Una composición inmunógena que comprende un conjugado de sacárido Hib y al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano en la que el conjugado Hib está presente en una dosis de sacárido más baja que la dosis de sacárido media de los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano

Composición inmunógena.

La presente solicitud se refiere a composiciones inmunógenas y vacunas que comprenden un conjugado de sacárido Hib y al menos otros dos conjugados de sacáridos bacterianos, a procedimientos para la preparación de esas composiciones inmunógenas y vacunas, y a usos y métodos de inmunización usando la composición inmunógena y la vacuna.

Los polisacáridos bacterianos han demostrado ser inmunógenos eficaces para su uso en vacunas, particularmente cuando están conjugados con una proteína portadora. Hay vacunas de conjugados comerciales disponibles contra Haemophilus influenzae tipo b (Hibtiter® Wyeth-Lederle), polisacáridos de neumococo (Prevnar -Wyeth-Lederle) y polisacáridos de meningococo (Meningitec® - Wyeth-Lederle y Menactra® - Sanofi).

También se han descrito composiciones inmunógenas y vacunas que comprenden un conjugado Hib y conjugados de sacáridos bacterianos adicionales. Por ejemplo, el documento WO 02/00249 describe composiciones inmunógenas que comprenden un conjugado PRP Hib y conjugados de polisacáridos u oligosacáridos adicionales en los que los conjugados de polisacáridos no se adsorben sobre el adyuvante, particularmente sales de aluminio. Los resultados de ensayos clínicos presentados usan las mismas dosis de todos los polisacáridos bacterianos.

Choo y col. en Pediatr. Infect. Dis. J. (2000) 19; 854-62 describe la inoculación de niños pequeños con una vacuna de conjugado de neumococo 7-valente mezclada con una vacuna de conjugado de Haemophilus influenzae tipo b (hib) conocida como HbOC. La dosis de conjugado hib administrado fue 5 veces superior que la dosis de cada uno de los conjugados del polisacárido de neumococo administrados. Tamm y col. en Vaccine (2005) 23; 1715-1719 describe un estudio clínico de una vacuna de conjugado DtwPHib-CRM197 en la que se investiga el uso de dosis inferiores a Hib-CRM197.

La presente invención se refiere a la proporción de una combinación de vacuna que comprende un conjugado Hib y conjugados de sacáridos bacterianos adicionales que es capaz de desencadenar una respuesta inmunógena mejorada debido a la optimización de la dosis del conjugado Hib y de otros conjugados de polisacáridos bacterianos.

Por consiguiente, un primer aspecto de la invención proporciona una composición inmunógena que comprende un conjugado de sacárido Hib y al menos otros dos conjugados de sacáridos bacterianos en los que el conjugado Hib está presente en una dosis de sacárido inferior que la dosis de sacárido media de los al menos otros dos conjugados de sacáridos bacterianos.

Descripción detallada

La composición inmunógena de la invención comprende un conjugado de sacárido Hib y al menos otros dos conjugados de sacáridos bacterianos en la que el conjugado Hib está presente en una dosis de sacárido inferior que la dosis de sacárido media de los al menos otros dos conjugados de sacáridos bacterianos. Alternativamente, el conjugado Hib está presente en una dosis de sacárido inferior que la dosis de sacárido de cada uno de los al menos otros dos conjugados de sacáridos bacterianos. Por ejemplo, la dosis del conjugado Hib puede ser al menos un 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70% u 80% inferior que la media o que la dosis de sacárido más baja de los al menos otros dos conjugados de sacáridos bacterianos.

El término "sacárido" incluye polisacáridos u oligosacáridos. Los polisacáridos se aíslan a partir de bacterias o se aíslan a partir de bacterias y se clasifican por tamaños en algún grado mediante procedimientos conocidos (véase, por ejemplo, documentos EP497524 y EP497525) y opcionalmente por microfluidización. Los polisacáridos se pueden clasificar por tamaños para reducir la viscosidad en las muestras de polisacáridos y/o mejorar la filtrabilidad de los productos conjugados. Los oligosacáridos tienen una serie de unidades de repetición (normalmente 5-30 unidades de repetición) y normalmente son polisacáridos hidrolizados.

La "dosis media" se determina sumando las dosis de todos los polisacáridos adicionales y dividiendo por el número de polisacáridos adicionales. La "dosis" es la cantidad de composición inmunógena o vacuna que se administra a un ser humano.

Los polisacáridos opcionalmente se clasifican por tamaños hasta 1,5, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18 ó 20 veces del tamaño del polisacárido aislado a partir de la bacteria.

"Clasificado por tamaño por un factor de hasta x2" significa que el polisacárido se somete a un procedimiento previsto para reducir el tamaño del polisacárido, pero para retener un tamaño superior a la mitad del tamaño del polisacárido nativo. X3, x4, etc. se deben interpretar de la misma forma, es decir, el polisacárido se somete a un procedimiento previsto para reducir el tamaño del polisacárido, pero para retener un tamaño superior a un tercio, un cuarto, etc., del tamaño del polisacárido nativo, respectivamente.

