Composición que comprende plasma de sangre de cordón umbilical para el tratamiento de patologías de la superficie ocular y procedimiento de obtención de la misma.

La presente invención se refiere a una composición en forma de colirio que comprende plasma de sangre de cordón umbilical entre un 20% y un 80% (v/v) de plasma diluido en suero salino fisiológico, a su utilización en el tratamiento de diferentes patologías de la superficie ocular en humanos. Además, la presente invención se refiere al procedimiento de preparación de dicha composición que comprende las etapas de: (a) descongelar plasma de entre 4 y 50 donantes para formar un "pool" de plasma; (b) inactivar e irradiar dicho "pool" de plasma; (c) diluir dicho plasma con suero salino fisiológico, hasta una concentración final de plasma entre 20% y 80% (v/v); y (d) envasar en condiciones estériles.

Composición que comprende plasma de sangre de cordón umbilical para el tratamiento de patologías de la superficie ocular y procedimiento de obtención de la misma.

La presente invención se refiere a una composición en forma de colirio que comprende plasma de sangre de cordón umbilical, a su utilización en el tratamiento de patologías de la superficie ocular en humanos. Además, la presente invención se refiere al procedimiento de preparación de dicha composición.

Entre los tratamientos terapéuticos convencionales para las patologías de la superficie ocular se incluyen la utilización, por ejemplo, de lágrimas artificiales, lentes de contacto terapéuticos, recubrimiento con membrana amniótica, tarsorrafia y factores de crecimiento tópicos. Recientemente se han desarrollado composiciones terapéuticas eficaces en el tratamiento de patologías de la superficie ocular en forma de colirios obtenidos a partir de suero autólogo y suero de sangre de cordón umbilical, así como colirios de plasma rico en plaquetas (PRP).

Desde que se abrió la posibilidad del empleo de la sangre de cordón umbilical para el tratamiento de pacientes que padecen enfermedades congénitas o adquiridas de la médula ósea, tales como las leucemias agudas o crónicas, ha aumentado a nivel mundial el número de personas que de forma altruista donan sangre de cordón umbilical y, por tanto, el número de bancos en los que se almacena de forma segura y controlada dicha sangre.

La sangre de cordón umbilical es colectada en el momento del parto de una manera conocida por un experto en la materia. Tras el nacimiento del niño y después de la sección del cordón umbilical, se realiza una simple punción del cordón umbilical. A continuación, dicha sangre se fracciona mediante centrifugación o filtración, en la que se obtienen dos capas diferenciadas: una capa en la que están presentes elementos formes tales como hematíes, leucocitos y plaquetas, que es el material de partida para el trasplante celular, y otra capa que se denomina plasma, que normalmente se desecha. Este plasma puede ser congelado a una temperatura de -80ºC.

La presente invención se basa en el descubrimiento sorprendente de que un colirio obtenido a partir de plasma de sangre proveniente del cordón umbilical, posee un efecto terapéutico eficaz sobre distintas patologías de la superficie ocular en humanos.

El uso de la composición de la presente invención presenta numerosas ventajas con respecto a los tratamientos convencionales. Una ventaja de la utilización del plasma de sangre de cordón umbilical es que, a diferencia de la sangre autóloga, está disponible de inmediato y, además, no requiere la extracción de sangre del paciente, lo que es complicado en ocasiones en el caso de pacientes pediátricos. Tampoco se requiere de un procesado posterior de dicha sangre, que hace que el tiempo de demora entre la prescripción del colirio autólogo y el inicio del tratamiento puede ser de varios días, e incluso semanas.

Otra ventaja adicional del uso del plasma de sangre de cordón umbilical, a diferencia del suero, es que el plasma es rico en factores de crecimiento tales como factor de crecimiento epidérmico (EGF), factor de crecimiento transformante-β (TGF-β), factor de crecimiento similar a insulina 1 (IGF1), factor de crecimiento nervioso (NGF), así como en vitamina A, fibronectina, sustancia P, antiproteasas tales como la α2 macrobulina, entre otras. Además, el plasma de sangre de cordón umbilical presenta una concentración elevada de citoquinas antiinflamatorias y factores plasmáticos y plaquetarios que inducen la proliferación, diferenciación, maduración y expansión celular en comparación con el suero autólogo.

Por lo tanto, la presente invención da a conocer una composición farmacéutica en forma de colirio que comprende plasma de sangre de cordón umbilical eficaz para el tratamiento de patologías de la superficie ocular.

La composición de la presente invención se puede preparar de una manera sencilla, en un procedimiento que comprende las siguientes etapas:

(a) descongelar plasma de entre 1 y 50 donantes, formando un "pool" de plasma en caso de que sea de más de 1 donante;

(b) opcionalmente inactivar y/o irradiar dicho plasma o "pool" de plasma;

(c) diluir dicho plasma con cualquier solución salina similar a suero fisiológico, hasta una concentración final de plasma entre 20% y 80% (v/v); y

(d) envasar en condiciones estériles.

La inactivación del plasma se puede realizar mediante azul de metileno o amotosaleno. La irradiación se lleva a cabo con rayos gamma a partir de una fuente de cesio 137, para evitar que los linfocitos viables provoquen alguna reacción adversa.

