Composición cosmética que contiene fitoalexinas y proceso de obtención de fitoalexinas.

Composición para aplicación tópica, en particular composición cosmética,

que contiene células vegetales indiferenciadas, caracterizada por que la composición contiene al menos un homogenado de células vegetales indiferenciadas y elicitadas en cultivo in vitro de una especie elegida entre Salvia, Coleus, Rosmarinus, Ginkgo, Cannabis, Colchicum, Gloriosa, Asparagus, Arganier, Glycine, Medicago, Mungo, Erythrina, Oenothera, Papaver, Atropa, Datura, Solanum, Borago, Reseda, Amsonia, Catharantus, Pilocarpus, Digitalis, Coffea, Theobroma, Jasminum, Capsicum, Iris, vigne, taxus, séquoia, chlorophytum, cacao, psoralea coryilfolia, vitex negundo, commiphora wighii, eucalyptus punctata, lavandula angustifolia, citrus limon, vanilla planifolia, marrubium vulgare, pilocarpus jaborandi, roses, betula, thé y las mezclas de células de dichas especies,

para sintetizar al menos una fitoalexina, siendo realizada dicha elicitación de forma ventajosa para sintetizar al menos una fitoalexina después de una etapa de cultivos de células vegetales in vitro sin elicitación, en la que dicho homogenado contiene al menos una fitoalexina que comprende al menos un 95 %, de forma ventajosa al menos un 97 %, preferentemente al menos un 99 % en peso del conjunto de materias secas originadas en las células vegetales indiferenciadas y elicitadas in vitro, dispersando dicho homogenado en dicha composición o estando bajo una forma apta para su dispersión en dicha composición

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/IB2003/001020.

Solicitante: ENNAMANY, RACHID.

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: 13, RUE GERARD PHILIPPE 33140 VILLENAVE D'ORNON FRANCIA.

Inventor/es: ENNAMANY,Rachid.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A61K36/00 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › Preparaciones medicinales de constitución indeterminada que contienen sustancias procedentes de algas, líquenes, hongos o plantas o sus derivados, p. ej. medicinas tradicionales basadas en plantas.
  • A61K36/05 A61K […] › A61K 36/00 Preparaciones medicinales de constitución indeterminada que contienen sustancias procedentes de algas, líquenes, hongos o plantas o sus derivados, p. ej. medicinas tradicionales basadas en plantas. › Chlorophycota o clorófitas (algas verdes), p. ej. Chlorella.
  • A61K36/07 A61K 36/00 […] › Basidiomycota, p. ej. Cryptococcus.
  • A61K36/13 A61K 36/00 […] › Coniferophyta (gimnospermas).
  • A61K36/16 A61K 36/00 […] › Ginkgophyta, p. ej. Ginkgoaceae (familia del ginkgo).
  • A61K36/185 A61K 36/00 […] › Magnoliopsida (dicotiledóneas).
  • A61K36/24 A61K 36/00 […] › Apocynaceae (familia del Apocynum venetum), p. ej. plumeria o pervinca.
  • A61K36/30 A61K 36/00 […] › Boraginaceae (familia de la Borraja), p. ej. consuelda, pulmonaria o nomeolvides.
  • A61K36/328 A61K 36/00 […] › Commiphora, p. ej. mirra o bálsamo de Judea.
  • A61K36/48 A61K 36/00 […] › Fabaceae o Leguminosae (familia del guisante o de las leguminosas); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae.
  • A61K36/487 A61K 36/00 […] › Psoralea.
  • A61K36/53 A61K 36/00 […] › Lamiaceae o Labiatae (familia de la Menta), p. ej. tomillo, romero o lavanda.
  • A61K36/537 A61K 36/00 […] › Salvia (salvia).
  • A61K36/61 A61K 36/00 […] › Myrtaceae (familia del mirto), p. ej. cayeput o eucalipto.
  • A61K36/66 A61K 36/00 […] › Papaveraceae (familia de la amapola), p. ej. sanguinaria del Canadá.
  • A61K36/87 A61K 36/00 […] › Vitaceae o Ampelidaceae (familia de la vid o de la uva), p. ej. uvas, Vitis rotumdifolia o parra virgen.
  • A61K36/88 A61K 36/00 […] › Liliopsida (monocotiledóneas).
  • A61K36/896 A61K 36/00 […] › Liliaceae (familia del lirio), p. ej. hemerocala, hosta, jacinto o narciso.
  • A61K36/8965 A61K 36/00 […] › Asparagus, p. ej. esparrago o esparragera.
  • A61K8/97 A61K […] › A61K 8/00 Cosméticos o preparaciones similares para el aseo. › a partir de algas, hongos, líquenes o plantas; a partir de sus derivados.
  • A61Q19/00 A61 […] › A61Q USO ESPECIFICO DE COSMETICOS O DE PREPARACIONES SIMILARES PARA EL ASEO.Preparaciones para el cuidado de la piel.
  • A61Q5/00 A61Q […] › Preparaciones para el cuidado del cabello.
  • C12N5/02 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Propagación de células individuales o de células en suspensión; Su conservación; Medios de cultivo para este fin.

