Ensayo de flujo lateral multiplanar con compresor de muestras.

Un dispositivo de flujo lateral para detectar un analito en una muestra,

que comprende:

un compresor de muestras que comprende una almohadilla compresible;

un elemento de hisopo para la recogida de la muestra;

una tira reactiva cromatográfica de flujo lateral que comprende una zona de aplicación de la muestra y una zona de prueba lateralmente aguas abajo de la zona de aplicación de la muestra;

un conjugado que comprende un primer socio de unión para el analito y un marcador;

un segundo socio de unión para el analito;

un primer socio de unión de control ubicado sobre la almohadilla compresible del compresor de muestras; y comprendiendo además la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral una zona de control que comprende un segundo socio de unión de control inmovilizado en la zona de control, en donde el primer socio de unión de control es un socio de unión para el segundo socio de unión de control;

en donde el compresor de muestras, el elemento de hisopo y la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral forman una pila vertical para aplicar la muestra a la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral por compresión; y en donde el elemento de hisopo está ubicado entre el compresor de muestras y la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral en la pila vertical.

Ensayo de flujo lateral multiplanar con compresor de muestras Antecedentes de la invención Campo de la invención

La invención se refiere al campo de pruebas de diagnóstico analítico inmediato. Más particularmente, la invención se refiere a ensayos de flujo lateral.

Descripción de la técnica relacionada

Los ensayos de flujo lateral son un subconjunto de ensayos que combinan diversos reactivos y etapas del proceso en una tira reactiva, proporcionando de este modo un medio sensible y rápido para la detección de moléculas diana. Inmunoensayos de flujo lateral a base de anticuerpos están disponibles para una amplia gama de analitos diana y pueden diseñarse para principios de prueba en sándwich o competitiva. Generalmente, los analitos con elevado peso molecular con varios epítopos se analizan en formato sándwich mientras que las moléculas pequeñas que representan solamente un epítopo se detectan por medio de un ensayo competitivo. Las primeras pruebas se realzaron para gonadotropina coriónica humana (hCG). Hoy existen pruebas disponibles en el mercado para monitorizar la ovulación, detectar organismos de enfermedades infecciosas, analizar drogas, y medir otros analitos importantes para la fisiología humana. También se han presentado productos para pruebas veterinarias, pruebas medioambientales y monitorización de productos.

En la técnica anterior, el receptor marcado móvil (también conocido como el rastreador o el conjugado de prueba en el presente documento) en estos ensayos está seco sobre la tira, contenido en una solución eluyente externa (de modo que pueda mezclarse previamente con la muestra antes de la aplicación sobre la tira reactiva), o es parte de los medios de elución.

La publicación de patente europea EP582231, publicada el 9 de febrero de 1994, titulada "SOLID PHASE ASSAY", desvela un ensayo con un soporte sólido poroso con una primera parte que contacta con una muestra que puede incluir un analito de interés. La muestra fluye a través del soporte sólido y el analito, si está presente, se combina con un rastreador, que está unido de forma reversible sobre el soporte sólido. La muestra y el rastreador inicialmente se desplazan en una dirección perpendicular a la primera parte (por ejemplo verticalmente) mediante flujo por capilaridad. El rastreador y el analito siguen desplazándose a continuación mediante flujo por capilaridad a través del material hasta una segunda parte que incluye un aglutinante inmovilizado, que se une al analito en un inmunoensayo de formato en sándwich. El desplazamiento hasta la segunda parte se produce en una dirección perpendicular a la dirección en la que el rastreador y la muestra se desplazan inicialmente (por ejemplo lateralmente). Todo el desplazamiento de la muestra y el rastreador se produce debido al flujo por capilaridad a través del dispositivo. Aunque el desplazamiento se produce vertical y lateralmente, existe una única trayectoria de flujo. La muestra, el rastreador y el aglutinante inmovilizado están, todos, en la misma trayectoria de flujo.

La publicación de patente de Estados Unidos N2 27/22471, publicada el 27 de septiembre de 27, titulada "COMBINATION VERTICAL AND LATERAL FLOW IMMUNOASSAY DEVICE", desvela dispositivos de inmunoensayo, kits y métodos para determinar la presencia o ausencia de un analito en una muestra de líquido usando una combinación de flujo vertical y flujo lateral. El dispositivo incluye una almohadilla rastreadora con un receptor marcado que está verticalmente yuxtapuesto con un medio de soporte del aglutinante. El dispositivo desvelado en esta publicación es multi-seccionado pero, similar al documento EP582231, solamente tiene una única trayectoria de flujo. La muestra, el receptor marcado, y el medio de soporte del aglutinante están todos en la misma trayectoria de flujo.