La concentración final del plasma en el colirio dependerá de aplicación final de la composición de la presente invención.

Entre las patologías de la superficie ocular que se pueden tratar con la composición de la presente invención se encuentran la queratoconjuntivitis neurotrófica por parálisis del trigémino, la úlcera corneal trófica secundaria a diabetes o a queratitis herpética, queratoconjuntivitis por exposición, queratoconjuntivitis seca (Síndrome de Sjögren y no Sjögren), insuficiencia límbica y problemas tróficos corneales (por ejemplo, diabetes, herpes previo), defectos epiteliales persistentes de cualquier etiología, queratoconjuntivitis atópica grave, erosión corneal recidivante, queratoconjuntivitis límbica superior, tratamiento postoperatorio en queratoplastia post herpética o por causticación.

La presente invención se describirá a continuación con más detalles en referencia a ejemplos de realización. Estos ejemplos, sin embargo, no están destinados a limitar el alcance técnico de la presente invención.

Ejemplos

Ejemplo 1

Preparación de un colirio que comprende plasma de cordón umbilical al 20% para el tratamiento de patología de la superficie ocular. Se obtuvo sangre de cordón umbilical y se envasó en una bolsa estéril con anticoagulante (CDP) y se conservó en fresco (entre 2 y 22ºC). El tiempo entre la obtención de la sangre de cordón umbilical y la preparación del colirio fue entre 12 y 44 horas.

La sangre de cordón umbilical se centrifugó a 1730 xg durante 10 minutos a 22ºC. A continuación se separo el plasma mediante prensa extractora y se tomó una muestra de 2-3 mL para a estudio serológico, que comprendía los ensayos de antígeno de superficie de hepatitis B, anticuerpos anti hepatitis B core, anticuerpos anti hepatitis C, anticuerpos anti VIH 1/2, anticuerpos anti Treponema pallidum, RNA VHC, RNA VIH1, DNA VHB per NAT, anticuerpos anti HTLV I/II, y anticuerpos anti Trypanosoma cruzi.

La bolsa que contiene el plasma se pesa y se añade PBS mediante punzón para obtener una concentración final de plasma de cordón umbilical del 20%. A continuación, el volumen total obtenido se añade en recipientes estériles en alícuotas de 5 mL y dichos recipientes se cierran herméticamente y se codifican.

El colirio preparado se pone en cuarentena y se libera una vez obtenido los resultados de los ensayos siguientes: serología materna negativa, aunque se admite positividad a anticuerpos anti CMV IgG, serología del plasma de cordón umbilical negativa, microbiología negativa para aerobios, anaerobios y hongos, contenido en leucocitos < 100 y contenido en hematíes < 6000. El colirio preparado tiene una caducidad de 3 años si se almacena a -80ºC.

Si bien la invención se ha descrito con respecto a ejemplos de realizaciones preferentes, éstos no se deben considerar limitativos de la invención, que se definirá por la interpretación más amplia de las siguientes reivindicaciones.

1. Composición farmacéutica que comprende plasma de sangre de cordón umbilical para utilizar en el tratamiento de patologías de la superficie ocular.

2. Composición farmacéutica que comprende plasma de sangre de cordón umbilical para el uso según la reivindicación 1, caracterizada porque dicha composición está en forma de colirio.

3. Composición farmacéutica que comprende plasma de sangre de cordón umbilical para el uso según la reivindicación 1, caracterizada porque la concentración de plasma se encuentra entre un 20% y un 80% (v/v).

4. Composición farmacéutica que comprende plasma de sangre de cordón umbilical para el uso según la reivindicación 1, caracterizada porque entre las patologías de la superficie ocular a tratar se encuentran la queratoconjuntivitis neurotrófica por parálisis del trigémino, la úlcera corneal trófica secundaria a diabetes o a queratitis herpética, queratoconjuntivitis por exposición, queratoconjuntivitis seca (Síndrome de Sjögren y no Sjögren), insuficiencia límbica y problemas tróficos corneales (por ejemplo, diabetes, herpes previo), defectos epiteliales persistentes de cualquier etiología, queratoconjuntivitis atópica grave, erosión corneal recidivante, queratoconjuntivitis límbica superior, tratamiento postoperatorio en queratoplastia post herpética o por causticación.

5. Procedimiento de preparación de una farmacéutica que comprende plasma de sangre de cordón umbilical para utilizar en el tratamiento de patologías de la superficie ocular que comprende las etapas de:

(a) descongelar plasma de entre 1 y 50 donantes, formando un "pool" de plasma en caso de que sea de más de 1 donante;

(b) opcionalmente inactivar y/o irradiar dicho plasma o "pool" de plasma;

(c) diluir dicho plasma con cualquier solución salina similar a suero fisiológico, hasta una concentración final de plasma entre 20% y 80% (v/v); y

(d) envasar en condiciones estériles.

6. Procedimiento, según la reivindicación 5, caracterizado porque la etapa opcional de inactivación del plasma se realiza con azul de metileno o amotosaleno.

7. Procedimiento, según la reivindicación 5 ó 6, caracterizado porque la etapa opcional de irradiación se lleva a cabo con rayos gamma a partir de una fuente de cesio 137.