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Fragmento de la descripción:

Composición cosmética que contiene fitoalexinas y proceso de obtención de fitoalexinas

La invención se refiere a una composición para uso tópico, en particular cosmético, rica en metabolitos producidos por las células vegetales indiferenciadas. En particular, la invención se refiere a una composición que contiene una masa de células vegetales indiferenciadas y elicitadas en cultivo in vitro.

Por células vegetales indiferenciadas, se entiende cualquier célula vegetal que no presenta ninguno de los caracteres de una especialización en particular y que es capaz de vivir por sí misma y que no depende de otras células.

Las células vegetales indiferenciadas se pueden obtener a partir de material vegetal derivado de la planta entera o de partes de la planta, tales como hojas, tallos, flores, pétalos, raíces, frutos, su piel, la envoltura que los protege, semillas, anteras, savia, espinas, tallos, corteza, bayas, y mezclas de los mismos.

Preferentemente, las células vegetales indiferenciadas se obtienen a partir de la corteza, hojas, brotes y piel de frutos, en particular de la cutícula del fruto.

Las células vegetales indiferenciadas usadas de acuerdo con la invención se pueden obtener de vegetales obtenidos mediante el cultivo in vivo o que proviene del cultivo in vitro.

Por cultivo in vivo se refiere a cualquier cultivo de tipo convencional, es decir en el suelo al aire libre o en invernaderos o incluso fuera del suelo o en medio hidropónico.

Por cultivo in vitro se refiere al conjunto de técnicas conocidas por el experto en la materia que permiten obtener de manera artificial una planta o parte de una planta. La presión de selección impuesta por las condiciones fisicoquímicas durante el crecimiento de las células vegetales in vitro permite obtener un material vegetal estandarizado libre de contaminaciones y disponible durante todo el año, al contrario que las plantas cultivadas in

vivo.

Preferentemente, de acuerdo con la invención se usan células vegetales indiferenciadas que provienen del cultivo in

vitro.

Las células vegetales indiferenciadas que se pueden usar de acuerdo con la invención se pueden obtener mediante cualquier método conocido de la técnica. En este sentido, se pueden mencionar los métodos que se describen en E.F. George y P.D. Sherrington en Plant Propagation by tissue culture, handbook and directory of commercial laboratories (Exegetics Ltd 1984).

Los medios de cultivo que se pueden usar de acuerdo con la invención son los que generalmente conoce el experto en la materia. A modo de ejemplo, se pueden mencionar los medios de Gamborg, Murashige y Skoog, Heller, White, etc.. En "Plant Culture Média: formulations and uses" de E.F. George, DJM Puttock y H.J George (Exegetics Ltd 1987, tomos 1 y 2) se encontrarán descripciones completas de estos medios.

Preferentemente, de acuerdo con la invención se preparan las células vegetales indiferenciadas cultivadas sobre medio de Murashige y Skoog.

Estado de la técnica

A través del documento FR 2795637 se conoce una composición cosmética que contiene un extracto de células vegetales indiferenciadas para evitar los problemas del olor. Esta composición contiene un extracto de células vegetales indiferenciadas pero no elicitadas, de manera que esta composición es pobre en metabolitos secundarios o en fitoalexinas, incluso está sensiblemente libre de dichos compuestos. Además, el presente documento describe el uso de extractos acuosos obtenidos después de la molienda de las células en su medio de cultivo y después de la eliminación de las partículas en suspensión con una pérdida inevitable de metabolitos relacionados con las partículas en suspensión. Con el fin de eliminar las proteasas y en particular las oxidasas, el presente documento también propone el uso de filtros que capturan las moléculas con un peso molecular superior a 1. daltons perdiendo de este modo en el extracto final todos los metabolitos por encima de este peso y pueden ser de un gran interés para la industria cosmética. Además, con el fin de eliminar los problemas debidos a la oxidación, el documento propone la adición de estabilizadores, en particular cisteína y/o derivados de azufre, lo que se traduce necesariamente en una pureza menor del extracto con etapas de filtración posteriores. Los métodos que se describen en el presente documento requieren la puesta en marcha de medios complicados para la obtención de extractos cuya, tanto la pureza (numerosos aditivos), como la calidad como la concentración (en metabolitos) no es óptima. Además, las numerosas etapas necesarias para obtener extractos de esta procedencia conllevan altos costes y el riesgo de contaminaciones por parte de las numerosas manipulaciones y aditivos.

