Cepas de bacterias de ácido láctico que presentan propiedades probióticas, y composiciones que las comprenden.

Cepas bacterianas de ácido láctico adecuadas para la restauración de la microflora intestinal humana oanimal,

las cuales tienen in vitro unos valores de adhesión iguales o mayores que los valores máximos conocidospara cada especie correspondiente y teniendo un valor de co-adhesión total no inferior a la suma de los valores deadhesión de cada cepa a las células del epitelio intestinal detectadas para cada una de las cepas ensayadasindividualmente, caracterizadas porque, se seleccionan de las cepas que tienen el número de depósito DSM 16104 yel número de depósito DSM 16105.

Cepas de bacterias de ácido láctico que presentan propiedades probióticas, y composiciones que las comprenden La presente invención se refiere a la selección y al empleo de cepas bacterianas adecuadas para la preparación de alimentos y suplementos alimenticios para el aumento o restauración de la microflora intestinal (microflora del intestino) .

ESTADO ACTUAL DE LA TECNICA

Es conocido que varias cepas bacterianas, por ejemplo, las cepas bacterianas de ácido láctico (LAB) entre las cuales, las que pertenecen al género Lactobacillus y Bifidobacterium, son componentes normales de la microflora intestinal humana y animal.

La microflora intestinal comprende varias especies bacterianas (la microflora intestinal humana, por ejemplo está representada por más de 500 especies de bacterias) y contribuye significativamente al mantenimiento de un buen estado de salud del anfitrión. Además es conocido que las deficiencias o daños a la microflora intestinal tanto en los humanos como en los distintos animales, están a menudo correlacionados con un aumento de las enfermedades, como por ejemplo, las infecciones del tracto gastrointestinal, la enfermedad del intestino irritable, la colitis ulcerativa,

las alergias alimentarias, las diarreas inducidas por los antibióticos, la enfermedad cardiovascular, y algunas clases de tumores.

Las características beneficiosas de varias bacterias, como por ejemplo, los lactobacilos y las bifidobacterias han sido reconocidas en su papel de componentes normales de la microflora intestinal, así como también en los organismos administrados como probióticos.

En particular, Ouwehand et al., en LETTERS IN APPLIED MICROBIOLOGY ("Literatura sobre microbiología aplicada") , vol. 30 nº 1 Enero de 2000, páginas 10-13, describe las propiedades del Bifidobacterium lactis Bb12, Haller et al., en SYSTEMATIC AND APPLIED MICROBIOLOGY ("Microbiología sistemática y aplicada) , vol 24, nº 2,

2001 páginas 218-226, describe las propiedades metabólicas y funcionales de las Lactic Acid Bacteria ("bacterias del ácido láctico") en el sistema gastrointestinal humano, y Madsen et al., in GASTROENTEROLOGY vol. 121 nº 3 Septiembre 2001 páginas 580-591 describe los efectos de las bacterias probióticas sobre la función barrera del epitelio intestinal ratonil y humano.

Las cepas de estos organismos se usan habitualmente tanto para humanos como para animales, como productos terapéuticos, probióticos o añadidas a productos alimenticios debido a sus actividades en la mejora de la salud.

La utilidad de estos microorganismos, los cuales pueden ser administrados por medio de composiciones farmacéuticas o a través de la toma de alimentos probióticos que los contienen, reside, por ejemplo, en su capacidad

de colonizar la mucosa intestinal adheriéndose a sus células, reemplazando cualquier especie patógena hacia la cual desarrollan un comportamiento competitivo en la colonización. Por lo tanto, la capacidad de las cepas administradas para adherirse a las mucosas juega claramente un papel clave en la eficacia de las mismas, dado que aumenta las probabilidades de que las cepas que exhiban una alta capacidad de adhesión pueden reemplazar o prevenir la adhesión de patógenos mediante una acción competitiva.

Además, se ha descubierto que la microflora intestinal en los ancianos experimenta modificaciones con respecto a la de los individuos adultos más jóvenes o la de los jóvenes. Estas modificaciones como por ejemplo, la menor presencia de algunos géneros como por ejemplo, las bifidobacterias o algunas especies particulares, como por ejemplo, varias especies de lactobacilos, parecen estar directamente correlacionadas con una mayor susceptibilidad

de los individuos ancianos a las formas clínicas indicadas más arriba (S.Silvi et al., Journal of Food Engineering ("Revista de ingeniería de los alimentos") , volumen 56, páginas 195 – 200, 2003) .

La composición de la microflora en los ancianos confirma además el hecho de que existen situaciones, algunas de ellas fisiológicas, en las cuales la microflora intestinal se halla en un estado comprometido con respecto a la 55 microflora óptima. Por lo tanto es un objeto de la presente descripción, el aislar nueva cepas probióticas que presentan características como por ejemplo ofrecer una colonización óptima, por lo tanto capaz de dar efectos beneficiosos a medio plazo en la restauración de la microflora intestinal.

RESUMEN DE LA INVENCION

La presente invención se refiere a cepas bacterianas de ácido láctico como se describe en la reivindicación 1, a una composición farmacéutica o veterinaria como se describe en la reivindicación 4, a un procedimiento para la preparación de una composición farmacéutica o veterinaria como se describe en la reivindicación 5, a un alimento probiótico o un suplemento alimenticio, como se describe en la reivindicación 6, a un procedimiento para la preparación de un alimento probiótico o un suplemento alimenticio como se describe en la reivindicación 8, y a su empleo, como se describe en la reivindicación 9. Versiones adicionales de la invención están descritas en las reivindicaciones restantes.

