Bacterias del ácido láctico que mejoran la inmunidad.
Un cultivo biológicamente puro de L. rhamnosus HN001 AGAL número de depósito NM97/09514 fechado el 18 deagosto de 1.997.
Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E10163944.
Solicitante: NEW ZEALAND DAIRY BOARD.
Nacionalidad solicitante: Nueva Zelanda.
Dirección: PASTORAL HOUSE 25 THE TERRACE WELLINGTON 1 NUEVA ZELANDA.
Inventor/es: GILL,HARSHARNJIT S, SMART,JOHN B, GOPAL,PRAMOD K.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- A23C19/00 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A23 ALIMENTOS O PRODUCTOS ALIMENTICIOS; SU TRATAMIENTO, NO CUBIERTO POR OTRAS CLASES. › A23C PRODUCTOS LACTEOS, p. ej. LECHE, MANTEQUILLA, QUESO; SUCEDANEOS DE LA LECHE O DEL QUESO; SU FABRICACION (obtención de composiciones a base de proteínas para la alimentación A23J 1/00; preparación de péptidos, p. ej. de proteinas, en general C07K 1/00). › Queso; Preparados a base de queso; Fabricación de estos productos (sucedáneos del queso A23C 20/00; caseína A23J 1/20).
- A23C9/12 A23C […] › A23C 9/00 Preparados a base de leche; Leche en polvo o preparados a base de leche en polvo (A23C 21/06 tiene prioridad; conservación A23C 3/00; leche chocolatada A23G 1/00; helados o mezclas para la preparación de helados A23G 9/00; pudins o postres o postres hechos con polvos secos A23L 9/10). › Preparados a base de leche fermentada; Tratamientos que utilizan microorganismos o enzimas (preparados a base de suero A23C 21/00).
- A23C9/123 A23C 9/00 […] › que utilizan solamente microorganismos de la familia de las lactobacterias; Yogur (A23C 9/13 tiene prioridad).
- A23C9/127 A23C 9/00 […] › que utilizan microorganismos de la familia de las lactobacterias y otros microorganismos o enzimas, p. ej. kéfir, kumis (A23C 9/13 tiene prioridad).
- A23L1/24
- A61K35/74 A […] › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 35/00 Preparaciones medicinales que contienen sustancias de constitución indeterminada o sus productos de reacción. › Bacterias (uso terapéutico de una proteína de la bacteria A61K 38/00).
- C12N1/20 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Bacterias; Sus medios de cultivo.
- C12R1/00 C12 […] › C12R SISTEMA DE INDEXACION ASOCIADO A LAS SUBCLASES C12C - C12Q, RELATIVO A LOS MICROORGANISMOS. › Microorganismos.
- C12R1/225 C12R […] › C12R 1/00 Microorganismos. › Lactobacillus.
- C12R1/23 C12R 1/00 […] › Lactobacillus acidophilus.
PDF original: ES-2399324_T3.pdf
Fragmento de la descripción:
Bacterias del ácido láctico que mejoran la inmunidad
Campo técnico
Esta invención se refiere a nuevas cepas de bacterias del ácido láctico y su uso en la mejora de la inmunidad.
Técnica anterior
El consumo de productos que contienen bacterias del ácido láctico (BAL) está asociado a una serie de beneficios para la salud incluyendo la mejora de la inmunidad. Hay cientos de cepas de bacterias del ácido láctico pero sólo algunas cepas presentan propiedades que estimulan la salud. La capacidad de estas bacterias para tolerar ácidos y sales biliares, adheridas a células epiteliales de las mucosas y sobrevivir al paso por el tubo digestivo se considera un importante criterio para la selección de cepas que estimulan la salud. Sólo se han identificado hasta la fecha algunas cepas de bacterias del ácido láctico con beneficios para la salud demostrados.
Se conocen cepas de BAL que presentan buena adhesión a las células del epitelio mucosal del intestino delgado que se prestan de ese modo a aplicaciones terapéuticas a partir de la Patente de Nueva Zelanda 248057. Los microorganismos descritos en esta patente mejoran tanto la inmunidad natural (función de los fagocitos) como la inmunidad adquirida (respuestas de los anticuerpos y respuestas de proliferación de linfocitos) .
