CITOPROTECCIÓN POR FOSFOTIROSINA.

Uso de fosfotirosina para preparar una composición farmacéutica destinada a proteger material biológico - contra mutagénesis,

degeneración, atrofia, fibrotización, necrosis y melanoma maligno desencadenados por la radiación, preferentemente de tipo ionizante, y/o la luz ultravioleta como factores citotóxicos, - contra la inhibición de la regeneración de las células sanguíneas y de las mucosas, así como de la piel y sus anexos, desencadenada por agentes citostáticos como factores citotóxicos.

La presente invención se refiere a la protección de material biológico contra factores perjudiciales para las células.

Es sabido que hay múltiples y diversos factores capaces de dañar la integridad de materiales biológicos tales como p.ej. células, tejidos u organismos de animales o humanos. Estos factores pueden ser p.ej. radiaciones energéticas o ionizantes, como p.ej. radiactividad, rayos X, radiación cósmica, etc. o luz ultravioleta (luz UV). Las radiaciones ionizantes figuran por una parte entre los factores medioambientales nocivos, pero por otra parte también pueden ser útiles en medicina. A este respecto cabe mencionar la diagnosis por rayos X, la medicina nuclear o la radioterapia. Esta radiación energética se caracteriza por su capacidad de ionizar moléculas.

Como factores perjudiciales para las células son asimismo relevantes los agentes químicos, p.ej. en forma de contaminantes del medio ambiente, pero también aquellos que se usan como sustancias terapéuticas en el marco de los tratamientos médicos, p.ej. los agentes citostáticos. Estos últimos forman un grupo químicamente heterogéneo de sustancias farmacológicas citotóxicas que impiden o retardan notablemente la citogénesis de células funcionalmente activas al interferir de diversas maneras en su metabolismo. Los agentes citostáticos se usan principalmente en la terapia tumoral por su eficacia frente al aumento de la tasa de división celular en las células tumorales respecto a las células normales. Se conocen varios grupos de agentes citostáticos: agentes alquilantes (p.ej. cisplatino); antimetabolitos (p.ej. antagonistas del ácido fólico); inhibidores de la mitosis; antibióticos (p.ej. bleomicina); enzimas (p.ej. Lasparaginasa), y otros.

Estos factores pueden causar daños a todos los niveles de la estructura biológica: por efecto de estos factores se producen reacciones a nivel molecular o macromolecular (p.ej. de los ácidos nucleicos), a nivel celular, reacciones hísticas o reacciones de todo el organismo.

Los daños provocados por radiación energética o ultravioleta son, por ejemplo, la alteración del ADN, es decir la mutagénesis, que puede causar la formación de tumores, así como la degeneración, atrofia, fibrotización o necrosis de los tejidos expuestos a una mayor radiación.

Así, por ejemplo, la formación del melanoma maligno es favorecida por una elevada exposición de la piel a la radiación solar.

Como se ha dicho al comienzo, el organismo humano se expone a intensidades de radiación especialmente altas, no solo durante una fuerte exposición a la luz solar, sino también, por expresa indicación médica, en el caso de diagnóstico por rayos X o radioterapia para enfermedades tumorales. En este aspecto también están especialmente en situación de riesgo los radiólogos, los dentistas, los cirujanos traumatólogos, los asistentes técnicos radiológicos y los trabajadores de las fábricas de tubos de rayos X.

El uso en el organismo humano de los agentes citostáticos arriba citados, considerados especialmente importantes, es ante todo perjudicial, porque las diferencias entre células normales y tumorales relativas a la tasa de división celular no son suficientes como punto de ataque específico y selectivo al tumor. De ahí resultan los indeseados efectos secundarios de los agentes citostáticos, sobre todo la rápida proliferación de los tejidos por inhibición general de la regeneración. Afecta especialmente a la formación de las células sanguíneas, a los epitelios de las mucosas, cuya inhibición regenerativa produce trastornos gastrointestinales, y también a la piel y anexos cutáneos cuya inhibición regenerativa produce alopecia.

De la patente DE 197 20 339 A1 proviene el uso de fosfotirosina para preparar una composición dermatológica destinada a la inhibición y tratamiento del bronceado producido por la radiación UV. Sin embargo los autores no dan ninguna información acerca de cómo debe tener lugar una inhibición o tratamiento adecuado de las lesiones de la piel causadas por la radiación UV.

Con estos antecedentes el objeto de la presente invención es proporcionar una protección del material biológico frente a las patologías mencionadas al comienzo, que pueden ser desencadenadas por factores lesivos para las células como la radiación, preferentemente de tipo ionizante, o la luz ultravioleta y los productos químicos, preferentemente los citostáticos.

La presente invención resuelve este objetivo con el uso de fosfotirosina para preparar una composición farmacéutica destinadas a dichos fines.

La fosfotirosina (en lo sucesivo también P-Tyr) es un aminoácido modificado, derivado del aminoácido aromático tirosina, cuyo grupo hidroxilo del fenilo de la cadena lateral está fosforilado. La fosfotirosina está descrita en un gran número de manuales de bioquímica, biología molecular y química de proteínas.

