Compuestos inmunomoduladores quiméricos y métodos de uso de los mismos.

Un compuesto inmunomodulador quimérico (CIQ) que comprende tres o más restos de ácido nucleico y uno o más restos espaciadores distintos de ácido nucleico

, en el que el CIQ comprende una estructura central con la fórmula:

[Nv]x---Sp en la que Sp es un espaciador multivalente unido de manera covalente a X restos de ácido nucleico seleccionados independientemente, Nv, y en la que X es al menos 3,

en el que dicho espaciador no es un polipéptido,

en el que al menos un resto de ácido nucleico comprende la secuencia 5'-TCG-3',

en el que dicho CIQ tiene actividad inmunomoduladora.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E11182593.

Solicitante: DYNAVAX TECHNOLOGIES CORPORATION.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 2929 SEVENTH STREET, SUITE 100 BERKELEY, CA 94710 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: DINA, DINO, FEARON,KAREN,L, TUCK,STEPHEN F.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS;... > C07H21/00 (Compuestos que contienen al menos dos unidades mononucleótido que tienen cada una grupos fosfato o polifosfato distintos unidos a los radicales sacárido de los grupos nucleósido, p. ej. ácidos nucleicos)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/09 (Tecnología del ADN recombinante)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS... > Procesos de medida, investigación o análisis en... > C12Q1/68 (en los que intervienen ácidos nucleicos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales caracterizadas por los... > A61K47/48 (estando el ingrediente no activo químicamente unido al ingrediente activo, p. ej. conjugados polímero-medicamento)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/63 (Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS;... > Compuestos que contienen al menos dos unidades mononucleótido... > C07H21/02 (con ribosilo como radical sacárido)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS;... > Compuestos que contienen al menos dos unidades mononucleótido... > C07H21/04 (con desoxirribosilo como radical sacárido)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Medicamentos para el tratamiento de trastornos del... > A61P11/06 (Antiasmáticos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > A61P31/00 (Antiinfecciosos, es decir antibióticos, antisépticos, quimioterápicos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Antiinfecciosos, es decir antibióticos, antisépticos,... > A61P31/12 (Antivirales)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Medicamentos para el tratamiento de problemas inmunológicos... > A61P37/08 (Agentes antialérgicos (agentes antiasmáticos A61P 11/06; antialérgicos oftálmicos A61P 27/14))
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Medicamentos para el tratamiento de problemas inmunológicos... > A61P37/02 (Inmunomoduladores)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen ingredientes... > A61K31/711 (Acidos desoxirribonucleicos naturales, es decir conteniendo unicamente 2'-desoxirribosas unidas a la adenina, la guanina, la citosina o la timina y teniendo enlaces 3'-5' fosfodiester)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen ingredientes... > A61K31/7088 (Compuestos que tienen al menos tres nucleósidos o nucleótidos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales caracterizadas por los... > A61K47/34 (Compuestos macromoleculares obtenidos por reacciones distintas a aquellas en las que intervienen solamente enlaces insaturados carbono-carbono)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN... > Preparación de compuestos que contienen radicales... > C12P19/34 (Polinucleótidos, p. ej. ácidos nucleicos, oligorribonucleótidos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales caracterizadas por los... > A61K47/36 (Polisacáridos; Sus derivados)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > AGRICULTURA; SILVICULTURA; CRIA; CAZA; CAPTURA; PESCA > CONSERVACION DE CUERPOS HUMANOS O ANIMALES O DE VEGETALES... > Biocidas, productos que atraen o repelen a los animales... > A01N43/04 (con un heteroátomo)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen antígenos... > A61K39/29 (Virus de la hepatitis)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Enzimas fijadas sobre un soporte o inmovilizadas;... > C12N11/06 (unidas al soporte por medio de un agente de puenteo)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS;... > Compuestos que contienen radicales hidrocarbonados... > C07H15/18 (Radicales acíclicos sustituidos por ciclos carbocíclicos)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/117 (Acidos nucleicos que tienen propiedades inmunomoduladoras, p.ej. que contienen motivos CpG)

PDF original: ES-2487645_T3.pdf

 

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Fragmento de la descripción:

Compuestos ¡nmunomoduladores quiméricos y métodos de uso de los mismos Campo técnico

La presente invención se refiere a compuestos ¡nmunomoduladores quiméricos ("CIQs") que contienen restos de ácido nucleico y restos distintos de ácido nucleico, y al uso de tales compuestos para modular una respuesta inmunitaria. La invención tiene utilidad en los campos de la biomedicina y la inmunología.