Es deseable que haya otras bacterias BAL que mejoren un amplio espectro de respuestas inmunitarias incluyendo la función de los fagocitos.
Es un objeto de esta invención ir de algún modo a conseguir estas desideratas o al menos ofrecer al público una elección útil de bacterias del ácido láctico que mejoren la inmunidad.
Saxelin, M., 1.997, indica que la cepa Lactobacillus rhamnosus probiótica LGG (ATCC 53103) puede sobrevivir y adherirse a células en el tubo digestivo, tratar o evitar trastornos intestinales tales como los causados por rotavirus y se pueden usar con seguridad en alimentos funcionales y clínicos (Saxelin M. 1.997. Lactobacillus GG – una cepa probiótica humana con amplia documentación clínica. Food Rev. Int. 13 (2) : 293-313) .
Descripción de la invención De acuerdo con esto, en un aspecto la invención se puede decir, en general, que consiste en un cultivo biológicamente puro de Lactobacillus rhamnosus HN001, AGAL número de depósito NM97/09514 fechado el 18 de agosto de 1.997.
En una realización dicha composición contiene dos o más cualesquiera de dichas cepas.
Preferiblemente dicho excipiente o diluyente fisiológicamente aceptable es un alimento.
Preferiblemente dicho alimento es uno cualquiera de: leche cultivada, yogur, queso, bebida láctea o polvo lácteo.
Alternativamente, dicha composición es una composición farmacéutica y dicho excipiente o diluyente es excipiente o diluyente farmacológicamente aceptable.
En otra realización se puede decir, en general, que la invención consiste en un método para mejorar la inmunidad natural y adquirida que comprende administrar a un mamífero uno cualquiera de los cultivos biológicamente puros anteriores en una proporción de dosis inmunoestimulante.
En otra realización, están presentes cultivos sustancialmente biológicamente puros de dos o tres de las cepas ya definidas.
Preferiblemente dicho cultivo se administra en la forma de una composición con un excipiente o diluyente fisiológicamente aceptable.
Preferiblemente dicho excipiente o diluyente fisiológicamente aceptable es un alimento.
Preferiblemente dicho alimento es: leche cultivada, yogur, queso, bebida láctea o polvo lácteo.
Breve descripción de los dibujos La Figura 1 muestra el efecto de enriquecimiento de ratones con producto fermentado con L. rhamnosus HN001 o producto no fermentado que contiene L. rhamnosus HN001 sobre la actividad de los fagocitos de leucocitos sanguíneos periféricos como se describe en el ejemplo 5. Se alimentaron ratones BALB/c con dietas a base de leche que contenía 109 cfu (al día) de L. rhamnosus HN001 en producto fermentado o no fermentado durante 14 días. La actividad fagocítica de los leucocitos sanguíneos periféricos se determinó usando citometría de flujo y Escherichia coli marcada con isotiocianato de fluoresceína. Los valores son media ± error estándar. Diferencias significativas (ANOVA, el programa SAS) del control: **P<0, 0001.
La Figura 2 muestra el efecto de enriquecimiento de ratones con L. rhamnosus HN001 vivos o L. rhamnosus HN001 matados por calor sobre la actividad fagocítica de leucocitos sanguíneos periféricos como se describe en el ejemplo 7. Se alimentaron ratones BALB/c con dietas a base de leche y se administraron por vía oral 109 cfu (al día) de L. rhamnosus HN001 vivos o matados por calor durante 14 días. La actividad fagocítica de los leucocitos sanguíneos periféricos y macrófagos peritoneales se determinó usando citometría de flujo y Escherichia coli marcada con isotiocianato de fluoresceína. Los valores son media ± error estándar. Diferencias significativas (ANOVA, el programa SAS) del control, **P<0, 0001.
La Figura 3 muestra el efecto de enriquecimiento de ratones con L. rhamnosus HN001 o B. lactis HN019 sobre traslocaciones de las bacterias en ratones expuestos a S. typhimurium como se describe en el ejemplo 8. Se expusieron ratones BALB/c no enriquecidos y enriquecidos con B. lactis HN019 o L. rhamnosus HN001 por vía oral a S. typhimurium después de enriquecimiento diario continuo. Seis días después se mataron humanitariamente los ratones expuestos y se recogieron los hígados y bazos para controlar la traslocación bacteriana. Después se cultivaron suspensiones de tejidos de los órganos recogidos en placas de agar MacConkey durante 24-48 h previas a enumeración. Los valores son media ± error estándar. Diferencias significativas (ANOVA, el programa SAS) del control: *P<0, 05.
