adicionalmente a composiciones que comprenden estos compuestos tanto para su uso ex vivo como para la administración a un paciente que padece una infección por VHC. La invención también se refiere al uso de una composición que comprende un compuesto de la presente invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de infección por VHC en un paciente. Antecedentes de la invención La infección por el virus de la hepatitis C (VHC) es un problema médico humano apremiente. El VHC se reconoce como el agente causante de la mayoría de los casos de hepatitis no A y no B, calculándose globalmente una serofrecuencia en seres humanos del 3% [A. Alberti y col Natural History of Hepatitis C, J. Hepatology, 31., (Supl. 1), págs. 17-24 (1999)]. Solo en los Estados Unidos, casi cuatro millones de personas pueden estar infectadas.[M.J. Alter y col., The Epidemiology of Viral Hepatitis in the United States, Gastroenterol. Clin. North Am., 23, págs. 437- 455 (1994); M. J. Alter Hepatitis C Virus Infection in the United States, J. Hepatology, 31., (Supl. 1), págs. 88-91 (1999)]. Después de la primera exposición al VHC solo aproximadamente el 20% de los individuos infectados desarrollan hepatitis clínica aguda mientras que otros parece que solucionan la infección de manera espontánea. sin embargo, casi en el 70% de los casos, el virus establece una infección crónica que persiste durante décadas [S. Iwarson, The Natural Course of Chronic Hepatitis, FEMS Microbiology Reviews, 14, págs. 201-204 (1994); D. Lavanchy, Global Surveillance and Control of Hepatitis C, J. Viral Hepatitis, 6, págs. 35-47 (1999)]. Normalmente esto produce una inflamación hepática recurrente que empeora progresivamente, que con frecuencia conduce a patologías más graves tales como cirrosis y carcinoma hepatocelular [M.C. Kew, Hepatitis C and Hepatocellular Carcinoma, FEMSMicrobiology Reviews, 14, págs. 211-220 (1994); I. Saito y col., Hepatitis C Virus Infection is Associated with the Development of Hepatocellular Carcinoma, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, págs. 6547-6549 (1990)]. Desgraciadamente, no existen tratamientos ampliamente eficaces para debilitar el avance del VHC crónico. El genoma del VHC codifica una poliproteína de 3010-3033 aminoácidos [Q.L. Choo, y col., Genetic Organization and Diversity of the Hepatitis C Virus. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, págs. 2451-2455 (1991); N. Kato y col., Molecular Cloning of the Human Hepatitis C Virus Genome From Japanese Patients with Non-A, Non-B Hepatitis, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, págs. 9524-9528 (1990); A. Takamizawa y col., Structure and Organization of the Hepatitis C Virus Genome Isolated From Human Carriers, J. Virol., 65, págs. 1105-1113 (1991)]. Se supone que las proteínas no estructurales (NS) del VHC proporcionan la maquinaria catalítica esencial para la replicación viral. Las proteínas NS derivan por escisión proteolítica de la poliproteína [R. Bartenschlager y col., Nonstructural Protein 3 of the Hepatitis C Virus Encodes a Serine-Type Proteinase Required for Cleavage at the NS3/4 and NS4/5 Junctions, J. Virol., 67, págs. 3835-3844 (1993); A. Grakoui y col., Characterization of the Hepatitis C Virus-Encoded Serine Proteinase: Determination of Proteinase-Dependent Polyprotein Cleavage Sites, J. Virol., 67, págs. 2832-2843 (1993); A. Grakoui y col., Expression and Identification of Hepatitis C Virus Polyprotein Cleavage Products, J. Virol., 67, págs. 1385-1395 (1993); L. Tomei y col., NS3 is a serine protease required for processing of hepatitis C virus polyprotein, J. Virol., 67, págs. 4017-4026 (1993)]. La proteína 3 NS (NS3) del VHC contiene una actividad serina proteasa que ayuda a procesar la mayoría de las enzimas virales y por tanto se considera esencial para la replicación e infectividad viral. Se sabe que mutaciones en la proteasa NS3 del virus de la fiebre amarilla disminuye la infectividad Vidal [Chambers, T.J. y col., Evidence that the N-terminal Domain of Nonstructural Protein NS3 From Yellow Fever Virus is a Serine Protease Responsible for Site-Specific Cleavages in the Viral Polyprotein, Proc. Natl. Acad. Sci. Estados Unidos, 87, págs. 8898-8902 (1990)]. Se ha observado que los primeros 181 amino ácidos de la NS3 (restos 1027-1207 de la poliproteína viral) contienen el dominio serina proteasa de la NS3 que procesa los cuatro sitios aguas abajo de la poliproteína del VHC [C. Lin y col., Hepatitis C Virus NS3 Serine Proteinase: Trans-Cleavage Requirements and Processing Kinetics, J. Virol., 68, págs. 8147-8157 (1994)]. La serina proteasa NS3 del VHC y su cofactor asociado, NS4A, ayuda a procesar todas las enzimas virales y se considera por tanto esencial para la replicación viral. Este procesamiento parece ser análogo al realizado por la aspartil proteasa del virus de la inmunodeficiencia humana, que también está implicado en el procesamiento enzimático viral. Los inhibidores proteasa del VIH, que inhiben el procesamiento de la proteína viral, son poderosos agentes antivirales en el hombre lo cual indica que la interrupción de esta etapa del ciclo de vida viral da como resultado agentes terapéuticamente activos. Por consiguiente, la serina proteasa NS3 del VHC también es una diana atractiva para el descubrimiento de fármacos. Actualmente no existen tratamientos o agentes satisfactorios contra el VHC. Hasta ahora, la única terapia establecida para enfermedades por el VHC era el tratamiento con interferón. Sin embargo, los interferones tienen 2   efectos secundarios significativos [M. A. Walker y col., Hepatitis C Virus: An Overview