Una composición farmacéutica para usar en el tratamiento de una enfermedad causada por virus de la gripe en seres humanos,

conteniendo dicha composición una cantidad terapéutica eficaz o formulación de anticuerpos completos o fragmentos de unión a antígeno de anticuerpos específicos contra la secuencia peptídica del receptor tipo peaje tipo 3 (NH2)FYWNVSVHRVLGFKE(COOH), que activa la respuesta antiviral del hospedador y reduce la gravedad y duración de infecciones víricas

Campo técnico

La presente invención se refiere al tratamiento y prevención de enfermedades causadas por virus de la gripe, incluyendo infecciones por virus de la gripe. Más particularmente, esta invención se refiere a nuevos agentes terapéuticos diseñados para modular la respuesta antiviral del hospedador y reducir la gravedad y duración de las enfermedades causadas por virus de la gripe.

Técnica Antecedente

Existen varias estrategias básicas para combatir infecciones víricas (aparte del tratamiento de los síntomas individuales): (1) vacunación —inducción de inmunidad para prevenir una infección vírica, (2) fijar como objetivo el ciclo de replicación viral con agentes moleculares pequeños o anticuerpos terapéuticos y (3) activación de la respuesta del hospedador (principalmente con el uso de interferones o inductores de interferón) WAGNER, E. K., et al. Basic Virology. 2ª edición. Oxford: Blackwell Publishing, 2004. ISBN 1405103469. págs. 96-116.

Cada una de las estrategias mencionadas tiene ciertas limitaciones o desventajas. La vacunación sólo es conveniente para infecciones que pueden prevenirse con vacunas; la variabilidad natural del patógeno (por ejemplo, virus de la gripe) puede minimizar la eficacia de la vacunación; por último, la vacunación rara vez se asocia con reacciones indeseables. Cada agente terapéutico que se dirige al ciclo de replicación viral es eficaz solamente en una estrecha variedad de afecciones patológicas causadas por patógenos que comparten una diana molecular común; el uso de dichos agentes puede asociarse con el desarrollo de resistencias y/o reacciones indeseables. También es muy importante tener en cuenta que la gravedad y duración de las afecciones causadas por virus dependen de dos grupos de factores: las concentraciones de virus en los órganos diana con su efecto citopático directo correspondiente, unidas al índice de aclaramiento viral por un lado y a lo apropiado de la respuesta inmune adaptativa e innata del hospedador por otro lado. Por lo tanto, incluso una dosis relativamente baja de un virus altamente patógeno puede causar una enfermedad muy grave, siendo la gravedad con frecuencia el resultado de una “tormenta de citocinas” (SZRETTER, K. J., et al. Role of host cytokine responses in the pathogenesis of avian H5N1 influenza viruses in mice. J Virol. 2007, vol. 81, nº 6, págs. 2736-44) causada por una clase de reacción inoportuna de las defensas del hospedador.

Los agentes capaces de activar la respuesta del hospedador (modificadores de la respuesta biológica, inmunomoduladores) parecen ser un grupo prometedor de agentes terapéuticos antivirales con respecto a su modo de acción “natural” e independencia de la causa particular de la infección vírica. Este grupo de agentes terapéuticos puede ejemplificarse mediante interferones (por ejemplo, interferón alfa-2a pegilado), imiquimod (inductor de interferón que actúa como un agonista del receptor tipo peaje 7), tilorona (inductor de interferón activo por vía oral). Sin embargo, todas las preparaciones de interferón conocidas tienen efectos adversos significativos y los inductores de interferón sintéticos tienen problemas de seguridad o biodisponibilidad.

Existen numerosos agentes terapéuticos que comprenden anticuerpos completos o fragmentos de anticuerpo diseñados para el tratamiento de diferentes enfermedades (Brekke OH, Sandlie I. Therapeutic antibodies for human diseases at the dawn of the twenty-first century. Nat Rev Drug Discov. Ene 2003; 2(1): 52-62.). Varios de ellos están diseñados para enfermedades causadas por virus; por ejemplo, en la infección por VIH, se proponen fragmentos de anticuerpo para bloquear la proteína viral gp120 (Danishefsky et al., solicitud de patente de los Estados Unidos 20060229432, publicada el 12 de octubre de 2006); en la infección por virus respiratorio sincitial (RSV) se sabe que anticuerpos monoclonales (palivizumab) se dirigen al RSV, previenen, tratan o mejoran los síntomas asociados con una infección por RSV. Los agentes mencionados están destinados a bloquear/inhibir su molécula diana, y se administran en dosis importantes (de al menos 0,001 mg/kg). Teóricamente, la técnica anterior incluye la administración oral, pero los productos existentes no pueden usarse en formas de dosificación oral debido a la escasa biodisponibilidad proporcionada por esta vía para la medicina basada en proteínas. Formulaciones farmacéuticas por vía oral menos numerosas basadas en anticuerpos o fragmentos de anticuerpo (solicitudes de patente de los Estados Unidos 20060002927 (10513109), 20050136103 (10942300), 20030153022 (10287821), etc.) se dirigen a una molécula dentro del tracto gastrointestinal o a un péptido exógeno bacteriano y se administran en dosis importantes esenciales para conseguir cierta concentración en el tracto gastrointestinal y bloquear su diana.