La patente de Estados Unidos N2 4.963.325, expedida el 16 de octubre de 199, titulada "SWAB EXPRESSOR IMMUNOASSAY DEVICE", desvela un dispositivo envasado previamente, desechable compuesto por un miembro de soporte alargado con estructura parta soportar y colocar un hisopo. Otro miembro de soporte está montado de forma articulada en un extremo del miembro de soporte del hisopo y porta un conjunto de elementos de medios de captura. El dispositivo también incluye un miembro de cubierta con estructura situada para presionar la punta del hisopo contra el elemento de captura.

La publicación de patente de Estados Unidos N2 25/175992, publicada el 11 de agosto de 25, titulada "METHOD FOR THE RAPID DIAGNOSIS OF TARGETS IN HUMAN BODY FLUIDS", desvela un método para la detección de una diana, donde una muestra de fluido corporal se recoge con un elemento de hisopo.

La patente de Estados Unidos N2 5.824.268, expedida el 2 de octubre de 1998, titulada "RAPID SELF-CONTAINED ASSAY FORMAT", desvela una tira reactiva, dispositivos y métodos para detectar un analito. La tira reactiva tiene una zona de reacción revestida con una sustancia que se une al analito, una zona de la muestra para añadir la muestra, y una zona de la región de detección con una región revestida con reactivo de detección. La tira reactiva

está incorporada en un dispositivo que incluye un dispositivo de recogida de muestras, una carcasa y un recipiente que contiene soluciones disolventes en ambos extremos externos de la tira reactiva.

La patente de Estados Unidos N2 5.985.675, expedida el 16 de noviembre de 1999, titulada "TEST DEVICE FOR DETECTION OF AN ANALYTE", desvela un dispositivo de prueba que incluye una carcasa y una tira reactiva de flujo lateral para la detección de un analito (por ejemplo beta-lactama en la leche). La carcasa es alargada, tiene forma de cepillo de dientes, es transparente y de plástico, y tiene una cavidad de expansión, que aloja material absorbente expandido en la tira reactiva.

Sumario de la invención

En un primer aspecto, la presente invención proporciona un dispositivo de flujo lateral de acuerdo con la reivindicación 1. En un segundo aspecto, la presente invención proporciona un método de aplicación de una muestra a una tira reactiva cromatográfica de flujo lateral de un dispositivo de flujo lateral de acuerdo con la reivindicación 1.

Un compresor de muestras, tal como se define en las reivindicaciones, aplica presión a un colector de muestras en la zona de aplicación de la muestra de una tira reactiva para transferir una muestra sobre el colector de muestras y un socio de unión de un analito a la zona de aplicación de la muestra en un dispositivo de flujo lateral. Al menos uno de los socios de unión del analito no está ubicado sobre la tira reactiva o en la solución de elución antes del uso del dispositivo de flujo lateral. La tira reactiva puede ser una tira reactiva universal sin ninguna molécula que se une específicamente al analito sobre la tira reactiva. El compresor de muestras, tal como se define en las reivindicaciones, puede ser un compresor de muestras universal sin ninguna molécula que se une específicamente al analito sobre el compresor de muestras pero contiene un primer socio de unión de control. El dispositivo de flujo lateral también puede incluir un elemento de intensificación, donde el elemento de intensificación se une al sándwich del analito para incrementar una señal de detección en la zona de prueba.

En una realización de la presente divulgación, el dispositivo de flujo lateral para detectar un analito incluye un compresor de muestras, un colector de muestras con una parte de recogida de muestras, una tira reactiva con una zona de aplicación de la muestra y una zona de prueba, un conjugado que incluye un primer socio de unión para el analito y un marcador, y un segundo socio de unión para el analito. El conjugado o el segundo socio de unión o tanto el conjugado como el segundo socio de unión no están ubicados sobre la tira reactiva antes del uso del dispositivo de flujo lateral. El compresor de muestras, el colector de muestras y la tira reactiva forman una pila vertical para aplicar la muestra a la tira reactiva por compresión. El compresor de muestras, preferentemente, tiene una almohadilla/superficie afelpada con el conjugado y/o el segundo socio de unión estando ubicados sobre la almohadilla antes del uso del dispositivo de flujo lateral. En algunas realizaciones, el dispositivo de flujo lateral incluye un primer socio de unión de control ubicado sobre la almohadilla del compresor de muestras y un segundo socio de unión de control inmovilizado en una zona de control de la tira reactiva, donde el primer socio de unión de control es un socio de unión para el segundo socio de unión de control. El dispositivo de flujo lateral está formado, preferentemente, de modo que un resultado positivo se consigue solamente mediante aislamiento del analito... [Seguir leyendo]

