Un compuesto de la fórmula (I):

Composiciones para tratamiento de mastocitosis sistémica.

Campo de la invención

La presente invención se relaciona con el uso de inhibidores de tirosina cinasa para la preparación de un fármaco para el tratamiento de mastocitosis sistémica. La presente invención también se relaciona con una combinación para uso en el tratamiento de mastocitosis sistémica.

Antecedente de la invención

La mastocitosis sistémica (SM) se puede clasificar en SM inactiva (poca o ninguna evidencia de función de órgano deteriorada), SM activa (presencia de función de órgano deteriorada), enfermedades hematológicas de células diferentes a mastocitos asociadas con SM (SM-AHNMD) y leucemia de mastocitos. La presentación clínica en adultos de la SM es heterogénea e incluye enfermedad de la piel (usualmente urticaria pigmentosa), síntomas de liberación de mediador de mastocito (cefalea, sofoco, mareo leve, síncope, anafilaxis, etc.), y daño de órgano directo o indirecto (dolor óseo a partir de lesiones óseas líticas, osteoporosis o fracturas óseas, hepatosplenomegalia, citopenia de afectación de la médula ósea). Adicionalmente, alrededor del 20% de los pacientes con SM pueden presentar eosinofilia sanguínea significativa y algunas veces aislada (Tefferi and Pardanani 2004).

En general, la leucemia de mastocitos es una enfermedad terminal con supervivencia medida en meses y sin terapia efectiva a la fecha. La historia natural del la SM inactiva es mucho mejor con la supervivencia media medida en décadas y la progresión no frecuente a SM-AHNMD y SM activa. El resultado en SM-AHNMD se determina por el AHNMD asociado y es significativamente peor que el de la SM sin AHNMD. En ambas SM inactiva y activa sin AHNMD, se incrementan los mastocitos de médula ósea y el contenido de eosinofilos, se eleva la fosfatasa alcalina en el suero, la anemia, y se ha asociado la hepatosplenomegalía con pronóstico pobre (Tefferi nad Pardanani 2004). Se han logrado remisiones clínicas e histológicas completas en pacientes con SM asociada con la fusión de gen FIP1L1-PDGFRa cuando se trata con Gleevec® (Pardanani 2003a, Pardanani 2003b).

La WO 2005/049032 describe el uso de midostaurina, valatinib y nilotinib como única terapia para el tratamiento de una enfermedad dependiente de KIT y en particular una enfermedad dependiente de KIT que es resistente a tratamiento con imatinib.

Resumen de la invención

Varios conceptos emergentes de tratamiento para neoplasmas mieloides se basan en los fármacos novedosos que objetivan las cinasas tirosina (TK) críticas o las moléculas de señalización en la dirección.^1-5 La mastocitosis sistémica (SM) es un neoplasma hematopoiético que se comporta como una enfermedad mieloproliferativa inactiva en la mayoría de pacientes, pero también se puede presentar como una enfermedad activa (SM activa se denomina aquí como "ASM") o aún como una leucemia, por ejemplo, leucemia de mastocitos (denominada aquí como "MCL").^6-11 En pacientes con ASM y MCL, la respuesta a terapia convencional es pobre en la mayoría de casos, y el pronóstico es grave.^6-12 Por lo tanto, se ha realizado un número de intentos para identificar los objetivos novedosos de la terapia en mastocitos neoplásicos (MC) y para definir nuevas estrategias de tratamiento para estos pacientes.^9-12

En la mayoría de todos los pacientes con SM que incluyen aquellos que se diagnostican por tener ASM o MCL, la mutación de punto D816V c- KIT somática (Asp816Val) es detectable en células neoplásicas (mastocitos).^13-17 Esta mutación de punto se asocia con fosforilación independiente de ligando y activación de KIT, y diferenciación autónoma y proliferación de las células afectadas.^17,18 En base a esta asociación con actividad de cinasa tirosina (TK), la variante mutada D816V de KIT es un objetivo atractivo de terapia.^9-12,19

Se han realizado un número de esfuerzos en años recientes para identificar los fármacos adecuados que podrían inhibir la actividad de TK de KIT D816V.^9-12,19-24 Se ha encontrado recientemente que el inhibidor de TK imatinib (STI571) que es ampliamente utilizado en la hematología clínica, contrarresta con la proliferación de MC neoplásicos que exhiben el KIT natural (wt) o la variante mutada F522C de KIT que ocurre raramente.^20-23 Adicionalmente, se encuentra que este fármaco bloquea la proliferación de células neoplásicas en pacientes que tienen SM asociada con eosinofilia clónica y un gen de fusión FIP1L1/PDGFRA (SM con leucemia eosinófila crónica asociada, denominada aquí como "SM-CEL").^24-26 Sin embargo, el imatinib falla al inhibir la proliferación de MC neoplásicos alojando la mutación c-KIT D816V^20-22 que apunta a la necesidad clara de búsqueda adicional de inhibidores de TK novedosos que bloqueen el KIT D816V y así la proliferación de MC neoplásicos MC en SM.