Aparte de agentes antivirales, la técnica anterior abarca principalmente anticuerpos dirigidos a dianas moleculares que están reguladas positivamente en una afección patológica particular con la intención de disminuir su nivel hasta la normalidad. Otra estrategia general es el uso de anticuerpos o fragmentos de anticuerpo para dirigirse a marcadores que se expresan específicamente por células malignas o de otro modo enfermas. Se conocen en la técnica anterior miméticos (agonistas de receptores) basados en anticuerpos, pero ninguno de ellos se usa en realidad en la práctica. El documento US2006/115475 A1 (Carton Jill M et al) propone el uso de un antagonista de anticuerpo generado contra el dominio extracelular de TLR3 que inhibe la producción celular de citocinas que están reguladas positivamente tras la activación de TLR3, para tratar una afección inflamatoria relacionada con una Además de las estrategias antivirales mencionadas anteriormente y de numerosos agentes terapéuticos sintomáticos para las infecciones víricas, hay varios agentes medicinales homeopáticos registrados para la prevención y tratamiento de infecciones víricas, principalmente gripe y resfriado común. La mayoría de ellos se prescriben individualmente por el médico basándose en los síntomas específicos del paciente, de acuerdo con la tradición homeopática. Sin embargo, varios productos reivindican indicios universales de ser eficaces en infecciones del tracto respiratorio superior. Los más notables de los mismos son Oscillococcinum (comercializado en Francia y varios otros estados de la UE y Norteamérica) y Anaferon (comercializado en Rusia y varios estados vecinos, pero no en la UE). El Oscillococcinum está hecho de corazón e hígado de pato (dilución homeopática K200), el Anaferon está hecho de anticuerpos contra interferón gamma (mezcla de diluciones homeopáticas (RU WO2005000350A (EPSHTEIN OI) 06.01.2005). Aunque los agentes terapéuticos homeopáticos están reconocidos en general como seguros, la eficacia de los productos mencionados continúa siendo incierta, al menos a juzgar por los estudios publicados. Para el Oscillococcinum no hay pruebas de eficacia publicadas en modelos animales de infecciones víricas, y su beneficio clínico al tratamiento de la gripe y del síndrome tipo gripe se considera muy moderado (VICKERS, A. J., et al. Homoeopathic Oscillococcinum for preventing and treating influenza and influenza-like syndromes. Cochrane Database Syst Rev. Jul 2006, vol. 19, nº 3, p.CD001957.). Para el Anaferon, están publicados datos de eficacia en animales (SERGEEV, A. N., et al. [Antiviral activity of oral ultralow doses of antibodies to gamma-interferon: experimental study of influenza infection in mice]. Antibiot Khimioter. 2004, vol. 49, nº 11, p.7-11.; SUSLOPAROV, M. A., et al. [Efficacy of therapeutic and prophylactic actions of ultralow doses of antibodies to gamma-interferon in experimental murine model of herpes virus]. Antibiot Khimioter. 2004, vol. 49, nº 10, págs. 3-6.); los beneficios del producto en ensayos clínicos en seres humanos sólo pueden estimarse a partir de resúmenes de conferencias científicas.

Se propuso una estrategia general para fabricar productos homeopáticos usando “anticuerpos contra un antígeno que actúe como una causa directa de un síndrome patológico o implicado en la regulación de los mecanismos de su formación” (documento EP1295606 A (EPSHTEIN O. I.) 26.03.2003). Pero la solicitud de patente citada no sugiere ninguna pista para elegir una diana molecular particular en una enfermedad particular. Cuando se considera que están implicados cientos de proteínas en la regulación de la defensa del hospedador contra infecciones víricas (incluyendo cada una de las proteínas docenas de epítopos contra los que generar anticuerpos)... [Seguir leyendo]

1. Una composición farmacéutica para usar en el tratamiento de una enfermedad causada por virus de la gripe en seres humanos, conteniendo dicha composición una cantidad terapéutica eficaz o formulación de anticuerpos completos o fragmentos de unión a antígeno de anticuerpos específicos contra la secuencia peptídica del receptor tipo peaje tipo 3 (NH2)FYWNVSVHRVLGFKE(COOH), que activa la respuesta antiviral del hospedador y reduce la gravedad y duración de infecciones víricas.

2. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 1, para su uso como un medicamento destinado a administración enteral incluyendo administración oral, y a administración parenteral incluyendo administración sublingual.

3. La composición farmacéutica de la reivindicación 1, en la que los fragmentos de anticuerpo son Fab, fragmentos F(ab)2 o monómeros de anticuerpo que contienen una cadena inmunoglobulina pesada y una ligera.

4. La composición farmacéutica de la reivindicación 1, en la que se obtienen fragmentos de anticuerpo por tratamiento de anticuerpos completos con una endopeptidasa tal como papaína, pepsina o ficina.

5. La composición farmacéutica de la reivindicación 1, en la que se obtienen anticuerpos o fragmentos de anticuerpo mediante los métodos de ingeniería genética.

6. Un método para la preparación de la composición farmacéutica de la reivindicación 1, que comprende al menos

las etapas siguientes:

1) Síntesis peptídica.

2) Acoplamiento con KLH.

3) Inmunización de un animal de laboratorio con conjugado de péptido-KLH.

4) Recogida y purificación preliminar de sueros inmunes.

5) Purificación por afinidad sobre proteína A o G o ligando de unión a inmunoglobulina.

6) Purificación sobre KLH-BrCN-Sepharose o purificación por afinidad sobre el péptido con purificación de

intercambio iónico opcional.

7) Preparación de una forma de dosificación sólida o líquida.