Procedimientos para la preparación de plasminógeno.

Procedimiento para la preparación de plasminógeno, comprendiendo el procedimiento:

(a) expresar un plasminógeno recombinante utilizando un sistema de expresión recombinante en condiciones de expresión suficientes para producir un cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante;

(b) poner en contacto el cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante con un tampón de solubilización en condiciones de solubilización suficientes para obtener un cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante solubilizado;

(c) poner en contacto el cuerpo de inclusión de plasminógeno recombinante solubilizado con una solución de replegamiento en condiciones de replegamiento para obtener una composición que comprende el plasminógeno recombinante, en el que se añade PEG o sulfato de amonio a la solución de replegamiento en condiciones de precipitación, en el que la solución de replegamiento comprende el plasminógeno y polipéptidos agregados, en el que el plasminógeno es plasminógeno replegado, en el que las condiciones de precipitación son suficientes para precipitar todas o una parte sustancial de las proteínas agregadas;

(d) diafiltrar la composición después de la etapa (c);

(e) poner en contacto la composición con un medio de intercambio catiónico en condiciones de intercambio iónico que son suficientes para que el medio de intercambio catiónico se una al plasminógeno recombinante;

(f) eluir el plasminógeno recombinante capturado por el medio de intercambio catiónico para obtener un eluato del medio de intercambio catiónico que comprende el plasminógeno recombinante;

(g) poner en contacto el eluato del medio de intercambio catiónico con un primer medio de afinidad en una primera condición de afinidad que es suficiente para que el primer medio de afinidad se una al plasminógeno recombinante; y

(h) eluir el plasminógeno recombinante al que se unió por el primer medio de afinidad para obtener una solución de plasminógeno que comprende el plasminógeno recombinante.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2010/025898.

Solicitante: Grifols Therapeutics Inc.

Inventor/es: ZIMMERMAN, THOMAS P., MILLER,CHARLES, KOEPF,EDWARD, LINDSAY,MYLES, SILVERSTEIN,REBECCA, HUNT,JENNIFER A, REBBEOR,JAMES, CARONNA,ANTHONY, STOKES,KENYA.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/57 (que actúan sobre los enlaces peptídicos (3.4))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones... > C12N9/50 (Proteinasas)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas... > Procedimientos generales de preparación de péptidos > C07K1/18 (Cromatografía de intercambio iónico)

PDF original: ES-2552337_T3.pdf

 

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