El tamaño del sacárido MenA es de, por ejemplo, 5-200 kDa, 10-20 kDa, 5-10 kDa, 20-30 kDa, 20-40 kDa, 40-80 kDa, 60-80 kDa, 60-70 kDa o 70-80 kDa.

El tamaño del sacárido MenC es de, por ejemplo, 5-200 kDa,10-20 kDa, 5-10 kDa, 5-15 kDa, 20-50 kDa, 50-100 kDa, 100-150 kDa, 150-210 kDa.

El tamaño del sacárido MenW es de, por ejemplo, 5-200 kDa, 10-20 kDa, 5-10 kDa, 20-50 kDa, 50-100 kDa, 100-150 kDa o 120-140 kDa.

El tamaño del sacárido MenY es de, por ejemplo, 5-200 kDa, 10-20 kDa, 5-10 kDa, 20-50 kDa, 50-100 kDa, 100-140 kDa, 140-170 kDa o 150-160 kDa como se determina mediante MALLS.

En una forma de realización, la polidispersidad de los sacáridos es de 1-1,5, 1-1,3, 1-1,2, 1-1,1 ó 1-1,05 y después de la conjugación a una proteína portadora, la polidispersidad del conjugado es de 1,0-2,0, 1,0-1,5, 1,0-1,2 ó 1,5-2,0. Todas las medidas de polidispersidad se realizan por MALLS.

Para los análisis por MALLS de sacáridos de meningococo, se pueden usar dos columnas (TSKG6000 y 5000PWxl TOSOH Bioscience) en combinación y los sacáridos se eluyen en agua. Los sacáridos se detectan usando un detector de dispersión de luz (por ejemplo, Wyatt Dawn DSP equipado con un láser de argón de 10 mW a 488 nm) y un refractómetro inferométrico (por ejemplo Wyatt Otilab DSP equipado con una célula P100 y un filtro rojo a 498 nm).

Un sacárido Hib es el polisacárido u oligosacárido capsular de polirribosil fosfato (PRP) de Haemophilus influenzae tipo b.

"Al menos otros dos conjugados de sacáridos bacterianos" se refiere a al menos dos conjugados de sacáridos en los que los sacáridos son diferentes de Hib y entre sí. Los al menos otros dos conjugados de sacáridos bacterianos pueden derivar de uno o más de Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae, Estreptococos del Grupo A, Estreptococos del Grupo B, S. typhi, Staphylococcus aureus o Staphylococcus epidermidis. En una forma de realización, la composición inmunógena comprende polisacáridos u oligosacáridos capsulares derivados de uno o más de los serogrupos A, B, C, W135 e Y de Neisseria meningitidis. Una forma de realización adicional comprende polisacáridos u oligosacáridos capsulares derivados de Streptococcus pneumoniae. Los antígenos del polisacárido u oligosacárido capsular de neumococo opcionalmente se seleccionan entre los serotipos 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F y 33F (por ejemplo entre los serotipos 1, 3, 4, 5, 6B, 7F, 9V, 14, 18C, 19F y 23F). Una forma de realización adicional comprende los polisacáridos u oligosacáridos capsulares de Tipo 5, Tipo 8 o 336 de Staphylococcus aureus. Una forma de realización adicional comprende los polisacáridos capsulares de Tipo I, Tipo II o Tipo III de Staphylococcus epidermidis. Una forma de realización adicional comprende el sacárido Vi (poli u oligosacárido) de S. typhi. Una forma de realización adicional comprende los polisacáridos u oligosacáridos capsulares de Tipo Ia, Tipo Ic, Tipo II o Tipo III de estreptococos del Grupo B. Una forma de realización adicional comprende los polisacáridos u oligosacáridos capsulares de estreptococos del Grupo A, opcionalmente que comprende además al menos una proteína M o múltiples tipos de proteína M. En una forma de realización, la composición inmunógena de la invención comprende adicionalmente un antígeno del serogrupo B de N. meningitidis. El antígeno opcionalmente es un polisacárido capsular del serogrupo B de N. meningitidis (MenB) o un polisacárido u oligosacárido...

1. Una composición inmunógena que comprende un conjugado de sacárido Hib y al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano en la que el conjugado Hib está presente en una dosis de sacárido más baja que la dosis de sacárido media de los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano.

2. La composición inmunógena de la reivindicación 1, en la que el conjugado Hib está presente en una dosis de sacárido más baja que la dosis de sacárido de cada uno de los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano.

3. La composición inmunógena de la reivindicación 1 ó 2, en la que los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano comprenden sacárido capsular de N. meningitidis derivado de una cepa seleccionada del grupo constituido por los serogrupos A, B, C, W135 e Y.