1. Un dispositivo de flujo lateral para detectar un analito en una muestra, que comprende:

un compresor de muestras que comprende una almohadilla compresible; un elemento de hisopo para la recogida de la muestra;

una tira reactiva cromatográfica de flujo lateral que comprende una zona de aplicación de la muestra y una zona de prueba lateralmente aguas abajo de la zona de aplicación de la muestra; un conjugado que comprende un primer socio de unión para el analito y un marcador; un segundo socio de unión para el analito;

un primer socio de unión de control ubicado sobre la almohadilla compresible del compresor de muestras; y comprendiendo además la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral una zona de control que comprende un segundo socio de unión de control inmovilizado en la zona de control, en donde el primer socio de unión de control es un socio de unión para el segundo socio de unión de control;

en donde el compresor de muestras, el elemento de hisopo y la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral forman una pila vertical para aplicar la muestra a la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral por compresión; y en donde el elemento de hisopo está ubicado entre el compresor de muestras y la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral en la pila vertical.

2. El dispositivo de flujo lateral de la reivindicación 1, en el que el conjugado, el segundo socio de unión o tanto el conjugado como el segundo socio de unión están ubicados sobre la almohadilla compresible del compresor de muestras antes del uso del dispositivo de flujo lateral.

3. El dispositivo de flujo lateral de la reivindicación 2, en el que el conjugado está ubicado sobre la almohadilla compresible y el segundo socio de unión está ubicado sobre un medio externo.

4. El dispositivo de flujo lateral de la reivindicación 2, en el que el segundo socio de unión está ubicado sobre la almohadilla compresible y el conjugado está ubicado sobre un medio externo.

5. El dispositivo de flujo lateral de la reivindicación 1, en donde el dispositivo de flujo lateral está formado de modo que un resultado positivo se consigue solamente mediante la captura del analito en la zona de prueba a través de la formación de un complejo entre el analito, el primer socio de unión y el segundo socio de unión.

6. El dispositivo de flujo lateral de la reivindicación 1, en el que la zona de prueba no comprende ninguna molécula que se une específicamente al analito.

7. El dispositivo de flujo lateral de la reivindicación 1, en el que el segundo socio de unión comprende una marca y la zona de prueba comprende un socio de unión inmovilizado de la marca.

8. El dispositivo de flujo lateral de la reivindicación 1, que comprende además una carcasa que rodea a al menos una parte de la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral, en el que una parte giratoria de la carcasa forma el compresor de muestras.

9. El dispositivo de flujo lateral de la reivindicación 1, que comprende además una carcasa que rodea a al menos una parte de la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral, en el que un cartucho insertable forma el compresor de muestras.

1. Un método de aplicación de una muestra a una tira reactiva cromatográfica de flujo lateral de un dispositivo de flujo lateral, comprendiendo el método las etapas de:

a) colocar un elemento de hisopo que incluye una muestra recogida en una pila vertical entre un compresor de muestras que comprende una almohadilla compresible y una zona de aplicación de la muestra de la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral; y

b) aplicar una presión al elemento de hisopo usando el compresor de muestras para transferir al menos una parte de la muestra recogida a la zona de aplicación de la muestra;

en el que un primer socio de unión de control está ubicado sobre la almohadilla compresible del compresor de muestras; y

en el que una zona de control sobre la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral comprende un segundo socio de unión de control inmovilizado en la zona de control, en donde el primer socio de unión de control es un socio de unión para el segundo socio de unión de control.

11. El método de la reivindicación 1, en el que la almohadilla compresible del compresor de muestras comprende, además, un componente seleccionado entre el grupo constituido por un primer socio de unión para el analito, un segundo socio de unión para el analito y tanto el primer socio de unión para el analito como el segundo socio de unión para el analito.

12. El método de la reivindicación 1, en el que el elemento de hisopo suministra la muestra de forma pasiva por contacto o a través de presión sobre la tira reactiva cromatográfica de flujo lateral antes de aplicar el compresor de muestras a la pila vertical.

13. El método de la reivindicación 1, en el que la etapa a) comprende, además, colocar una almohadilla con un

socio de unión para un analito sobre la pila vertical y en el que, en la etapa b), al menos una parte del socio de unión es transferida a la zona de aplicación de la muestra.

14. El método de la reivindicación 1, en el que la etapa b) se produce sin flujo por capilaridad.