Composición farmacéutica antiinflamatoria sinérgica para reducir la inflamación mediada por PGE2.

Composición que comprende un ácido iso-alfa reducido (RIAA) y un ácido iso-alfa (IAA) derivado de lúpulo,

donde: el RIAA y el IAA están presentes en una relación de 3:1 a 1:20;

dichos RIAA e IAA constituyen individualmente al menos un 0, 1% de la composición y la combinación de tales RIAA e IAA en dicha composición proporciona un índice de combinación (CI) inferior a 1 en relación con la inhibición de la producción de PGE

Composición farmacéutica antiinflamatoria sinérgica para reducir la inflamación mediada por PGE2

La presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas que contienen RIAA e IAA derivadas de lúpulo (Humulus lupulus) y a su uso para reducir la inflamación.

Las prostaglandinas (PG) son hormonas ubicuas que actúan como mediadores tanto paracrinos como autocrinos, influyendo en múltiples cambios fisiológicos del entorno celular inmediato. Los diversos efectos fisiológicos de las PG incluyen reacciones inflamatorias tales como artritis reumatoide y osteoartritis, control de la tensión arterial, agregación plaquetaria, inducción del parto y agravamiento del dolor y la fiebre. Hace 30 años se descubrió que la aspirina y otros analgésicos no esteroideos inhibían la producción de PG, por lo que la síntesis de PG se identificó como una diana para el desarrollo de fármacos. Existen al menos 16 PG distintas en nueve clases químicas diferentes, denominadas PGA a PGI. Las PG forman parte de una familia mayor de compuestos que contienen 20 carbonos denominados eicosanoides; éstos incluyen prostaciclinas, tromboxanos y leucotrienos. La matriz de las PG producidas varía en función de la maquinaria enzimática aguas abajo presente en un tipo celular particular. Por ejemplo, las células endoteliales producen principalmente PGI2, mientras que las plaquetas producen principalmente TXA2.

El ácido araquidónico sirve como sustrato principal para la biosíntesis de todas las PG. La ciclooxigenasa (prostaglandina-endoperóxido-sintasa, EC 1.14.991, COX) cataliza el paso limitante del metabolismo del ácido araquidónico en prostaglandina H2 (PGH2) , que se metaboliza adicionalmente en diversas prostaglandinas, prostaciclina y tromboxano A2 (véase la Figura 1) . A principios de la década de los 90 se comprobó que la COX existe en dos isoformas, denominadas habitualmente COX-1 y COX-2. Posteriormente se determinó que las proteínas COX-1 y COX-2 se derivaban de distintos genes que divergieron mucho antes de pájaros y mamíferos. Las PG generadas vía las rutas de COX-1 y COX-2 son moléculas idénticas y, en consecuencia, tienen efectos biológicos idénticos. Sin embargo, la COX-1 y la COX-2 pueden generar un patrón único y cantidades variables de eicosanoides; por ello, diferencias relativas en la activación de estas isoenzimas pueden conducir a respuestas biológicas totalmente distintas. Las diferencias en la distribución en los tejidos y la regulación de la COX-1 y la COX-2 se consideran ahora cruciales para los efectos tanto beneficiosos como adversos de los inhibidores de la COX.

El concepto generalmente aceptado (dogma COX) es que la COX-1 se expresa de forma constitutiva en la mayoría de los tejidos, mientras que la COX-2 es la enzima inducible activada por estímulos proinflamatorios, incluyendo mitógenos, citoquinas y lipopolisacáridos (LPS) bacterianos en las células in vitro y puntos de inflamación in vivo. Principalmente en base a estas diferencias de expresión, la COX-1 se caracteriza como una enzima doméstica y se considera que participa en el mantenimiento de funciones fisiológicas tales como la citoprotección de la mucosa gástrica, la regulación del flujo sanguíneo renal y el control de la agregación plaquetaria. Se considera que la COX-2 principalmente media en la inflamación, aunque se ha encontrado una expresión constitutiva en el cerebro, los riñones y el tracto gastrointestinal.

Se cree que las prostaglandinas (PG) desempeñan un papel importante en el mantenimiento de la homeostasis de la mucosa gástrica humana. El dogma actual es que la COX-1 es responsable de la síntesis de PG en la mucosa gástrica normal para mantener la homeostasis de la mucosa y que la COX-2 es expresada por la mucosa gástrica normal en niveles bajos, induciéndose su expresión durante la curación de úlceras, después de exposición a endotaxano o de estimulación por citoquinas. Ahora parece que tanto la COX-1 como la COX-2 desempeñan funciones fisiológicas importantes en la mucosa gástrica normal.