Antecedentes

La referencia a una publicación en esta sección no se debería considerar una indicación de que la publicación sea la técnica anterior para la presente invención.

El tipo de respuesta inmunitaria generada por una infección u otra exposición antigénica se puede distinguir en general por el subgrupo de células T cooperadoras (Th) implicadas en la respuesta. El subgrupo Th1 es responsable de las funciones clásicas mediadas por células, tales como la hipersensibilidad de tipo retardado y la activación de los linfocitos T citotóxicos (CTLs), mientras que las funciones del subgrupo Th2 son más eficaces como auxiliares para la activación de las células B. El tipo de respuesta inmunitaria hacia un antígeno está influido en general por las citocinas, producidas por las células que responden al antígeno. Se cree que las diferencias en las citocinas secretadas por las células Th1 y Th2 reflejan diferentes funciones biológicas de estos dos subgrupos. Véase, por ejemplo, Romagnani (2000) Ann. Allergy Asthma Immunol. 85:9-18.

El subgrupo Th1 puede ser particularmente adecuado para responder a las infecciones virales, a los patógenos intracelulares y a las células tumorales, porque secreta IL-2 e IFN-y, que activan los CTLs. El subgrupo Th2 puede ser más adecuado para responder a las bacterias que viven libremente y a los parásitos helmínticos, y puede mediar en reacciones alérgicas, ya que se sabe que IL-4 e IL-5 inducen la producción de IgE y la activación de eosinófilos, respectivamente. En general, las células Th1 y Th2 secretan patrones diferentes de citocinas, y así, un tipo de respuesta puede moderar la actividad del otro tipo de respuesta. Un desplazamiento en el equilibrio de Th1/Th2 puede dar como resultado una respuesta alérgica, por ejemplo, o, de manera alternativa, una respuesta incrementada de CTLs.

Se ha reconocido durante cierto tiempo que se puede inducir una respuesta inmunitaria de tipo Th1 en mamíferos mediante la administración de ciertos polinucleótidos ¡nmunomoduladores. Los polinucleótidos ¡nmunomoduladores incluyen secuencias denominadas secuencias inmunoestimuladoras ("ISS"), que incluyen a menudo un dinucleótido CG. Véanse, p.ej., las publicaciones PCT WO 98/55495, WO 97/28259, las pat. de EE.UU. N°s 6.194.388 y 6.207.646; Krieg ef al. (1995) Nature 374:546-49 y Krieg, Antisense Oligonucleotide Technology, (1998), 431-448. Para numerosas enfermedades infecciosas, tales como la tuberculosis y la malaria, las respuestas de tipo Th2 tienen poco valor protector contra la infección. Las vacunas basadas en proteínas inducen en general respuestas inmunitarias de tipo Th2, caracterizadas por títulos elevados de anticuerpos neutralizantes, pero sin una inmunidad significativa mediada por células. Además, algunos tipos de respuestas de anticuerpos son inadecuadas en ciertas indicaciones, muy notablemente en la alergia, en la que una respuesta de anticuerpos IgE puede dar como resultado un choque anafiláctico.

Los documentos WO 01/83503, WO 02/26757 y WO 01/12804 describen métodos para incrementar el efecto inmunoestimulador de oligonucleótidos que contienen CpG mediante la introducción de carbohidratos o bases modificadas en 2' o 3', mediante la introducción de uniones internucleosídicas modificadas, mediante la introducción de análogos de dinucleótidos o mediante la introducción de un nucleósido sustituido en 2'.

En vista de la necesidad de métodos mejorados de inmunoterapia, existe la necesidad de identificación de compuestos útiles para la modulación de una respuesta inmunitaria.

Descripción de la invención

En un aspecto, la invención se dirige a un compuesto quimérico que tiene actividad inmunomoduladora. El compuesto inmunomodulador quimérico ("CIQ") comprende en general tres o más restos de ácido nucleico y uno o más restos distintos de ácido nucleico. Los restos de ácido nucleico de un CIQ pueden ser iguales o diferentes. Los restos distintos de ácido nucleico de un CIQ con más de un resto distinto de ácido nucleico pueden ser iguales o diferentes. Así, en una realización, el CIQ comprende tres o más restos de ácido nucleico y uno o más restos espaciadores distintos de ácido nucleico, en el que al menos un resto espaciador distinto de ácido nucleico está unido de manera covalente a tres restos de ácido nucleico. Al menos un resto de ácido nucleico comprende la secuencia 5'-TCG-3'.

