ESCISION DE ARN UTILIZANDO RIBONUCLEASA P EUCARIOTICA Y UNA SECUENCIA GUIA EXTERNA.

HA SIDO DESCUBIERTO QUE CUALQUIER RNA PUEDE SER TERMINADO POR DESDOBLAMIENTO DE RNAASA P A PARTIR DE CELULAS EUCARIOTICAS,

POR EJEMPLO, CELULAS HELA HUMANAS, USANDO UN OLIGORIBONUCLEOTIDO ADECUADAMENTE DISEÑADO ("SECUENCIA DE GUIA EXTERNA, O EGS) PARA FORMAR UN HIBRIDO CON EL RNA DE DESTINO, POR LO QUE SE CREA UN SUSTRATO PARA DESDOBLAMIENTO POR RNAASA P IN VITRO. HAY DOS CLASES DE EGS QUE PUEDEN TERMINAR RNA POR DESDOBLAMIENTO POR RNAASA HUMANO. ESTAS SE PREPARAN POR TRANSCRIPCION DE UN PEQUEÑO FRAGMENTO DE DNA QUE CONTIENE UNA SECUENCIA QUE CODIFICA UN RNA QUE PUEDE ASUMIR UNA ESTRUCTURA SECUNDARIA TIPO TRNA. EN LAS PRIMERAS CLASES, LA ESTRUCTURA CARECE AL MENOS DE LOS PRIMEROS TRECE NUCLEOTIDOS DESDE EL TERMINO 5' DE LA SECUENCIA TIPO TRNA, LOS TALLOS Y LAZOS ANTICODON, EL BUCLE VARIABLE O PARTE DEL BUCLE VARIABLE. LA EGS MAS EFICIENTE CON RNAASA P HUMANA ES EL EGS EN EL QUE EL TALLO Y BUCLE ANTICODON HAN SIDO BORRADOS. EN LA SEGUNDA CLASE, EL EGS TIENE CAMBIOS EN AMBOS EL EQUIVALENTE DEL BUCLE T Y EL TALLO ANTICODON DEL SEGMENTO TIPO TRNA DEL EGS. TAMBIEN SE DESCRIBEN METODOS PARA SELECCIONAR ALEATORIAMENTE Y PARA EXPRESAR UN EGS ADECUADO, EN VIVO, PARA HACER UNA OBTENCION DE RNA SELECCIONADO POR DESDOBLAMIENTO DE LA CELULA ANFITRION RNAASA P, EVITANDO ASI LA EXPRESION DE LA FUNCION DEL RNA DE OBJETIVO. LOS METODOS Y COMPOSICIONES DEBEN SER USADOS PARA PREVENIR LA EXPRESION DE GENES QUE CAUSEN ENFERMEDAD EN VIVO.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: YALE UNIVERSITY.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 451 COLLEGE STREET,NEW HAVEN, CT 06511.

Inventor/es: ALTMAN, SIDNEY, GUERRIER-TAKADA, CECILIA, L., YUAN, YAN.

Fecha de Publicación: 16 de Diciembre de 1996.

Fecha Solicitud PCT: 28 de Abril de 1993.

Fecha Concesión Europea: 17 de Julio de 1996.

Clasificación Internacional de Patentes:

A61K31/70 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 31/00 Preparaciones medicinales que contienen ingredientes orgánicos activos. › Hidratos de carbono; Azúcares; Sus derivados (sorbitol A61K 31/047).
C12N15/11 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Fragmentos de ADN o de ARN; sus formas modificadas (ADN o ARN no empleado en tecnología de recombinación C07H 21/00).
C12N9/00 C12N […] › Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas.
C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Mónaco, Irlanda, Oficina Europea de Patentes, Australia, Canadá, Japón.

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