Compuestos que inhiben la producción de PG por la COX se han convertido en fármacos importantes para el control del dolor y la inflamación. Estos agentes son conocidos colectivamente como fármacos antiinflamatorios no esteroideos (NSAID) y sus indicaciones principales son la osteoartritis y la artritis reumatoide. Sin embargo, el uso de NSAID, y en particular de aspirina, se ha extendido a la profilaxis de enfermedades cardiovasculares. Durante la última década se han dedicado esfuerzos considerables al desarrollo de nuevas moléculas inhibidoras directas de la actividad enzimática de la COX-2, al deducirse que estos compuestos serían menos irritantes para el estómago con el uso crónico.

El documento US 5.073.396 describe una cerveza aromatizada con una fracción de esencia de lúpulo no ácida. El documento XP 002429538 (Dissenation- Kaltner, D., 30.11.2000) da a conocer una concentración variable de ácidos alfa y beta en lúpulo. La US 2004/0137096 describe una composición farmacéutica antiinflamatoria que inhibe la enzima COX-2. La US 5.604.263 da a conocer una composición farmacéutica para tratar la osteoporosis que comprende, como principio activo, una cantidad eficaz de uno o más compuestos seleccionados de entre el grupo consistente en humulona, cohumulona, adhumulona, isohumulona, isocohumulona e isoadhumulona, en combinación con un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable. La US 2002/0086070 da a conocer composiciones terapéuticas que tienen propiedades antiinflamatorias y de reparación de las articulaciones. La US 2003/0113393 describe una formulación que sirve para inhibir específicamente la respuesta inflamatoria mediada por COX-2 en animales. La US 2003/0096027 da a conocer una formulación que sirve para inhibir la respuesta inflamatoria en animales. La US 6.391.346 describe una composición herbal capaz de reducir la inflamación en huesos y articulaciones en animales, preferentemente en humanos, mientras promueven un sueño seguro y tranquilo. La US 2004/0219240 da a conocer extractos de lúpulo o derivados de los mismos para el tratamiento profiláctico y/o terapéutico de un paciente en relación con trastornos de tipo ulcerativo del estómago y/o el intestino. Smith, R.J. y col., J. Am. Soc. Brew. Chem 56 (2) : 52-57, 1998, "Natural Foam Stabilizing and Bittering Compounds Derived from Hops", da a conocer diversas resinas de lúpulo naturales que han sido aisladas mediante HPLC preparativa a partir de lúpulo y productos de lúpulo. Vanhoenacker, G. y col., J. Chromatography A 1035 (2004) 5361, "Analysis of iso-a-acids in beer by direct injection and liquid chromatograph with ultraviolet absorbance detection or with mass spectroscope", dan a conocer un método de cromatografía en líquido para el análisis simultáneo de ácidos iso-a y ácidos iso-a reducidos en cerveza.

El principal problema asociado a la determinación de la selectividad de la COX-2 (es decir, bajo potencial de irritación gástrica) consiste en que las diferencias en la metodología de ensayo pueden influir notablemente en los resultados obtenidos. La Tabla 1 muestra las categorías de los numerosos ensayos in vitro desarrollados para analizar y comparar las actividades inhibidoras relativas de los NSAID y de compuestos naturales contra la COX-1 y la COX-2. Estos sistemas de análisis se pueden clasificar en tres grupos: (1) sistemas donde se emplean enzimas animales, células o líneas celulares animales; (2) ensayos donde se utilizan líneas celulares humanas o plaquetas y monocitos humanos; y (3) modelos actualmente en desarrollo donde se utilizan células humanas representativas de las células diana para los efectos antiinflamatorios y adversos de los NSAID y complementos alimenticios. En general, aquellos modelos donde se utilizan líneas celulares humanas o plaquetas y monocitos humanos son la norma actual y no se han presentado modelos de células diana validados. Existe una necesidad crítica de una línea celular gástrica humana capaz de evaluar el potencial de irritación gástrica.

Las enzimas utilizadas pueden ser de origen animal o humano, pueden ser nativas o recombinantes y se pueden utilizar como enzimas purificadas, en preparaciones microsómicas o en ensayos de células completas. Otras variables del sistema incluyen la fuente de ácido araquidónico. La síntesis de PG se puede medir a partir del ácido araquidónico liberado de forma endógena o del ácido araquidónico añadido de forma exógena. En este último caso, en laboratorios distintos se utilizan concentraciones diferentes.

