Anticuerpos monoclonales humanos contra IL-4 humana.

Un anticuerpo monoclonal específico de IL-4 humana que comprende un polipéptido de SEQ ID NO: 1 y un polipéptido de SEQ ID NO: 2.

Anticuerpos monoclonales humanos contra IL-4 humana.

La presente invención se refiere a anticuerpos que son específicos para la interlecucina-4 humana (hIL-4) .

Las enfermedades alérgicas como la dermatitis atópica, la rinitis alérgica, el asma y las alergias a los alimentos son asociadas característicamente con respuestas de las células Th2 exacerbadas para antígenos ambientales inocuos 5 (alérgenos) . Los alérgenos son capturados por las células que presentan antígenos, procesadas y presentadas en el contexto de moléculas MHC de Clase II para las células T auxiliares (Th) específicas de alérgenos. Las células Th específicas de alérgenos pertenecen al fenotipo Th2 y se desarrollan a partir de células T precursoras bajo la influencia de la interleucina-4 (IL-4) . Una vez que las células Th2 se activan, secretan IL-4 y la interleucina-13 (IL-13) , que junto con las señales de enlace de la superficie inducen a las células B a cambiar a células plasmáticas 10 productoras de IgE. Las Moléculas de IgE se unen a Fcï?¥R de alta afinidad en los mastocitos y, después del posterior encuentro con el alérgeno, inducen la activación de mastocitos y la liberación de mediadores de reacciones alérgicas. Las citocinas Th2 también promueven la supervivencia de eosinófilos y el crecimiento de mastocitos que, después de la desgranulación, también liberan citocinas Th2 adicionales capaces de aumentar la producción de IgE, la diferenciación de células Th2 y la supervivencia de eosinófilos. De esta manera, las células Th2 desempeñan un 15 papel fundamental en la inducción y el desarrollo de respuestas alérgicas y por lo tanto, antagonizar su desarrollo y/o sus funciones efectoras sería una manera eficaz de intervenir en las respuestas alérgicas.

IL-4 e IL-13 comparten muchas actividades biológicas debido al hecho de que ambas citocinas utilizan la cadena alfa (IL-4R) del receptor de IL-4 como un componente de sus respectivos complejos de receptores. Las señales de IL-13 a través de un complejo heterodimérico que consiste de una cadena de enlace de IL-13 (IL-13Rï?¡1) y la cadena 20 IL-4Rï?¡. IL-4 utiliza este complejo IL-4Rï?¡/IL-13Rï?¡1, llamado IL-4R de tipo II, como una alternativa al IL-4R de tipo I, que consiste en la cadena de IL-4Rï?¡ y la cadena ï?§ común (cï?§) compartida por los receptores de IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 y linfopoyetina estromal tímica (TSLP) . Debido a que las células T no expresan IL-13Rï?¡1, IL-13 en contraste con IL-4 no apoyan la proliferación de células T y no pueden inducir la diferenciación de células naïve humanas Th hacia el fenotipo Th2 (véase, por ejemplo J. E. de Vries et al., Encyclopedia of Hormones and related cell regulators, 25 Academic Press, 2002) . IL-4 desempeña un papel fundamental en la proliferación de células T y por lo tanto en el desarrollo y mantenimiento de las enfermedades alérgicas.

Los ratones deficientes del gen de IL-4 o ratones que carecen de IL-4 (véase por ejemplo Kuhn R. et al., Science, 1991 (5032) 707:10) o el factor de señalización en dirección 3â? STAT6 (véase, por ejemplo Kaplan M.H. et al., Immunity, 1996 (3) 313-9) no desarrollan un número significante de células Th2 y tienen respuestas de IgE 30 reducidas.

Ahora hemos encontrado anticuerpos con alta afinidad para IL-4 humana y un fuerte potencial inhibitorio de síntesis de IgE mediado por la IL-4 por medio de las células naïve B humanas.

Hemos encontrado un anticuerpo que comprende:

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 1 y la secuencia de 35 aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 2, o

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 9 y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 10, o

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 17 y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 18, o 40

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 25 y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 26, o

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 33 y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 34, o

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 41 y la secuencia de 45 aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido maduro de SEQ ID NO: 42.

En un aspecto, la presente invención provee un anticuerpo que comprende un polipéptido de SEQ ID NO: 1 y un polipéptido de SEQ ID NO: 2.