La Figura 4 muestra el efecto de enriquecimiento de ratones con L. rhamnosus HN001 o B. lactis HN019 sobre la actividad fagocítica de leucocitos sanguíneos periféricos de ratones expuestos a S. typhimurium como se describe en el ejemplo 8. Se expusieron ratones BALB/c no enriquecidos y enriquecidos con B. lactis HN019 o L. rhamnosus HN001 por vía oral a S. typhimurium después de enriquecimiento diario continuo. La actividad fagocítica de los leucocitos sanguíneos periféricos se determinó seis días después de exposición usando citometría de flujo y Escherichia coli marcada con isotiocianato de fluoresceína. Los valores son media ± error estándar. Valores (media ± error estándar) con diferentes sobreescritos son significativamente diferentes (ANOVA, el programa SAS) : P<0, 01.
La Figura 5 muestra el efecto de enriquecimiento de ratones con L. rhamnosus HN001 o B. lactis HN019 sobre las respuestas proliferativas de los linfocitos del bazo de ratones expuestos a S. typhimurium como se describe en el ejemplo 8. Se expusieron ratones BALB/c no enriquecidos y enriquecidos con B. lactis HN019 o L. rhamnosus HN001 por vía oral a S. typhimurium después de enriquecimiento diario continuo. Seis días después de exposición se midieron las respuestas proliferativas de los linfocitos del bazo de manera colorimétrica después de la incorporación de 5-bromo-2'-desoxiuridina durante las 16 h finales de la incubación de 96 h. Los valores (media ± error estándar) con diferentes sobreescritos son significativamente diferentes (ANOVA, el programa SAS) : P<0, 01) .
Modos de llevar a cabo la invención Se han depositado cultivos liofilizados de las cuatro cepas de bacterias en los Laboratorios Analíticos del Gobierno Australiano (AGAL, por sus siglas en inglés) , El Laboratorio Regional de Nueva Gales del Sur, Calle Suakin 1, Pymble, NSW 2.073, Australia. Son detalles de los depósitos:
Cepa Número Fecha L. acidophilus HN017 NM97/09515 18 de agosto de 1.997
L. rhamnosus HN001 NM97/09514 18 de agosto de 1.997
B. lactis HN019 NM97/09513 18 de agosto de 1.997
L. rhamnosus HN067 NM97/01925 11 de febrero de 1.998
Se ha encontrado que las cuatro cepas identificadas anteriormente mejoran un amplio espectro de respuestas inmunitarias incluyendo respuestas inmunitarias tanto naturales como adquiridas.
Ejemplo 1 – Morfología y propiedades generales Se usaron análisis RAPD, secuenciación de ARNr 16S y análisis SDS-PAGE para confirmar la caracterización taxonómica de las cepas. También se encontró que L. acidophilus HN017 era genéticamente diferente de L. acidophilus (LC1) de la Patente de Nueva Zelanda Nº 248057.
Se usaron análisis RAPD, secuenciación de ARNr 16S y análisis SDS-PAGE para confirmar la caracterización taxonómica de L. rhamnosus HN067; cebadores específicos de las especies usados para caracterización... [Seguir leyendo]
Reivindicaciones:
1. Un cultivo biológicamente puro de L. rhamnosus HN001 AGAL número de depósito NM97/09514 fechado el 18 de agosto de 1.997. 5
2. Una composición de un cultivo biológicamente puro de L. rhamnosus HN001 AGAL número de depósito NM97/09514 fechado el 18 de agosto de 1.997 en una concentración inmunoestimuladora con un excipiente o diluyente fisiológicamente aceptable.
5. Una composición según la reivindicación 4, en la que dicho alimento es uno o más cualesquiera de: leche 20 cultivada, yogur, queso, bebida láctea o polvo lácteo.
6. Una composición según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes para uso en tratamiento.
7. Una composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para mejorar la inmunidad natural y 25 adquirida.
8. Uso de una composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la fabricación de un medicamento que mejorar la inmunidad natural y adquirida.
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