Un ensayo ideal para la selectividad de la COX-2 tendría... [Seguir leyendo]

1. Composición que comprende un ácido iso-alfa reducido (RIAA) y un ácido iso-alfa (IAA) derivado de lúpulo, donde: el RIAA y el IAA están presentes en una relación de 3:1 a 1:20;

dichos RIAA e IAA constituyen individualmente al menos un 0, 1% de la composición y la combinación de tales RIAA e IAA en dicha composición proporciona un índice de combinación (CI) inferior a 1 en relación con la inhibición de la producción de PGE2.

2. Composición según la reivindicación 1, caracterizada porque, cuando el RIAA y el IAA están presentes en una relación 3:1, el RIAA está en una concentración de al menos 8 μg/ml.

3. Composición según la reivindicación 1, caracterizada porque, cuando el RIAA y el IAA están presentes en una relación 3:2, el RIAA está en una concentración de al menos 10 μg/ml.

4. Composición según la reivindicación 1, caracterizada porque, cuando el RIAA y el IAA están presentes en una relación 1:1, el RIAA está en una concentración de hasta 0, 3 μg/ml.

5. Composición según la reivindicación 1, caracterizada porque, cuando el RIAA y el IAA están presentes en 15 una relación 2:3, el RIAA está en una concentración de al menos 60 μg/ml.

6. Composición según la reivindicación 1, caracterizada porque, cuando el RIAA y el IAA están presentes en una relación 1:10, el RIAA está en una concentración de al menos 0, 3 μg/ml.

7. Composición según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque dicho ácido iso-alfa se selecciona de entre isohumolona, isocohumolona e isoadhumolona.

8. Composición según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque dicho ácido iso-alfa reducido se selecciona de entre dihidroisohumolona, dihidroisocohumolona y dihidroisoadhumolona.

9. Composición según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque es capaz de reducir la inflamación mediada por PGE2.

10. Composición según la reivindicación 9, caracterizada porque dicho ácido iso-alfa se selecciona de entre 25 isohumolona, isocohumolona e isoadhumolona.

11. Composición según la reivindicación 9, caracterizada porque dicho ácido isoalfa reducido se selecciona de entre dihidroisohumolona, dihidro-isocohumolona y dihidroisoadhumolona.

12. Composición según la reivindicación 9, caracterizada porque comprende al menos dos compuestos del Género A de fórmula:

donde R' se selecciona entre el grupo consistente en carbonilo, hidroxilo, OR y OCOR, siendo R alquilo; y R'' se selecciona entre el grupo consistente en CH (CH3) 2, CH2CH (CH3) 2 y CH (CH3) CH2CH3; consistiendo uno de estos dos o más compuestos del Género A en dicho RIAA y otro de estos dos o más compuestos del Género A en dicho IAA.

13. Composición que incluye un ácido iso-alfa reducido (RIAA) y un ácido iso-alfa (IAA) , estando el RIAA y el IAA en una relación de 3:1 a 1:10; dichos RIAA e IAA constituyendo individualmente al menos un 0, 1% de la composición; y proporcionando la combinación de dichos RIAA e IAA en dicha composición un índice de combinación (CI) inferior a 1 en relación con la inhibición de la producción de PGE2; para su uso para reducir la inflamación mediada por PGE2.

14. Composición a utilizar según la reivindicación 13, caracterizada porque el RIAA se selecciona de entre el grupo consistente en dihidroisohumolona, dihidroisocohumolona y dihidroisoadhumolona.

15. Composición a utilizar según la reivindicación 13, caracterizada porque el IAA se selecciona de entre isohumolona, isocohumolona e isoadhumolona.

16. Composición a utilizar según la reivindicación 13, caracterizada porque comprende de 50 mg a 7.500 mg del RIAA.

17. Composición a utilizar según la reivindicación 13, caracterizada porque comprende de 50 mg a 7.500 mg del IAA.

18. Composición a utilizar según la reivindicación 13, caracterizada porque además incluye un vehículo 10 farmacéuticamente aceptable.

19. Composición a utilizar según la reivindicación 13, caracterizada porque está prevista para ser administrada vía oral, tópica, parenteral o rectal.

Figura 2

Figura 3

sinergia Figura 4A

sinergia Figura 4B

sinergia Figura 4C

sinergia Figura 4D

sinergia Figura 4E

sinergia Figura 4F

sinergia Figura 4G

sinergia Figura 4H