Composiciones que inducen resistencia a enfermedades de plantas y procedimiento para producir las mismas.

Un método para inducir resistencia a enfermedades en una planta diana,

que comprende la etapa de tratarla planta diana con una composición que comprende un glicoesfingolípido y una sustancia liposolubleobtenible mediante una etapa en la que se extraen junto con un disolvente orgánico que es acetato de etilodel hongo filamentoso, y luego concentrar el extracto obtenido mediante la extracción con el disolventeorgánico del hongo filamentoso y luego precipitar y eliminar sustancias que tienen actividad fisiológicamenteinhibidora contra plantas,

en el que dicho hongo filamentoso es un microorganismo que pertenece a basidiomicetos o unmicroorganismo para producción por fermentación que pertenece a un género seleccionado del grupo queconsiste en género Aspergillus, género Penicillium, género Trichoderma, género Acremoniuym, géneroMucor y género Rhizopus, y

en el que dicho glicoesfingolípido es un cerebrósido que es uno cualquiera de cerebrósido A, cerebrósido B,cerebrósido C y cerebrósido D o una mezcla de los mismos.

Composiciones que inducen resistencia a enfermedades de plantas y procedimiento para producir las mismas La presente invención se refiere a un método para inducir resistencia a enfermedades en una planta diana, que usa micelios o cuerpos fructíferos de hongos filamentosos como material de partida. El método usado es respetuoso con el medio ambiente y es seguro para usuarios y consumidores.

Los métodos de control de enfermedades convencionales principales para productos agrícolas incluyen un método en el que se usa un pesticida químico tal como un fungicida o un agente de inhibición de la invasión, y un método en el que se usa un pesticida de microorganismos tal como microorganismos antagonistas o un organismo tal como un organismo enemigo natural.

En la mayoría de pesticidas químicos, las enfermedades se controlan mediante acción directa sobre hongos patógenos de plantas. Además de los pesticidas químicos, se usan pesticidas de tipo inducción de resistencia en los que se controlan enfermedades de cultivos potenciando la resistencia a enfermedades que tienen las plantas per se.

Los pesticidas, en la mayoría de casos, muestran una acción definitiva sobre los hongos patógenos de plantas. El uso continuo de estos pesticidas, en muchos casos, da como resultado la aparición de mutantes resistentes a los pesticidas. Por otro lado, los pesticidas de tipo inducción de resistencia controlan la infección de la enfermedad mediante la inducción de la resistencia de las plantas en vez de la acción directamente sobre los hongos patógenos de plantas. En virtud de este mecanismo, para los pesticidas de tipo inducción de resistencia, hasta ahora, no existe ningún informe sobre la aparición de mutantes resistentes. Por tanto, se considera que la influencia de los pesticidas de tipo inducción de resistencia sobre el medio ambiente incluyendo otros organismos es relativamente pequeña.

En la producción agrícola, se ha exigido el establecimiento de técnicas de producción agrícola sostenibles. Para cumplir esta exigencia, el desarrollo de materiales agrícolas respetuosos con el medio ambiente es una tarea importante.

Además, en los últimos años una exigencia creciente del consumidor de alimentos más seguros ha conducido a un aumento de una exigencia cada vez mayor de productos agrícolas orgánicos que se han cultivado aprovechando la función de ciclos naturales de la agricultura. Según las directrices publicadas por el Ministerio de Agricultura, Silvicultura y Pesca de Japón, los materiales utilizables en la producción de productos agrícolas orgánicos se limitan a materiales minerales útiles que se producen de manera natural, plantas, animales y sustancias naturales que se han eliminado, extraído o preparado a partir de los mismos. Cuando se desea el uso de los mismos como pesticidas, por ejemplo, para el control de enfermedades y plagas de insectos, únicamente pueden usarse pesticidas registrados basados en la Ley de Regulación de Productos Químicos Agrícolas, y no deben usarse antibióticos.