Adicionalmente hemos encontrado un anticuerpo que comprende:

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de SEQ ID NO: 1 que contiene además una secuencia líder (= SEQ ID NO: 3) y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de SEQ ID NO: 2 que además contiene una secuencia líder (= SEQ ID NO: 4) , o

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de SEQ ID NO: 9, que contiene además una 5 secuencia líder (= SEQ ID NO: 11) y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de SEQ ID NO: 10 que además contiene una secuencia líder (= SEQ ID NO: 12) , o

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de SEQ ID NO: 17, que contiene además una secuencia líder (= SEQ ID NO: 19) y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de SEQ ID NO: 18 que además contiene una secuencia líder (= SEQ ID NO: 20) , o 10

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de SEQ ID NO: 25, que contiene además una secuencia líder (= SEQ ID NO: 27) y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de SEQ ID NO: 26 que además contiene una secuencia líder (= SEQ ID NO: 28) , o

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de SEQ ID NO: 33, que contiene además una secuencia líder (= SEQ ID NO: 35) y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de SEQ ID 15 NO: 34 que además contiene una secuencia líder (= SEQ ID NO: 36) , o

- La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de un polipéptido de SEQ ID NO: 41, que contiene además una secuencia líder (= SEQ ID NO: 43) y la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de un polipéptido de SEQ ID NO: 42 que además contiene una secuencia líder (= SEQ ID NO: 44) .

Los anticuerpos proporcionados por la presente invención se denominan en lo sucesivo también como 20 "compuesto (s) de (de acuerdo con) la presente invención".

En otro aspecto, la presente invención provee un compuesto de la presente invención que es un anticuerpo monoclonal específico IL-4 humano (hIL-4 mAb) .

Un hIL-4 mAb es un anticuerpo que reconoce específicamente IL-4 humana, es decir, incluye los sitios de enlace de antígeno específicos para IL-4 humana, y que tiene específicamente sus CDRs, pero también otras partes de la 25 cadena pesada y ligera derivadas de inmunoglobulinas humanas.

El anticuerpo puede ser de cualquier isotipo, incluyendo IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4, preferiblemente del isotipo IgG1.

"Un fragmento del mismo" significa una parte de la secuencia variable de cadena pesada y ligera de un hIL-4 mAb, que conserva la misma capacidad de neutralización y/o especificidad de enlace de antígeno como la molécula de la que se derivan los fragmentos, por ejemplo, un fragmento Fab o un fragmento F (ab ') 2 derivado de hIL-4 mAb. 30

Un fragmento de Fab contiene la totalidad de las porciones de cadena ligera y amino terminal de la cadena pesada; un fragmento F (ab') 2 es el fragmento formado por 2 fragmentos Fab unidos por medio de enlaces disulfuro. Tales fragmentos se pueden obtener por medios convencionales, por ejemplo, escisión de los anticuerpos monoclonales con las apropiadas enzimas proteolíticas, la papaína y/o la pepsina, o por métodos recombinantes, y los fragmentos de los mismos son útiles como agentes terapéuticos y/o agentes profilácticos. 35

"Un análogo del mismo" significa un hIL-4 mAb con una secuencia de aminoácidos que se modifica por al menos un aminoácido fuera de las regiones CDR, por ejemplo, fuera de CDR1, CDR2 y CDR3 de la cadena pesada o fuera de CDR1', CDR2' y CDR3' de la cadena ligera. Dicha modificación incluye una modificación química, una sustitución o una transposición de uno o unos pocos aminoácidos, i.e., no más de 10 aminoácidos, la modificación permite que... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo monoclonal específico de IL-4 humana que comprende un polipéptido de SEQ ID NO: 1 y un polipéptido de SEQ ID NO: 2.

2. Los polinucleótidos aislados que codifican la secuencia de aminoácidos de un anticuerpo de la reivindicación 1.

3. El polinucleótido aislado que comprende un polinucleótido de SEQ ID NO: 5 y un polinucleótido de SEQ ID NO: 6. 5

4. Un vector de expresión que comprende los polinucleótidos de las reivindicaciones 2 o 3.

5. El anticuerpo de la reivindicación 1, para su uso como un producto farmacéutico.

6. El anticuerpo de la reivindicación 1, para su uso en el tratamiento de la dermatitis atópica, el asma alérgica o la rinitis alérgica.

7. Una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo de las reivindicaciones 1, en asociación con al 10 menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.