Los inventores han encontrado sorprendentemente que este aminoácido fosforilado protege el material biológico de factores lesivos para las células.

En el sentido de la presente invención se entiende como fosfotirosina tanto la O-fosfo-L-tirosina (L-3-[4-hidroxifenil]alanin-4'-fosfato) como también la O-fosfo-D-tirosina (D-3-[4-hidroxifenil]alanin-4'-fosfato) y la O-fosfo-DLtirosina (DL-3-[4-hidroxifenil]alanin-4'-fosfato).

En este contexto se entiende como material biológico cualquier unidad biológica estructurada, como p.ej. una célula (en cultivo o formado parte de un tejido), tejidos, órganos, organismos, etc.

Según la presente invención como factores lesivos para las células hay que entender las influencias negativas sobre la integridad y/o viabilidad del material biológico, es decir, radiación ionizante (radiación radiactiva, rayos X, radiación cósmica, etc.), luz ultravioleta, productos químicos de cualquier tipo, sobre todo los agentes citostáticos (por ejemplo compuestos alquilantes como el cisplatino).

El uso de fosfotirosina se refiere a poner en contacto este aminoácido modificado -incluido p.ej. en un preparado galénico -con material biológico, p.ej. aplicándolo sobre un organismo o incorporándolo al mismo, o a ponerlo en contacto in vitro, bajo cualquier forma, con material biológico, p.ej. con células aisladas, tejidos u órganos. La puesta en contacto con la fosfotirosina puede tener lugar antes, durante o después de la exposición a factores citotóxicos.

En el sentido de la presente invención, protección del material biológico significa que la fosfotirosina disminuye o evita los daños provocados por los factores citotóxicos mencionados.

Una de las ventajas del uso de fosfotirosina, según la presente invención, es que la fosfotirosina se puede producir o adquirir económicamente en grandes cantidades, pues no es necesaria ninguna síntesis peptídica ni una costosa purificación proteica.

Además, en comparación con péptidos o proteínas, la fosfotirosina es mucho más resistente a la degradación. Por tanto la preparación galénica resulta considerablemente más fácil y estable.

El pequeño tamaño molecular de la fosfotirosina facilita su absorción por las células tratadas, produciendo un buen efecto citoprotector. Por la misma razón no cabe esperar ningún riesgo de reacciones inmunológicas en caso de incorporar o aplicar fosfotirosina a un organismo.

También por ello son sorprendentes las propiedades citoprotectoras de la fosfotirosina, pues hasta la fecha se le atribuían actividades muy diferentes. Así, por ejemplo, Shrikant Mishra y Anne W. Hamburger han demostrado que la fosfotirosina inhibe el crecimiento de las células carcinómicas de mama y riñón humanas ("O-phospo-L-tyrosine inhibits cellular growth by activating protein tyrosine phosphatases" [La O-fosfo-L-tirosina inhibe el crecimiento celular por activación de las proteína tirosina fosfatasas], Cancer Research 53, S. 557-563, 1993) y que esta inhibición del crecimiento depende de la dosis de P-Tyr ("Exogenous phosphotyrosine modulates epidermal growth factor receptor tyrosine phosphorylation" [La fosfotirosina exógena modula la fosforilación de tirosina del receptor del factor de crecimiento epidérmico], Carcinogenesis 14, S. 269-273, 1993). Este grupo de trabajo ha demostrado la inhibición por fosfotirosina del crecimiento celular en otras dos líneas de células tumorales, una de células de carcinoma hepático y otra de células NIH3T3 transformadas por src ("Association of inhibition... [Seguir leyendo]

1. Uso de fosfotirosina para preparar una composición farmacéutica destinada a proteger material biológico -contra mutagénesis, degeneración, atrofia, fibrotización, necrosis y melanoma maligno desencadenados por la radiación, preferentemente de tipo ionizante, y/o la luz ultravioleta como factores citotóxicos, -contra la inhibición de la regeneración de las células sanguíneas y de las mucosas, así como de la piel y sus anexos, desencadenada por agentes citostáticos como factores citotóxicos.

2. Uso según la reivindicación 1, para proteger la piel.

3. Uso según la reivindicación 1 o 2 en el marco de una radioterapia para pacientes con tumores.

4. Uso según una de las reivindicaciones 1 a 3 en el marco de una quimioterapia para pacientes con tumores.

5. Uso de fosfotirosina para preparar una composición farmacéutica destinada a proteger células sanas -contra mutagénesis, degeneración, atrofia, fibrotización, necrosis y melanoma maligno en el marco de un tratamiento profiláctico y/o coadyuvante de los pacientes tratados con radioterapia, -contra la inhibición de la regeneración de las células sanguíneas y de las mucosas, así como de la piel y sus anexos, en el marco de un tratamiento profiláctico y/o coadyuvante de la quimioterapia en los pacientes con tumores.

6. Medio de cultivo que contiene fosfotirosina y, dado el caso, otras sustancias tampón, vehículos, sustancias auxiliares y/o aditivos habituales, caracterizado porque el contenido de fosfotirosina está comprendido en un intervalo de concentración de 1 hasta 100 µM.

**(Ver fórmula)**

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Citoprotección relativa

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de número de clones

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