Se conocen los cultivos de células indiferenciadas, por otra parte se conocen los mecanismos de elicitación de estas células seguido de etapas de extracciones y de diversas filtraciones seguidos de liofilización con el fin de incorporar los extractos obtenidos en una preparación cosmética o farmacéutica. Dichos procedimientos se describen por ejemplo en la patente de Estados Unidos N° 4.241.536; el documento EP 378 921, el documento WO 88/968, el

documento EP 1 23 811, etc. para especies de plantas diversas. El contenido de estos documentos se incorpora en la presente descripción por referencia para describir medios de cultivo, especies de plantas, posibles agentes de elicitación, etc.

El documento EP378921 describe métodos para la producción de metabolitos de plantas por elicitación que comprende una etapa de aislamiento del metabolito mencionado del medio de producción mencionado.

El documento FR28819 describe composiciones que contienen un extracto de la planta Vitis vinifera, realizando la extracción por medio de un disolvente orgánico.

El documento FR2795637 escribe composiciones que comprenden un extracto de células vegetales indiferenciadas, estrato en el que las partículas finas se han eliminado.

El articulo "Changes in the fitoalexina contení of various Vitis spp. in response to ultraviolet C elicitation", Douillet- Breuil et al., Journal of Agricultural and Food chemistry, US, octubre de 1999, volumen 47, número 1 describe la producción de fitoalexina de Vitis vinifera en función de una radiación UV-C.

En la actualidad, a pesar de las habilidades y el conocimiento de las industrias en el campo de extractos de plantas, y a pesar del progreso de la química orgánica, son indispensables diversas etapas de extracción para obtener una materia prima vegetal.

Se atribuyen varios inconvenientes a estas extracciones:

pérdida de la estructura terciaria de las moléculas aisladas, presencia de diferentes disolventes en el producto acabado,

heterogeneidad de los sustratos que requieren extracciones finas mediante el uso de disolventes cada vez más tóxicos,

calidad del extracto en función del estado fisiológico de la planta en el momento de la cosecha, producción del extracto limitada en función de las estaciones del año.

En vista de estos factores limitantes y con el aumento de interés de los consumidores por todo lo que tiene un origen natural, se han realizado diversos intentos para obtener células. Por lo tanto, hasta la fecha, se han usado dos procedimientos principales:

- El cultivo de células a partir de organismos unicelulares o de microorganismos, técnica poco original que se basa en la reproducción de las condiciones normales de vida. Sin embargo, estos organismos son primitivos y no desarrollan metabolismo secundario, fuente de los principios activos más interesantes.

- La obtención de células a partir de frutas (células frescas) después de la digestión enzimática. Las limitaciones de este procedimiento residen en el hecho de que las frutas no son asépticas y pueden contener restos de pesticidas (fungicidas, herbicidas, insecticidas, etc.). Por otro lado, las enzimas (celulasas, pectinasas, etc.) usadas en cantidad importante (2 %, P/P) para la digestión de las paredes vegetales y para la obtención de células sin pared (protoplastos) se encuentran el producto acabado. Por otra parte, las enzimas usadas pueden alterar la calidad de los metabolitos. Por último, el uso de esta técnica solamente permite recuperar protoplastos (células sin pared celular), estructuras frágiles que no pueden dirigir su metabolismo.

Los inventores han desarrollado una tecnología innovadora y controlada, que garantiza la calidad y la autenticidad de los productos. Se trata de la puesta en cultivo de células de plantas superiores indiferencias.