Por tanto, materiales de control utilizables en la producción de productos agrícolas orgánicos son limitados. Por tanto, se han deseado agentes de control de enfermedades altamente eficaces derivados de sustancias que se producen de manera natural como alternativa a los pesticidas químicos convencionales. El suministro de materiales agrícolas, que tienen los efectos de control de enfermedades de tipo inducción de resistencia anteriores, es decir, que pueden controlar de manera profiláctica enfermedades y se derivan de materiales que se producen de manera natural, podría producir pesticidas que son seguros para productores agrícolas así como usuarios y consumidores y, al mismo tiempo, puede reducir la carga medioambiental.

Hasta ahora, los pesticidas destinados a la inducción de resistencia a enfermedades de plantas se han limitado a “Or y zemate” (nombre genérico: probenazol, fabricado por Meiji Seika Kaisha Co., Ltd.) y “Bion” (nombre genérico: acibenzolar-S-metilo, fabricado por Novartis) que están registrados como agentes de control del añublo del arroz.

Se notifican inductores de fitoalexina tales como productos de descomposición de polisacáridos (publicación de patente japonesa abierta a consulta por el público n.º 331016/1993) y derivados de ácido jasmónico (publicación de patente japonesa abierta a consulta por el público n.º 29412/1999) como otras sustancias que inducen resistencia a enfermedades.

En los pesticidas anteriores para fines de inducción de resistencia a enfermedades, se proporciona un efecto de control contra diversas enfermedades de cultivos induciendo la resistencia de las plantas en vez de la acción directamente sobre hongos patógenos de plantas. Por tanto, hasta ahora, no existe ningún informe sobre la aparición de mutantes resistentes a estos pesticidas. Todos estos, sin embargo, son pesticidas sintetizados químicamente y por tanto no se adaptan a las directrices. Además, debe indicarse que, aunque los inductores de fitoalexina anteriores inducen la producción de fitoalexinas que es una reacción de resistencia a enfermedades de plantas, no existe ninguna descripción clara sobre un efecto de control de enfermedades práctico en las publicaciones anteriores.

Asimismo, se sabe que cerebrósidos que se ha notificado que son inductores de fitoalexina tienen un efecto de control sobre un nivel utilizable de manera práctica contra enfermedades del arroz (patente japonesa n.º 2846610 y documento WO 98/47364) . Los cerebrósidos son una clase de glicoesfingolípidos y son glicolípidos en los que está unida una hexosa al alcohol primario de ceramidas a través de enlace glicosídico. Los glicoesfingolípidos están presentes universalmente como constituyentes de membranas en diversas especies de organismos y ya se han usado como componentes cosméticos altamente seguros. Se ha considerado que los glicoesfingolípidos que tienen actividad de inducción de resistencia a enfermedades se clasifican como cerebrósidos (Koga J. et al. (1998) J. Biol. Chem. 48 (27) , 31985-31991) . Se sabe que el cerebrósido B está distribuido en Penicillium funiculosum (Kawai G., Ikeda Y., Tubaki K. (1985) Agric. Biol. Chem. 49 (7) , 2137-2146) , Lentinus edodes (Kawai G (1989) Biochim. Biophys. Acta 1001 (2) 185-190) , Pachybasium sp. (Sitrin R. et al. (1988) J. Antibiot. 41 (4) , 469-480) y Rhizoctonia sp. (Umemura K. et al. Plant Cell Physiology 41 (6) , 676-683) . El cerebrósido B tiene una estructura representada mediante la fórmula (I) :

El cerebrósido B se da a conocer como agente de control de enfermedades del arroz en el documento WO 98/47364. El agente de control dado a conocer en esta patente es uno extraído de hongos patógenos de plantas. Además, debe indicarse que, hasta ahora, no existe ninguna notificación sobre el efecto de control de enfermedades de cerebrósido B y otros cerebrósidos contra productos agrícolas distintos de arroz.

Con respecto a la distribución de cerebrósidos en basidiomicetos, se sabe que los cerebrósidos están contenidos en un extracto etanólico de un cuerpo fructífero de seta Shiitake sin tratar (Lentinus edodes) (Kawai G (1989) Biochim. Biophys. Acta 1001 (2) 185-190) y pueden extraerse cerebrósidos con acetona a partir de un micelio cultivado de Schizophyllum commune Fr. (publicación de patente japonesa nº 52878/1988) . Sin embargo, la actividad de las sustancias descritas en las publicaciones anteriores es una actividad inductora de cuerpos fructíferos, y no se describe en las mismas ningún efecto de control contra enfermedades de plantas.