Así, la presente invención proporciona un compuesto inmunomodulador quimérico (CIQ) que comprende tres o más restos de ácido nucleico y uno o más restos espaciadores distintos de ácido nucleico,

en el que el CIQ comprende una estructura central con la fórmula:

[Nv]xSp en la que Sp es un espaciador multivalente unido de manera covalente a X restos de ácido nucleico seleccionados independientemente, Nv, y en la que X es al menos 3,

en el que dicho espaciador no es un polipéptido,

en el que al menos un resto de ácido nucleico comprende la secuencia 5'-TCG-3', en el que dicho CIQ tiene actividad inmunomoduladora.

En un aspecto, la invención proporciona un CIQ que tiene una estructura central con la fórmula [NV]ASp, en la que Sp es un espaciador multivalente unido de manera covalente a la cantidad "A" de restos de ácido nucleico seleccionados independientemente, Nv, en la que A es al menos 3, y en la que el CIQ exhibe actividad inmunomoduladora. En una realización, el CIQ tiene la secuencia central [Sv-Nv]aSp en la que Sp es un espaciador multivalente unido de manera covalente a la cantidad "A" de elementos [Sv-Nv] seleccionados independientemente, y el elemento [Sv-Nv] seleccionado independientemente incluye un resto espaciador unido de manera covalente a un resto de ácido nucleico, y en la que A es al menos 3. En una realización, A es de 3 a 50. En una realización diferente, A es mayor de 50. En una realización, al menos 2, al menos 3 o al menos 4 restos de ácido nucleico del CIQ tienen secuencias diferentes.

En un aspecto, el CIQ comprende una estructura central con la fórmula [Nv]a-Sp o [Sv-Nv]a-Sp (en la que Sp es un espaciador multivalente unido de manera covalente a la cantidad "A" de restos de ácido nucleico seleccionados independientemente, Nv, o elementos [Sv-Nv] seleccionados independientemente, y cada elemento [SyNv] seleccionado independientemente comprende un resto espaciador unido de manera covalente a un resto de ácido nucleico, en la que A es al menos 3. En ciertas realizaciones, A es de 3 a alrededor de 50 o de alrededor de 50 a alrededor de 500. En una realización, Sp comprende un dendrímero. En una realización, un resto de ácido nucleico del CIQ tiene una secuencia seleccionada de TCGXXXX, TCGAXXX, XTCGXXX, XTCGAXX, TCGTCGA, TCGACGT, TCGAACG, TCGAGAT, TCGACTC, TCGAGCG, TCGATTT, TCGCTTT, TCGGTTT, TCGTTTT, TCGTCGT, ATCGATT, TTCGTTT, TTCGATT, ACGTTCG, AACGTTC, TGACGTT, TGTCGTT, TCGXXX, TCGAXX, TCGTCG, AACGTT, ATCGAT, GTCGTT, GACGTT, TCGXX, TCGAX, TCGAT, TCGTT, TCGTC, TCGA, TCGT, TCGX, o TCG (en las que "X" es cualquier nucleótido).

El CIQ puede comprender restos espaciadores no nucleotídicos que comprenden, por ejemplo, trietilen glicol, hexaetilen glicol, un polímero que comprende restos de oligoetilen glicol unidos mediante enlaces fosfodiéster y/o fosforotloato, alquilo C2-C10 (p.ej., propilo, butilo, hexilo), glicerol o un glicerol modificado (p.ej., glicerol derivatizado en... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Un compuesto ¡nmunomodulador quimérico (CIQ) que comprende tres o más restos de ácido nucleico y uno o más restos espaciadores distintos de ácido nucleico, en el que el CIQ comprende una estructura central con la fórmula:

[Nv]xSp en la que Sp es un espaciador multivalente unido de manera covalente a X restos de ácido nucleico seleccionados independientemente, Nv, y en la que X es al menos 3,

en el que dicho espaciador no es un polipéptido,

en el que al menos un resto de ácido nucleico comprende la secuencia 5'-TCG-3', en el que dicho CIQ tiene actividad inmunomoduladora.

2. El CIQ de la reivindicación 1, en el que el resto de ácido nucleico comprende la secuencia 5'-TCG-3' en la posición 5 prima.