En efecto, y por primera vez, un procedimiento industrial permite obtener células a partir de plantas... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Composición para aplicación tópica, en particular composición cosmética, que contiene células vegetales ¡ndiferenciadas, caracterizada por que la composición contiene al menos un homogenado de células vegetales ¡ndlferencladas y ellcltadas en cultivo in vitro de una especie elegida entre Salvia, Coleus, Rosmarinus, Ginkgo, Cannabis, Colchicum, Gloriosa, Asparagus, Arganier, Glycine, Medicago, Mungo, Erythrina, Oenothera, Papaver, Atropa, Datura, Sotanum, Borago, Reseda, Amsonia, Catharantus, Pilocarpus, Digitalis, Coffea, Theobroma, Jasminum, Capsicum, Iris, vigne, taxus, séquoia, chlorophytum, cacao, psoralea coryilfolia, vitex negundo, commiphora wighii, eucalyptus punctata, lavandula angustifolia, citrus limón, vanilla planifolia, marrubium vulgare, pilocarpus jaborandi, roses, betula, thé y las mezclas de células de dichas especies,

para sintetizar al menos una fitoalexina, siendo realizada dicha elicitación de forma ventajosa para sintetizar al menos una fitoalexina después de una etapa de cultivos de células vegetales in vitro sin elicitación, en la que dicho homogenado contiene al menos una fitoalexina que comprende al menos un 95 %, de forma ventajosa al menos un 97 %, preferentemente al menos un 99 % en peso del conjunto de materias secas originadas en las células vegetales ¡ndlferencladas y elicitadas in vitro, dispersando dicho homogenado en dicha composición o estando bajo una forma apta para su dispersión en dicha composición.

2. Composición de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada por que el homogenado de células vegetales ¡ndiferenciadas y elicitadas in vitro comprende partículas que provienen de las vacuolas, partículas que provienen del citoplasma y partículas que provienen de la membrana pectocelulósica, conteniendo dicho homogenado al menos un ,1 % en peso de fitoalexina(s).

3. Composición de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, caracterizada por que el homogenado es un homogenado de células ¡ndiferenciadas y elicitadas in vitro, estando dichas células al menos parcialmente secas.

4. Composición de acuerdo con la reivindicación 3, caracterizada por que el homogenado es un homogenado de células ¡ndiferenciadas y elicitadas in vitro, estando dichas células básicamente secas por completo, preferentemente liofilizadas, y a continuación a un homogenadas.

5. Composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque contiene de un ,5 a un 25 % en peso, de forma ventajosa de un ,5 a un 5 % en peso de homogenado de células vegetales indiferenciadas y elicitadas in vitro, calculando dicho peso en forma seca.

6. Composición de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada porque contiene un homogenado seco o básicamente seco de células vegetales indiferenciadas y elicitadas in vitro, teniendo dicho homogenado seco o básicamente seco un contenido en agua inferior a un 25 % en peso, de forma ventajosa inferior a un 15 % en peso, preferentemente inferior a un 1 % en peso.

7. Composición de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada por que el homogenado tiene un tamaño de partícula medio de las partículas sólidas inferior a 1 pm, de forma ventajosa inferior a 1 pm, preferentemente inferior a 1 pm.

8. Composición de acuerdo con la reivindicación 7, caracterizada por que las partículas del homogenado tienen un tamaño de partícula de modo que un 9 % en peso de las partículas tienen un tamaño de partícula comprendido en el intervalo de tamaño de partícula medio de - 25 % hasta un tamaño de partícula medio de + 25 %.

9. Composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada por que dicho homogenado de células vegetales indiferenciadas y elicitadas in vitro contiene al menos una fitoalexina sintetizada mediante la elicitación in vitro de las células vegetales indiferenciadas.

1. Composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque dicho homogenado de células vegetales indiferenciadas y elicitadas es un homogenado de células vegetales indiferenciadas y elicitadas in vitro por un agente en el medio de cultivo, estando dicho homogenado básicamente exento de dicho agente después de la elicitación.

11. Composición de acuerdo con la reivindicación precedente, caracterizada porque las células indiferenciadas se elicitan in vitro por un agente volátil.

12. Composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque dicho homogenado de células vegetales indiferenciadas y elicitadas in vitro contiene al menos un compuesto terpénico o tánico o polifenólico, siendo sintetizado dicho compuesto mediante la elicitación in vitro de las células vegetales indiferenciadas en su medio de cultivo.

13. Composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada por que el homogenado de células vegetales indiferenciadas y elicitadas in vitro se presenta en forma de una suspensión viscosa o de un gel o de un polvo básicamente seco, estando dicha suspensión, gel o polvo de forma ventajosa en

una forma apta para su dispersión en la composición.

14. Composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada por que el homogenado de células es un homogenado de células de vid indiferenciadas y elicitadas in vitro.

15. Composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada por que contiene un homogenado de células indiferenciadas, cultivadas y elicitadas en su medio de cultivo in vitro, estando dicho homogenado de forma ventajosa básicamente exento de medios de cultivo.

16. Composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada por que contiene un homogenado de células indiferenciadas y elicitadas in vitro, conteniendo dicho homogenado al menos un ,1 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células indiferenciadas elicitadas homogenadas, en particular al menos un ,2 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células indiferenciadas elicitadas homogenadas, preferentemente al menos un ,5 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células indiferenciadas elicitadas a un homogenadas.

17. Procedimiento de preparación de una composición de uso tópico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado por que las células vegetales indiferenciadas de al menos una especie elegida entre Salvia, Coleus, Rosmarinus, Ginkgo, Cannabis, Colchicum, Gloriosa, Asparagus, Arganier, Glycine, Medicago, Mungo, Erythrina, Oenothera, Papaver, Atropa, Datura, Solanum, Borago, Reseda, Amsonia, Catharantus, Pilocarpus, Digitalis, Coffea, Theobroma, Jasminum, Capsicum, Iris, vigne, taxus, séquoia, chlorophytum, cacao, psoralea coryilfolia, vitex negundo, commiphora wighii, eucalyptus punctata, lavandula angustifolia, citrus limón, vanilla planifolia, marrubium vulgare, pilocarpus jaborandi, roses, betula, thé y las mezclas de células de dichas especies, se ponen en un medio de cultivo con el fin de permitir un crecimiento de las células, por que dichas células vegetales diferenciadas se elicitan en su medio de cultivo durante un periodo de tiempo suficiente para la síntesis de una cantidad suficiente de metabolitos, y por que las células vegetales elicitadas del medio de cultivo se mezclan con uno o más excipientes para preparar una composición cosmética, homogeneizando las células antes y/o después de su mezcla con uno o varios excipientes y/o antes y/o después de una etapa de secado.

18. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 17, caracterizado por que dichas células elicitadas in vitro se someten a un secado, seguido de un a un homogenado.

19. Procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 17 y 18, caracterizado por que las células se elicitan en su medio de cultivo in vitro por medio de un agente, que después de la extracción de las células elicitadas del medio de cultivo y conservando la estructura de la membrana de las células no se vuelven encontrar

en las células elicitadas.

2. Procedimiento en el que las células vegetales indiferenciadas se ponen en cultivo in vitro, se elicitan en el medio de cultivo in vitro, se secan, a continuación se homogeneizan (probablemente después de una o varias etapas de lavado/secado) de al menos una especie elegida entre Salvia, Coleus, Rosmarinus, Ginkgo, Cannabis, Colchicum, Gloriosa, Asparagus, Arganier, Glycine, Medicago, Mungo, Erythrina, Oenothera, Papaver, Atropa, Datura, Solanum, Borago, Reseda, Amsonia, Catharantus, Pilocarpus, Digitalis, Coffea, Theobroma, Jasminum, Capsicum, Iris, vigne, taxus, séquoia, chlorophytum, cacao, psoralea coryilfolia, vitex negundo, commiphora wighii, eucalyptus punctata, lavandula angustifolia, citrus limón, vanilla planifolia, marrubium vulgare, pilocarpus jaborandi, roses, betula, thé y las mezclas de células de dichas especies, y se dispersan en una composición para el tratamiento del cuerpo humano.

21. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación precedente, caracterizado por que las células se secan por liofilización antes de someterlas a un a un homogenado.

22. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 2 o 21, caracterizado porque se usa un agente o un medio de elicitación que no forma una impureza en el homogenado secado de células indiferenciadas y elicitadas.

23. Procedimiento de obtención de fitoalexina(s), en el que:

- las células vegetales indiferenciadas se ponen en un medio de cultivo de al menos una especie elegida entre Salvia, Coleus, Rosmarinus, Ginkgo, Cannabis, Colchicum, Gloriosa, Asparagus, Arganier, Glycine, Medicago, Mungo, Erythrina, Oenothera, Papaver, Atropa, Datura, Solanum, Borago, Reseda, Amsonia, Catharantus, Pilocarpus, Digitalis, Coffea, Theobroma, Jasminum, Capsicum, Iris, vigne, taxus, séquoia, chlorophytum, cacao, psoralea coryilfolia, vitex negundo, commiphora wighii, eucalyptus punctata, lavandula angustifolia, citrus limón, vanilla planifolia, marrubium vulgare, pilocarpus jaborandi, roses, betula, thé y las mezclas de células de dichas especies,