Los fármacos que objetivan TK novedosos PKC412 y AMN 107 contraactúan con la actividad de TK de D816V-KIT y e inhiben la proliferación de MC humanos neoplásicos y células Ba/F3 con expresión de KIT-D816V inducible por doxiciclina, la proliferación de mastocitos neoplásicos primarios, y proliferación de estirpe HMC-1MLC humana, que aloja esta mutación c-KIT. Se encuentra que el PKC412 es un fármaco superior con valores IC₅₀ de 50-250 nM y sin diferencias observadas entre las células HMC-1 exhibiting o lacking KIT-D816V. En contraste, el AMN 107 exhibe efectos más potentes en células negativas HMC-1 KIT-D816V. Se obtienen los resultados correspondientes con células Ba/F3 que exhiben KIT natural o mutado D816V. Los efectos inhibidores de crecimiento de PKC412 y AMN107 en HMC-1 se asocian con inducción de apoptosis y regulación por descenso de CD2 y CD63. Se encuentra que el PKC412 coopera con AMN107, imatinib, y cladribina (es decir, 2CdA) en la producción de la inhibición de crecimiento en HMC-1. También mostramos que el PKC412 hace sinergia con AMN 107 y cladribina (2CdA) en la producción de inhibición de crecimiento en células HMC-1. Juntos, el PKC412 y el AMN107 representan agentes novedosos prometedores para objetivar terapia de SM.

Esta invención se dirige a un tratamiento de combinación de PKC412 y AMN 107 que es efectivo contra SM, especialmente SM asociada con la mutación c-KIT D816V oncogénica. Esta invención también se dirige a un tratamiento de combinación de PKC412 y un inhibidor de TK que es efectivo contra SM, especialmente mastocitosis sistémica (SM) que incluye SM activa (ASM) y leucemia de mastocitos (MCL). En una realización preferida, el SM, ASM y MCL se asocian con la mutación c-KIT oncogénica, que incluyen especialmente D816V.

Breve descripción de las figuras

La Figura 1A-D es una representación de los efectos de los inhibidores TK sobre la fosforilación KIT en células neoplásicas. FIG. 1A,B: Fosforilación KIT en células HMC-1.1 (FIG. 1A) y células HMC-1.2 (que exhiben KIT D816V; FIG. 1B) después de incubación en medio de control (Control), imatinib STI571 (1 µM), PKC412 (1 µM), o AMN107 (1 µM) durante 4 horas. FIG. 1C,D: fosforilación KIT en células Ton.Kit.wt (FIG. 1C) y células Ton.Kit.D816V.27 (FIG. 1D) después de incubación en medio de control (Control), imatinib (es decir, STI571) (1 µM), PKC412 (1 µM), o AMN 107 (1 µM) durante 4 horas. Antes de exposición a fármaco, las células Ton.Kit.wt y células Ton.Kit.D816V.27 se mantienen en doxiciclina, 1 µg/ml durante 24 horas para inducir la expresión de KIT. En el caso del clon Ton.Kit.wt, las células también se exponen a SCF (100 ng/ml, 4 horas) para inducir fosforilación KIT (p- KIT). En todas las células, la inmunoprecipitación se conduce utilizando el anti-KIT mAb SR-1. La inmunotransferencia Western se desarrolla utilizando anti-fosfo-mAb 4G 10 para detección p-KIT y el anti-KIT mAb 1C1 para detección de proteína KIT total.

La Figura 2A-D es una representación gráfica de los efectos de PKC412, AMN107, e imatinib sobre la proliferación de células HMC-1. FIG. 2A: Efectos que dependen del tiempo de PKC412 en captación de ³H- timidina en células HMC-1.2. Las células HMC-1.2 se incuban con medio de control o PKC412 (300 nM) a 37ºC y 5% de CO₂ durante varios periodos según se indica. Después de incubación, se analiza la captación de ³H- timidina. Los resultados se expresan como porcentaje de control (es decir, captación de ³H- timidina en medio de control en cada punto de tiempo) y representan la media pm D.E. de triplicados. La FIG. 2B-D: Efectos dependientes de dosis...

1. Un compuesto de la fórmula (I):

en combinación con un compuesto de la fórmula (II):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento o prevención de mastocitosis sistémica.

2. La combinación para uso en el tratamiento o prevención de mastocitosis sistémica de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la mastocitosis sistémica tiene resistencia a imatinib.

3. La combinación para uso en el tratamiento o prevención de mastocitosis sistémica de acuerdo con la reivindicación 1 en donde la mastocitosis sistémica se asocia con la mutación KIT-D816V oncogénica.

4. Uso de un compuesto de la fórmula (I):

en combinación con un compuesto de la fórmula (II):

o sales farmacéuticamente aceptables del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de mastocitosis sistémica.

5. El uso de acuerdo con la reivindicación 4 en donde la mastocitosis sistémica se asocia con la mutación KIT-D816V oncogénica.

6. El uso de acuerdo con la reivindicación 5 en donde la mastocitosis sistémica tiene resistencia a imatinib.