Con respecto a la utilización de extractos de basidiomicetos en labores de cultivo, por ejemplo, la publicación de patente japonesa nº 44040/1981 describe la utilización de los extractos para aumentar el rendimiento de productos agrícolas o para fines de promoción del crecimiento, y la publicación de patente japonesa n.º 48087/1982 describe la utilización de los extractos para la promoción de la pigmentación y la potenciación del contenido en azúcar en cítricos. Todas estas acciones, sin embargo, las muestran extractos acuosos.

En general, se sabe que la actividad de sustancias que inducen resistencia a enfermedades varía dependiendo de la especie de planta. Los glucanos, que son polímeros de glucosa, se conocen como ejemplos representativos de sustancias inductoras de resistencia derivadas de microorganismos que se han notificado hasta la fecha. Los glucanos que inducen la resistencia a enfermedades de soja no inducen ninguna reacción de resistencia en plantas de arroz. Por otro lado, los glucanos, que inducen la resistencia a enfermedades de plantas de arroz, no tienen ninguna capacidad de inducción de resistencia... [Seguir leyendo]

1. Un método para inducir resistencia a enfermedades en una planta diana, que comprende la etapa de tratar la planta diana con una composición que comprende un glicoesfingolípido y una sustancia liposoluble obtenible mediante una etapa en la que se extraen junto con un disolvente orgánico que es acetato de etilo del hongo filamentoso, y luego concentrar el extracto obtenido mediante la extracción con el disolvente orgánico del hongo filamentoso y luego precipitar y eliminar sustancias que tienen actividad fisiológicamente inhibidora contra plantas,

en el que dicho hongo filamentoso es un microorganismo que pertenece a basidiomicetos o un microorganismo para producción por fermentación que pertenece a un género seleccionado del grupo que consiste en género Aspergillus, género Penicillium, género Trichoderma, género Acremoniuym, género Mucor y género Rhizopus, y

en el que dicho glicoesfingolípido es un cerebrósido que es uno cualquiera de cerebrósido A, cerebrósido B, cerebrósido C y cerebrósido D o una mezcla de los mismos.

2. El método según la reivindicación 1, en el que dicho esfingolípido comprende cerebrósido B.

3. El método según la reivindicación 2, en el que el contenido de cerebrósido B es de 0, 4 a 3, 0 mg/ml y el contenido de la sustancia liposoluble es de 10 a 200 mg/ml en cuanto a un extracto de n-hexano.

4. El método según la reivindicación 2, en el que el contenido de cerebrósido B es de 0, 9 a 3, 0 mg/ml y el contenido de la sustancia liposoluble es de 30 a 100 mg/ml en cuanto a un extracto de n-hexano.

5. El método según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicho microorganismo que pertenece a basidiomicetos es un microorganismo que pertenece a basidiomicetos comestibles o un microorganismo que pertenece a basidiomicetos de uso médico.

6. El método según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicho microorganismo para producción por fermentación es uno para la producción de enzima, la producción de antibióticos y la producción de sacáridos.

7. El método según la reivindicación 5, en el que el microorganismo que pertenece a los basidiomicetos comestibles pertenece a un género seleccionado del grupo que consiste en género Pleurotus, género Lentinus, género Flammulina, género Grifola, género Agaricus, género Auricularia, género Trameliales, género Pholiota y género Sparassidaceae.

8. El método según la reivindicación 5, en el que dicho microorganismo que pertenece a los basidiomicetos de uso médico es un microorganismo que pertenece al género Wolfiporis o género Ganoderma.

9. El método según la reivindicación 5, en el que dicho microorganismo que pertenece a los basidiomicetos se selecciona del grupo que consiste en Lentinus edodes, Pleurotus ostreatus, Flammulina velutipes, Grifola frondosa, Agaricus bisporus, Agaricus campestris y Auricularia polytricha.

10. El método según la reivindicación 6, en el que dicho microorganismo para producción por fermentación se selecciona del grupo que consiste en Aspergillus niger, Aspergillus or y zae, Penicillium roquefortii, Mucor prainii y Rhizopus delemar.