- después y/o durante el cultivo, las células indiferenciadas se inducen en el medio de cultivo,

- las células indiferenciadas y elicitadas se separan del medio de cultivo,

- las células indiferenciadas elicitadas se someten probablemente a uno o varios lavados,

- las células indiferenciadas y elicitadas se secan de forma ventajosa, preferentemente se liofilizan,

- las células ¡ndlferencladas, ellcltadas con el fin de formar un a un homogenado, se homogenelzan y

- el homogenado se somete a una extracción para extraer una o varias fitoalexinas del homogenado, probablemente después de una etapa de introducción de las células homogenadas en un medio, en particular un medio acuoso y/o alcohólico.

24. Procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 17 a 23, caracterizado por que la etapa de ellcltaclón de dichas células vegetales diferenciadas en su medio de cultivo in vitro se controla, con el fin de obtener un medio que contiene al menos un ,1 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células vegetales ¡ndlferencladas y ellcltadas, en particular al menos un ,2 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células.

25. Homogenado de células vegetales ¡ndlferencladas de al menos una especie elegida entre Salvia, Coleus, Rosmarinus, Ginkgo, Cannabis, Colchicum, Gloriosa, Asparagus, Arganier, Glycine, Medicago, Mungo, Erythrina, Oenothera, Papaver, Atropa, Datura, Solanum, Borago, Reseda, Amsonia, Catharantus, Pilocarpus, Digitalis, Coffea, Theobroma, Jasminum, Capsicum, Iris, vigne, taxus, séquoia, chlorophytum, cacao, psoralea coryilfolia, vitex negundo, commiphora wighii, eucalyptus punctata, lavandula angustifolia, citrus limón, vanilla planifolia, marrubium vulgare, pilocarpus jaborandi, roses, betula, thé y las mezclas de células de dichas especies, ellcltadas en el medio de cultivo in vitro, después secadas, en el que dicho homogenado contiene al menos una fitoalexlna que comprende al menos un 95 % en peso, de forma ventajosa al menos un 97 % en peso, preferentemente al menos un 99 % en peso del conjunto de las materias secas que se originan en las células vegetales homogenadas ¡ndlferencladas y ellcltadas in vitro, estando dicho homogenado en una forma apta para su dispersión en una composición cosmética y/o farmacéutica.

26. Homogenado de acuerdo con la reivindicación 25, caracterizado por que está exento de agente de elicitación y/o de medio de cultivo.

27. Homogenado de células vegetales de acuerdo con la reivindicación 25 o 26, caracterizado porque presenta un tamaño de partícula medio Inferior a 1 pm.

28. Homogenado de células vegetales de acuerdo con una de las reivindicaciones 25 a 27, caracterizado por que contiene al menos un ,1 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células, en particular al menos un ,2 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células, preferentemente al menos un ,5 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células.

29. Composición para aplicación tópica, en particular composición cosmética, que contiene células vegetales indiferenciadas, caracterizada por que la composición contiene al menos un homogenado que contiene al menos une fitoalexina, comprendiendo dicho homogenado al menos un 95 %, de forma ventajosa al menos un 97 %, preferentemente al menos un 99 % en peso del conjunto de materias secas que se originan en las células vegetales indiferenciadas y elicitadas in vitro, en la que el homogenado contiene al menos un ,1 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células, en particular al menos un ,2 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células, preferentemente al menos un ,5 % en peso de estilbenos con respecto al peso seco de las células, siendo dicho homogenado un homogenado de una o de las células vegetales indiferenciadas, elicitadas y después secadas elegidas entre el grupo formado por las especies siguientes: Salvia, Coleus, Rosmarinus, Ginkgo, Cannabis, Colchicum, Gloriosa, Asparagus, Arganier, Glycine, Medicago, Mungo, Erythrina, Oenothera, Papaver, Atropa, Datura, Solanum, Borago, Reseda, Amsonia, Catharantus, Pilocarpus, Digitalis, Coffea, Theobroma, Jasminum, Capsicum, Iris, vigne, taxus, séquoia, chlorophytum, cacao, psoralea coryilfolia, vitex negundo, commiphora wighii, eucalyptus punctata, lavandula angustifolia, citrus limón, vanilla planifolia, marrubium vulgare, pilocarpus jaborandi, roses, betula, thé, y sus mezclas.


 

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