CONSTRUCCION DIRIGIDA DE ORIENTACION DE PLASMIDOS.
Un método para la construcción dirigida de orientación de una construcción comprende al menos dos segmentos de ácidos nucleicos de interés,
comprendiendo dicho método las etapas de:
a. proporcionar productos que tienen extremos ramos fosforilados obtenidos de dichos segmentos de ácidos nucleicos de interés;
b. realizar reacciones de ligamiento por separado, donde en cada reacción los productos de extremos romos fosforilados de dos segmentos diferentes obtenidos en la etapa (a) se ligan para crear una secuencia ligada combinada;
c. realizar una reacción de amplificación por PCR usando dicha secuencia ligada combinada obtenida en la etapa (b) como molde y cebadores de enriquecimiento específico dirigiendo dicha amplificación de PCR hacia la orientación deseada, donde cada secuencia ligada combinada se amplifica en una reacción por separado creando un producto combinado que tiene extremos romos fosforilados;
d. aislar y purificar dicho producto combinado que tiene la orientación deseada enriquecida obtenida en la etapa (c);
e. opcionalmente, la repetición cíclica de las etapas (b) a (d) para una cantidad deseada de veces, para crear un producto combinado aislado que tiene la orientación deseada; y
f. realizar el autoligamiento de dicho producto combinado purificado aislado obtenido en la etapa (e), creando una construcción de ADN de doble cadena circular que contiene los segmentos deseados alineados apropiadamente y unidos de manera operativa.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: GENE BIO-APPLICATION LTD.
Nacionalidad solicitante: Israel.
Dirección: P.O. BOX 206,KFAR HANAGID 76875.
Inventor/es: BEN-ASOULI, YITZHAK, OSMAN, FARHAT.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 11 de Febrero de 2002.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/10 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
- C12N15/66 C12N 15/00 […] › Métodos generales para insertar un gen en un vector para formar un vector recombinante, utilizando la escisión y la unión; Utilización de "linkers" no funcionales o de adaptadores, p. ej. "linkers" que contienen la secuencia para una endonucleasa de restricción.
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Oficina Europea de Patentes, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania, Armenia, Azerbayán, Bielorusia, Ghana, Gambia, Kenya, Kirguistán, Kazajstán, Lesotho, República del Moldova, Malawi, Mozambique, Federación de Rusia, Sudán, Sierra Leona, Tayikistán, Turkmenistán, República Unida de Tanzania, Uganda, Zimbabwe, Burkina Faso, Benin, República Centroafricana, Congo, Costa de Marfil, Camerún, Gabón, Guinea, Malí, Mauritania, Niger, Senegal, Chad, Togo, Zambia, Organización Regional Africana de la Propiedad Industrial, Swazilandia, Guinea-Bissau, Guinea Ecuatorial, Organización Africana de la Propiedad Intelectual, Organización Eurasiática de Patentes.
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