3. El CIQ de la reivindicación 1 ó 2, en el que el CIQ tiene al menos una actividad inmunomoduladora seleccionada del grupo que consiste en:

(a) la capacidad de estimular la producción de IFN-gamma por las células mononucleares de sangre periférica humana;

(b) la capacidad de estimular la producción de IFN-alfa por las células mononucleares de sangre periférica humana;

(c) la capacidad de estimular la proliferación de células B.

4. El CIQ de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el CIQ comprende al menos 1, al menos 2, al menos 3, al menos 4 o al menos 5 extremos 5' libres, al menos alrededor de 50 o al menos alrededor de 100 extremos 5' libres.

5. El CIQ de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que X es de 3 a alrededor de 50, o en el que X es de alrededor de 50 a alrededor de 500.

6. El CIQ de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que Sp comprende un dendrímero, un polisacárido, un pollsacárldo retlculado, glicerol, o pentaeritritol.

7. El CIQ de cualquier reivindicación previa que comprende un resto espaciador no nucleotfdico que comprende oligoetilen glicol, glicerol, un alquilo C2-C10, un nucleótido abásico, pentaeritritol, 1,3-diamino-2-propanol, 2- (hidroximetil)etllo, un pollsacárldo, o un dendrímero y/o en el que el espaciador no nucleotfdico comprende una subunidad HEG.

8. El CIQ de la reivindicación 1, que comprende una primera subunidad espaciadora que comprende un dendrímero, un polisacárido, glicerol, pentaeritritol, o 2-(hidroximetil) etilo y que comprende además al menos una subunidad HEG, en la que dicha subunidad HEG está unida de manera covalente a la primera subunidad espaciadora y a un resto de ácido nucleico.

9. El CIQ de cualquier reivindicación previa, en el que:

al menos un resto de ácido nucleico comprende la secuencia:

5'-[(X)o-2]TCG[(X)2-4]-3' en la que cada X es un nucleótido seleccionado independientemente; o 5'-TCG[(X)2-4]-3' en la que cada X es un nucleótido seleccionado independientemente;

o 5'-TCGA-3';

o al menos un resto de ácido nucleico tiene la secuencia 5'-TCG[(X)2.4]-3'o 5'-TCG(A/T)[(X)i-3]-3' en la que cada X es un nucleótido seleccionado independientemente;

o al menos un resto de ácido nucleico tiene la secuencia 5'-TCGACGT-3' o 5'-TCGTCGA-3';

o todos los restos de ácido nucleico del CIC tienen una secuencia de fórmula 5'-TCG[(X)2.4]-3' o TCG(A/T)[(X)i-3]-3' en la que cada X es un nucleótido seleccionado independientemente; o

un resto de ácido nucleico comprende una secuencia seleccionada de (todos 5'<-3'):

TCGXXXX, TCGAXXX, XTCGXXX, XTCGAXX, TCGACGT, TCGAACG, TCGAGAT, TCGACTC, TCGAGCG, TCGATTT, TCGCTTT, TCGGTTT, TCGTTTT, TCGTCGT, ATCGATT, TTCGTTT, TTCGATT, ACGTTCG, AACGTTC, TGACGTT, TGTCGTT, TCGXXX, TCGAXX, GTCGTT, GACGTT, ATCGAT, TCGTCG; TCGTTT;

TCGAGA; TTCGAG; TTCGTT; AACGTT; AACGTTCG; AACGUTCG, ABGUTCG, TCGXX, TCGAX, TCGAT, TCGTT, TCGTC; TCGA, TCGT, y TCGX (en las que X es A, T, G o C; U es 2'-desox¡ur¡d¡na y B es 5-bromo-2'- desoxicitidina).

10. El CIQ de cualquier reivindicación previa, en el que las uniones entre los nucleótidos de los restos de ácido nucleico se seleccionan de uniones fosfodiéster y uniones de áster de fosforotioato, y/o las uniones entre los nucleótidos de los restos de ácido nucleico, los restos de ácido nucleico y restos espaciadores, y entre subunidades de restos espaciadores son fosfodiéster y/o áster de fosforotioato.

11. Un CIQ según la reivindicación 1, en el que el CIQ tiene la estructura (TCGTCGA-HEG-TCGTCGA)2-glicerol- TCGTCGA.

12. Una composición que comprende un CIQ según cualquier reivindicación precedente y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

13. Una composición que comprende un CIQ según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 y un antígeno.

14. Una composición según la reivindicación 13, en la que el antígeno es de un agente infeccioso, un alérgeno, o es un antígeno tumoral.