4. La composición inmunógena de la reivindicación 3, en la que los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano comprenden el sacárido capsular del serogrupo C de N. meningitidis (MenC).

5. La composición inmunógena de la reivindicación 3 ó 4, en la que los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano comprenden el sacárido capsular del serogrupo Y de N. meningitidis (MenY).

6. La composición inmunógena de las reivindicaciones 3-5, en la que los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano comprenden el sacárido capsular del serogrupo A de N. meningitidis (MenA).

7. La composición inmunógena de las reivindicaciones 3-6, en la que los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano comprenden el sacárido capsular del serogrupo W135 de N. meningitidis (MenW).

8. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes que comprende una preparación de vesícula de la membrana externa del serogrupo B de N. meningitidis.

9. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano comprenden un sacárido capsular de S. pneumoniae derivado de una cepa seleccionada del grupo constituido por los serotipos 1, 2, 3, 4, 5, 6A, 6B, 7F, 8, 9N, 9V, 10A, 11A, 12F, 14, 15B, 17F, 18C, 19A, 19F, 20, 22F, 23F y 33F.

10. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano comprenden un sacárido capsular de S. typhi Vi.

11. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que la dosis de sacárido del conjugado de sacárido Hib está entre 0,1 y 9 µg, 1 y 5 µg o 2 y 3 µg de sacárido.

12. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que la dosis de sacárido de cada uno de los al menos otros dos conjugados de sacárido está entre 2 y 20 µg, 3 y 10 µg o 4 y 7 µg de sacárido.

13. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que se usa la misma proteína portadora en el conjugado Hib y en los dos o más de los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano.

14. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que el sacárido Hib está conjugado a una proteína portadora seleccionada del grupo constituido por TT, DT, CRM197, fragmento C del TT, proteína D, OMPC y neumolisina.

15. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que los al menos otros dos sacáridos bacterianos están conjugados a una proteína portadora seleccionada del grupo constituido por TT, DT, CRM197, fragmento C del TT, proteína D, OMPC y neumolisina.

16. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que el sacárido MenC, cuando está presente, tiene un peso molecular por encima de 50 kDa.

17. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que el sacárido MenY, cuando está presente, tiene un peso molecular por encima de 50 kDa.

18. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que MenC, cuando está presente, está al menos parcialmente O-acetilado de manera que al menos el 30% de las unidades de repetición están O-acetiladas en al menos una posición.

19. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que MenY, cuando está presente, está al menos parcialmente O-acetilado de manera que al menos el 20% de las unidades de repetición están O-acetiladas en al menos una posición.

20. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes que no contiene sales de aluminio.

21. La composición inmunógena de cualquiera de las reivindicaciones precedentes que no contiene adyuvante.

22. Una vacuna que comprende la composición inmunógena de una cualquiera de las reivindicaciones 1-21 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

23. Un kit de vacuna para la administración simultánea o secuencial que comprende dos composiciones inmunógenas multivalentes destinadas a conferir protección a un hospedador contra una enfermedad causada por Bordetella pertussis, Clostridium tetani, Corynebacterium diphtheriae, y Haemophilus influenzae, dicho kit que comprende un primer contenedor que contiene:

toxoide del tétanos (TT),

toxoide de la difteria (DT), y

componentes de pertussis de células enteras o acelulares

y un segundo contenedor que comprende la composición inmunógena de una cualquiera de las reivindicaciones 1-21.

24. El kit de vacuna de la reivindicación 23, en el que el primer contenedor comprende adicionalmente antígeno de superficie de la hepatitis B.

25. Un kit de vacuna de la reivindicación 23 ó 24 en el que el primer o segundo contenedor comprende adicionalmente poliovirus inactivado (IPV).

26. Un procedimiento para la preparación de la composición inmunógena de una cualquiera de las reivindicaciones 1-21 que comprende la etapa de mezcla de un conjugado de sacárido Hib con al menos otros dos conjugados de sacáridos bacterianos para formar una composición en la que el conjugado Hib está presente en una dosis de sacárido inferior que la dosis de sacárido media de los al menos otros dos conjugados de sacárido bacteriano.

27. La composición inmunógena, vacuna o kit de cualquiera de las reivindicaciones 1-25, para su uso en el tratamiento o prevención de la meningitis.

28. La composición inmunógena, vacuna o kit de cualquiera de las reivindicaciones 1-25, para su uso en el tratamiento o prevención de una enfermedad causada por Haemophilus influenzae.

29. El uso de la composición inmunógena, vacuna o kit de una cualquiera de las reivindicaciones 1-25 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la meningitis.

30. El uso de la composición inmunógena, vacuna o kit de una cualquiera de las reivindicaciones 1-25 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de una enfermedad causada por Haemophilus influenzae.