COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS DE TOXINA BOTULÍNICA.

ANTECEDENTES La presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas. En particular, la presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden una toxina botulínica y 2-hidroxietilalmidón y a métodos para fabricar las composiciones farmacéuticas. Una composición farmacéutica es una formulación que contiene uno o más ingredientes activos así como uno o más excipientes, estabilizantes o agentes de carga, que es apropiada para la administración a un paciente humano para conseguir un resultado de diagnóstico o efecto terapéutico deseado. Para su estabilidad en el almacenamiento y conveniencia de manejo, una composición farmacéutica se puede formular en forma de polvo liofilizado (es decir criodesecado) o secado a vacío que se puede reconstituir con disolución salina o agua previamente a la administración a un paciente. Alternativamente, la composición farmacéutica se puede formular en forma de una disolución acuosa. Una composición farmacéutica puede contener un ingrediente activo proteínico. Desgraciadamente, las proteínas pueden ser muy difíciles de estabilizar, dando como resultado la pérdida de proteína y/o la pérdida de actividad de la proteína durante la formulación, reconstitución (si se requiere) y durante el almacenamiento previamente al uso de una composición farmacéutica que contiene proteína. Los problemas de estabilidad pueden ocurrir debido a la desnaturalización, degradación, dimerización y/o polimerización de la proteína. Se han usado varios excipientes, tales como albúmina y gelatina con diferentes grados de éxito para tratar de estabilizar un ingrediente activo proteínico presente en una composición farmacéutica. Adicionalmente, se han usado crioprotectores tales como alcoholes para reducir la desnaturalización de la proteína en las condiciones de congelación de la liofilización. Albúmina Las albúminas son pequeñas y abundantes proteínas del plasma. La seroalbúmina humana tiene un peso molecular de alrededor de 69 kilodaltons (kD) y se ha usado como ingrediente no activo en una composición farmacéutica en la que puede servir como vehículo de carga y estabilizante de ciertos ingredientes activos proteínicos presentes en una composición farmacéutica. La función de estabilización de la albúmina en una composición farmacéutica puede estar presente tanto durante la formulación multietapa de la composición farmacéutica como en la posterior reconstitución de la composición farmacéutica formulada. De este modo, se puede impartir estabilidad por medio de la albúmina a un ingrediente activo proteínico en una composición farmacéutica, por ejemplo, (1) reduciendo la adhesión (comúnmente denominada "adhesividad") del ingrediente activo proteínico a las superficies, tales como las superficies del material de vidrio de laboratorio, recipientes, al vial en el que se reconstituye la composición farmacéutica y a la superficie interior de una jeringuilla usada para inyectar la composición farmacéutica. La adhesión de un ingrediente activo proteínico a las superficies puede conducir a la pérdida de ingrediente activo y a la desnaturalización del ingrediente activo proteínico retenido restante, ambas reducen la actividad total del ingrediente activo presente en la composición farmacéutica, y ; (2) reduciendo la desnaturalización del ingrediente activo, que puede ocurrir al preparar una disolución de baja dilución del ingrediente activo. Además de ser capaz de estabilizar un ingrediente activo proteínico en una composición farmacéutica, la albúmina tiene también la ventaja de la inmunogenicidad generalmente negligible cuando se inyecta en un paciente humano. Un compuesto con una inmunogenicidad apreciable puede provocar la producción de anticuerpos contra él, que puede conducir a una reacción anafiláctica y/o al desarrollo de resistencia al fármaco, convirtiéndose la enfermedad o trastorno que se va a tratar en potencialmente refractario a la composición farmacéutica que tiene un componente inmunógeno. Desgraciadamente, a pesar de su conocido efecto estabilizante, existen inconvenientes significativos al uso de albúmina en una composición farmacéutica. Por ejemplo, las albúminas son caras y cada vez más difíciles de obtener. Además, los productos de la sangre tales como la albúmina, cuando se administran a un paciente pueden someter al paciente a un riesgo potencial de recibir agentes patógenos o infecciosos transportados