DETECCION DE DIFERENCIAS EN ACIDOS NUCLEICOS MEDIANTE LA INHIBICION DE LA MIGRACION ESPONTANEA DE LA RAMIFICACION DE ADN.

Un procedimiento para detectar la presencia de una diferencia entre una secuencia de ácido nucleico diana y una secuencia de ácido nucleico de referencia,

que comprende: (a) la amplificación de la secuencia de ácido nucleico diana mediante la reacción en cadena de la polimerasa, usando un cebador P2, un cebador P4 con una región 3'' capaz de hibridarse a la secuencia diana y una región T en la cola 5'' que no es complementaria a la secuencia diana, y un cebador P5 que es capaz de hibridarse a la secuencia diana en una localización en dirección 3'' de la secuencia capaz de hibridarse a dicha fracción 3'' del cebador P4; en el que bien: el cebador P2 es una mezcla del cebador P2 con un primer marcador y el cebador P2 con un segundo marcador, o bien el cebador P4 tiene un primer marcador y el cebador P5 tiene un segundo marcador; (b) la formación de un dúplex parcial diana con cola de la secuencia diana, dicho dúplex parcial que tiene uno de dicho primer marcador o dicho segundo marcador, y una cola de dos regiones no complementarias en la que una primera región es la secuencia P5 o su complemento y la segunda región es la secuencia T o su complemento; (c) la amplificación de la secuencia de referencia mediante la reacción en cadena de la polimerasa, usando un cebador P2, un cebador P4 con una región 3'' capaz de hibridarse a la secuencia de referencia y una región T en la cola 5'' que no es complementaria a la secuencia de referencia, y un cebador P5 que es capaz de hibridarse a la secuencia de referencia sustancialmente adyacente, en dirección 3'', a la secuencia capaz de hibridarse a dicha fracción 3'' del cebador P4.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: DADE BEHRING INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1717 DEERFIELD ROAD,DEERFIELD, ILLINOIS 60015.

Inventor/es: KURN, NURITH, LISHANSKI, ALLA, TAYLOR, MARC.

Fecha de Publicación: .

Fecha Concesión Europea: 7 de Marzo de 2007.

Clasificación PCT:

  • C12N15/09 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
  • C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
  • G01N33/53 FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
  • G01N33/566 G01N 33/00 […] › utilizando un soporte específico o proteínas receptoras como reactivos para la formación de uniones por ligando.
  • G01N33/58 G01N 33/00 […] › en los que intervienen sustancias marcadas (G01N 33/53 tiene prioridad).
DETECCION DE DIFERENCIAS EN ACIDOS NUCLEICOS MEDIANTE LA INHIBICION DE LA MIGRACION ESPONTANEA DE LA RAMIFICACION DE ADN.

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