15. Una composición según la reivindicación 13 ó 14, en la que el CIQ y el antígeno están en proximidad espacial mediante conjugación, encapsulación, por medio de la fijación a una plataforma o adsorción sobre una superficie, o en la que el CIQ y el antígeno están en una mezcla.

16. Un CIQ de las reivindicaciones 1 a 11 o una composición de las reivindicaciones 12 a 15 para el uso en la modulación de una respuesta inmunitaria en un individuo.

17. Un CIQ de las reivindicaciones 1 a 11 o una composición de las reivindicaciones 12 a 15 para el uso para Incrementar el interferón-gamma (IFN-y) en un individuo; incrementar el interferón-alfa (IFN-a) en un individuo; incrementar los anticuerpos asociados a Th1 específicos de el/los antígeno(s) de la vacuna, mejorar un síntoma de una enfermedad infecciosa en un individuo; mejorar un trastorno relacionado con IgE en un individuo; o tratar el cáncer.

18. Un CIQ de las reivindicaciones 1 a 11 o una composición según las reivindicaciones 12 a 15 para el uso como una composición de vacuna en el tratamiento o la profilaxis de la alergia, una enfermedad infecciosa o el cáncer.

**(Ver fórmula)**

och3

la-g

**(Ver fórmula)**

la: R = (CH2CH20)5-CH2CH2 Ib: R = CCH2>3

le: R = (CH2CH20)2-CH2CH2 Id: R = CH2CH(CH2OH) le: R = (CH2)4

lf: R= 1',2'-didesoxirribosa lg: R = (CH2)6

FIGURA 1

125

DMTO

O

DMTO..ODMT

DMTO

DMTO

O

DMTO

**(Ver fórmula)**

DMT = 4,4'-dimetoxitritilo Lev = Levulinilo

DMTO

DMTO

**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**

FIGURA 3A

127

H2NCH2CH2NHC(0)CH2CH2. /CH2CH2C(0)NHCH2CH2NH2

xnch2ch2n

H2NCH2CH2NHC(0)CH2CH2 / XCH2C1H2C(0)NHCH2CH2NH2

á

fy°

yN

vL

DNA-S

rV

O'

Y

sulfo-SMCC

trietilamina

DMF

W^A_C(0)HNCH2CH2NHC(0)CH2CH2^

NCH2CH2Nv

C(0)HNCH2CH2NHC(0)CH2CH2"

0aO

N

CH2CH2C(0)NHCH2CH2NHC(0) ^CH2CH2C(0)NHCH2CH2NHC(0)

HS(CH2)6-0-P(0)(S)-0-5'-TCGTCGA-3'.(5)

(HS-DNA).

S-DNA

NCH2CH2Nn

C(0)HNCH2CH2NHC(0)CH2CH2'

__ p

.CHzCHzCÍOjNHCHsCHzNHCÍO)-^^-/

'CH2CH2C(0)NHCH2CH2NHC(0)

o

o

DNA-S

**(Ver fórmula)**

FIGURA 4

129

Inducción de Genes en Pulmón de Ratón mediante ISS P-6, CIQ C-9 o CIQ C-23

IL-la

d*

c

o

o

o>

&

zn

rt>

o

d*

O

o

n

o

0

Ai

**(Ver fórmula)**

TNF-a

**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**

MDC

**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**

MIG

**(Ver fórmula)**

IFN-y

**(Ver fórmula)**

IL-12p40

**(Ver fórmula)**

MCP-1

**(Ver fórmula)**

MIP-3a

**(Ver fórmula)**

IFN-a

**(Ver fórmula)**

70

0

G-CSF

**(Ver fórmula)**

MCP-3

**(Ver fórmula)**

P-6

**(Ver fórmula)**

C-9

C-23

130

Citocinas In vivo de Ratón IL-12 p40

Todas las dosis de ISS/CIQ 20 jj.g

14000

**(Ver fórmula)**

LPS C-9 C-23 P'D

FIGURA 6A

P-l P-6 P-7 PBS

05

Citocinas In vivo de Ratón

TNFa

FIGURA 6B

Todas las dosis de ISS/CIQ 20 gg

**(Ver fórmula)**

IL-6

co

hO

Citocinas In vivo de Ratón

IL-6

FIGURA 6C

Todas las dosis de ISS/CIQ 20 gg

**(Ver fórmula)** **(Ver fórmula)**

Figura 7A

**(Ver fórmula)**

Figura 7B