por la sangre. De este modo, se sabe que existe la posibilidad de que la presencia de albúmina en una composición farmacéutica puede dar como resultado la incorporación inadvertida de elementos infecciosos en la composición farmacéutica. Por ejemplo, se ha publicado que el uso de albúmina puede transmitir priones a una composición farmacéutica. Un prión es una partícula infecciosa proteínica que se hipotetiza que surge como una isoforma conformacional anormal de la misma secuencia de ácido nucleico que fabrica la proteína normal. Se ha hipotetizado adicionalmente que la infectividad reside en una "reacción de reclutamiento" de la proteína isoforma normal a la isoforma de proteína priónica a un nivel post-translacional. Aparentemente la proteína celular endógena normal es inducida a doblarse erróneamente en una conformación priónica patógena. Significativamente, se han retirado de la distribución varios lotes de seroalbúmina humana después de una determinación de que a un donante de sangre a un banco de sangre del que se preparó la albúmina le fue diagnosticada la enfermedad de Creutzfeldt-Jacob. 2   La enfermedad de Creutzfeldt-Jacob (a veces caracterizada como enfermedad de Alzheimer de avance rápido) es un raro trastorno neurodegenerativo de encefalopatía espongiforme humana transmisible, en la que el agente transmisible es aparentemente una isoforma anormal de una proteína priónica. Un individuo con la enfermedad de Creutzfeldt-Jacob se puede deteriorar desde una aparente perfecta salud hasta un mutismo aquinético en seis meses. Se ha publicado la posible transmisión iatrogénica de la enfermedad de Creutzfeldt-Jacob por transfusión de albúmina y se ha especulado que no se proporciona suficiente protección contra la transmisión de la enfermedad de Creutzfeldt-Jacob por los métodos usuales de preparación de la albúmina, métodos que incluyen la retirada de los elementos celulares de la sangre y el calentamiento a 60 grados centígrados durante 10 horas. De este modo, puede existir un riesgo potencial de adquirir una enfermedad mediada por un prión, tal como la enfermedad de Creutzfeldt-Jacob, de la administración de una composición farmacéutica que contiene concentrados proteínicos de plasma humano, tal como seroalbúmina. Se ha usado gelatina en algunas composiciones farmacéuticas de ingrediente activo proteínico como substituto de la albúmina. Notablemente, la gelatina es una proteína derivada de animales y por lo tanto supone el mismo riesgo de potencial infectividad que puede poseer la albúmina. Por consiguiente, es deseable encontrar un substituto para la albúmina que no sea una fracción sanguínea, y preferentemente el substituto de la albúmina no sea gelatina y no sea derivado de ninguna fuente animal. Toxina botulínica La bacteria anaeróbica gram positiva Clostridium botulinum produce una potente neurotoxina polipéptido, toxina tobulínica, que causa una enfermedad neuroparalítica en seres humanos y animales denominada botulismo. El Clostridium botulinum y sus esporas se encuentran comúnmente en el suelo y la bacteria puede crecer en recipientes de alimentos inapropiadamente esterilizados y sellados de envases domésticos, que son la causa de muchos de los casos de botulismo. Los efectos del botulismo aparecen típicamente de 18 a 36 horas después de comer los alimentos infectados con un cultivo o esporas de Clostridium botulinum. La toxina botulínica puede pasar aparentemente atenuada a través de las paredes del intestino y atacar a las neuronas motoras periféricas. Los síntomas de la intoxicación por toxina botulínica pueden progresar desde dificultad para caminar, tragar, y hablar hasta la parálisis de los músculos respiratorios y la muerte. La toxina botulínica del tipo A es el agente biológico natural más letal conocido por el hombre. Alrededor de 50 picogramos de toxina botulínica (complejo de neurotoxina purificada) de tipo A es una LD50 en ratones. Interesantemente, en base molar, la toxina botulínica de tipo A es 1,8 billones de veces más letal que la difteria, 600 millones de veces más letal que el cianuro de sodio, 30 millones de veces más letal que la cobrotoxina y 12 millones de veces más letal que el cólera. Singh; Critical Aspects of Bacterial Protein Toxins, páginas 63-84 (capítulo 4) de Natural toxins II, editado por B.R. Singh et al., Plenum Press, New York (1976)... [Seguir leyendo]

1. Una composición farmacéutica que comprende:

(a) una toxina botulínica, y;

(b) 2-hidroxietilalmidón.