of Current Approaches and Progress, DDT, 4, págs. 518-29 (1999); D. Moradpour y col., Current and Evolving Therapies for Hepatitis C, Eur. J. Gastroenterol. Hepatol., 11, págs. 1199-1242 (1999); H. L. A. Janssen y col. Suicide Associated with Alfa- Interferon Therapy for Chronic Viral Hepatitis, J. Hepatol., 21, págs. 241-243 (1994); P.F. Renault y col., Side Effects of Alpha Interferon, Seminars in Liver Disease, 9, págs. 273-277. (1989)] e inducen remisión a largo plazo sólo en un mínima parte (~ 25%) de casos [O. Weiland, Interferon Therapy in Chronic Hepatitis C Virus Infection, FEMS Microbiol. Rev., 14, págs. 279-288 (1994)]. Introducciones recientes de las formas pegiladas del interferón (PEG-INTRON® y PEGASYS®) y la terapia de combinación de ribavirina e interferón pegilado (REBETROL®) han dado como resultado solo mejoras leves en cuanto a tasas de remisión y solo reducciones parciales en cuanto a efectos secundarios. Además, las expectativas para obtener vacunas eficaces contra el VHC siguen siendo inciertas. Por tanto, existe una necesidad de terapias más eficaces contra el VHC. Dichos inhibidores tendrían potencial terapéutico como inhibidores de proteasa, particularmente como inhibidores de serina proteasa y más particularmente como inhibidores de proteasa NS3 del VHC. Específicamente, dichos compuestos pueden ser útiles como agentes antivirales, particularmente como agentes contra el VHC. El documento WO 02/48172 A2 describe algunos compuestos diaril amida como inhibidores de serina proteasa NS3 del virus de la hepatitis C. El documento WO 00/09543 A2 describe tripéptidos inhibidores de la hepatitis C. El documento WO 00/59929 A se refiere a péptidos macrocíclicos activos contra el virus de la hepatitis C. Sumario de la invención La presente invención se refiere a compuestos como se describen específicamente a continuación. En algunos aspectos, la invención se caracteriza por una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la presente invención o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable en una cantidad eficaz para inhibir una serina proteasa; y un excipiente, adyuvante o vehículo aceptable. La composición puede incluir un agente adicional seleccionado de un agente inmunomodulador; un agente antiviral; un segundo inhibidor de proteasa del VHC; un inhibidor de otra diana en el ciclo de vida del VHC; y un inhibidor del citocromo P-450 o combinaciones de los mismos. Los agentes inmunomoduladores son -, ß-, o -interferón o timosina; dicho agente antiviral es ribavirina, amantadina o telbivudina; o dicho inhibidor de otra diana en el ciclo de vida del VHC es un inhibidor de helicasa, de polimerasa o de metaloproteasa del VHC. El inhibidor del citocromo P-450 puede ser ritonavir. En otros aspectos, un procedimiento para inhibir la actividad de una serina proteasa in vitro comprende la etapa de poner en contacto dicha serina proteasa con un compuesto de la presente invención. La serina proteasa puede ser una proteasa... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto seleccionado entre el grupo que consiste en 361   362   363   364     366   367   368   369     371   372   373   374     376   377   378   379     381   382   383   384     386   387   388   389     391   392   393   394     396   397   398   399     401   402   403   404     406   407   408   409     411   412   413   414     416   417   418   419     421   422   423   424     426   427   428   429     431   432   433   434     436   437   438   439     441   442   443   444     446   447   448   449     451   452   453   454     456   457   458   459     461   462   463   464     466   467   468   469     471   472   473   474     476   477   478   479     481   482   483   484     486   487   488   489     491   492   493   494     496   497   498   499     501   502   503   504     506   507   508   509     511   512   513   514     516   517   518   519     521   522   523   524     526   527   528   529     531   532   533   534     536   537   538   539     541   542   543   544     546   547   548   549     551   552   553   554     556   557   558   2. Un procedimiento para inhibir in vitro la actividad de la proteasa NS3 del VHC que comprende la etapa de poner en contacto dicha serina proteasa con un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1. 3. El uso de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en la fabricación de un medicamento para tratar a un paciente de una infección causada por el VHC. 4. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, que adicionalmente comprende administrar a dicho paciente un agente adicional seleccionado de un agente inmunomodulador; un agente antiviral; un segundo inhibidor de proteasa del VHC; un inhibidor de otra diana en el ciclo de vida del VHC; o combinaciones de los mismos; administrándose dicho agente adicional a dicho paciente en la misma forma de dosificación que el inhibidor de serina proteasa o en una forma de dosificación separada. 5. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el dicho agente inmunomodulador es -, ß- o -interferón o timosina; dicho agente antiviral es ribavirina o amantadina; o dicho inhibidor de otra diana en el ciclo de vida del VHC es un inhibidor de helicasa, de polimerasa o de metaloproteasa del VHC. 6. Un procedimiento para eliminar o reducir in vitro, de una muestra biológica o de instrumental médico o de laboratorio, una contaminación por el VHC que comprende la etapa de poner en contacto dicha muestra biológica o dicho instrumental médico o de laboratorio, con un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1. 559