Con el fin de aislar y proporcionar nuevas cepas de bacterias LAB, en la presente descripción se han tenido en cuenta criterios de selección ya conocidos, conjuntamente con nuevos criterios de selección. Los criterios ya conocidos considerados son: la resistencia a los ácidos requerida para que las bacterias sobrevivan pasando al interior del estómago; la resistencia a las sales biliares, necesaria también para la supervivencia de las bacterias dentro del tracto digestivo. Sin embargo, estas propiedades por sí mismas no aseguran la consecución del efecto deseado. Por el contrario, es decisiva la capacidad de las cepas de las bacterias para adherirse a la mucosa intestinal, una propiedad que ha sido considerada como un criterio de selección adicional. Como ya se ha indicado antes, una adhesión efectiva implica no solamente una colonización igualmente efectiva de la mucosa intestinal, sino también una fuerte competición frente a cualquier cepa patógena. Por lo tanto cuanto mayor sea la capacidad de adhesión, mayor será la efectividad de la cepa seleccionada en la substitución de patógenos o la prevención de su colonización. Sobre la base de este criterio, se seleccionan las cepas de bacterias caracterizadas por una alta adhesividad, es decir, aquellas cepas que tienen valores de adhesión iguales a, o mayores que, los valores máximos conocidos para cada especie de LAB.

Sin embargo, junto a los parámetros indicados más arriba, se consideró un nuevo criterio adicional de selección anteriormente desatendido, que permitía identificar cepas particularmente efectivas en la colonización de la mucosa intestinal. Es conocido que varias cepas de bacterias pueden inhibir el crecimiento de, o ser inhibidas en su crecimiento por, otras cepas cuando son co-inoculadas en un medio de cultivo. Por lo tanto, los autores de la presente invención han considerado la capacidad de co-adhesión de las cepas identificadas de acuerdo con los precedentes criterios, como un criterio de selección adicional. De hecho, no se ha estimado suficiente que cada una de las cepas seleccionadas tenga muy altos valores de adhesividad (o adhesión) a la mucosa intestinal; a pesar de ello, se ha estimado esencial que cada una de las cepas seleccionadas sea también capaz de mantener dichas propiedades en presencia de otras cepas seleccionadas de la misma manera, de forma que los valores totales de adhesión para pares de grupos de cepas seleccionadas sea por lo menos igual a la suma de los valores de adhesión medidos individualmente para cada cepa. Este resultado se alcanza cuando en la co- inoculación cada cepa tiene una adhesión inalterada o incluso aumentada, mientras que en el caso de que una adhesión disminuya con respecto a una o más cepas, esta tendrá que ser balanceada mediante un aumento de adhesión por las otras cepas.

La aplicación de dichos parámetros, además de los descritos en la presente, permite además perfeccionar la selección e identidad de aquellas cepas que tienen una muy alta probabilidad de adhesión también en presencia de otras cepas, co-inoculadas o naturalmente presentes en el intestino.

Esta propiedad ofrece una doble ventaja: la co-inoculación in vivo de dos o más bacterias seleccionadas conducirá a un espectro general de adhesión muy alto. Sin embargo, incluso la mera inoculación de una cepa individual tendrá probabilidades de una adhesión más alta, no solamente debido a su intrínseca alta efectividad, sino también debido a su capacidad de adhesión en presencia de otras cepas naturalmente pertenecientes... [Seguir leyendo]

1. Cepas bacterianas de ácido láctico adecuadas para la restauración de la microflora intestinal humana o animal, las cuales tienen in vitro unos valores de adhesión iguales o mayores que los valores máximos conocidos para cada especie correspondiente y teniendo un valor de co-adhesión total no inferior a la suma de los valores de adhesión de cada cepa a las células del epitelio intestinal detectadas para cada una de las cepas ensayadas individualmente, caracterizadas porque, se seleccionan de las cepas que tienen el número de depósito DSM 16104 y el número de depósito DSM 16105.

2. Las cepas bacterianas de acuerdo con la reivindicación 1, en forma liofilizada.

3. Las cepas bacterianas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, para emplear como medicamento.

4. Una composición farmacéutica o veterinaria que contiene las cepas bacterianas de acuerdo con la reivindicación 3, y los excipientes farmacéuticamente aceptables y, opcionalmente, cepas bacterianas adicionales y/o principios activos.

5. Un procedimiento para la preparación de una composición farmacéutica o veterinaria de acuerdo con la 20 reivindicación 4, caracterizado porque, se mezclan las cepas bacterianas de acuerdo con la reivindicación 3, con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables y, opcionalmente, con cepas bacterianas adicionales y/o principios activos.

6. Un alimento probiótico o un suplemento alimenticio, en forma líquida, en forma líquida espesada, en forma semisólida, en forma sólida o en forma de polvo, la cual comprende las cepas bacterianas de acuerdo con las reivindicaciones 1 ó 2, ingredientes alimenticios adecuados, y, opcionalmente, conservantes, acidificantes, antioxidantes, cepas bacterianas probióticas adicionales, suplementos alimenticios y/o excipientes.

7. El alimento o el suplemento alimenticio de acuerdo con la reivindicación 6, caracterizado porque, está basado 30 en un producto lácteo.

8. Un procedimiento para la preparación de un alimento probiótico o un suplemento alimenticio, de acuerdo con las reivindicaciones 6 ó 7, caracterizado porque, se mezclan las cepas bacterianas de acuerdo con las reivindicaciones 1 ó 2, con ingredientes alimenticios adecuados y, opcionalmente, con conservantes, acidificantes,

antioxidantes, cepas bacterianas probióticas adicionales, suplementos alimenticios y/o excipientes.

9. Empleo de las cepas bacterianas de acuerdo con las reivindicaciones 1 ó 2, para la preparación de alimentos probióticos.