Anticuerpos anti-interferón alfa.

Anticuerpo humanizado que comprende un dominio variable de cadena ligera de SEC ID NO: 3 y un dominio variable de cadena pesada de SEC ID NO: 5

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E10007173.

Solicitante: GENENTECH, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1 DNA Way South San Francisco CA 94080-4490 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: PRESTA, LEONARD, G., CHUNTHARAPAI,ANAN, KIM,Jin K, STEWART,Timothy.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Medicamentos para el tratamiento de trastornos del... > A61P5/50 (para aumentar o potenciar la actividad de la insulina)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/13 (Inmunoglobulinas)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales,... > C12N5/10 (Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/09 (Tecnología del ADN recombinante)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen antígenos... > A61K39/395 (Anticuerpos (aglutininas A61K 38/36 ); Inmunoglobulinas; Inmunosuero, p. ej. suero antilinfocitario)
  • SECCION G — FISICA > METROLOGIA; ENSAYOS > INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION... > Investigación o análisis de materiales por métodos... > G01N33/53 (Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas... > C07K19/00 (Péptidos híbridos (Inmoglobulinas híbridas compuestas   solamente de inmoglobulinas C07K 16/46))
  • SECCION G — FISICA > METROLOGIA; ENSAYOS > INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION... > Investigación o análisis de materiales por métodos... > G01N33/68 (en los que intervienen proteínas, péptidos o aminoácidos)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales,... > C12N5/16 (Células animales)
  • SECCION G — FISICA > METROLOGIA; ENSAYOS > INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION... > Investigación o análisis de materiales por métodos... > G01N33/577 (en los que interviene anticuerpos monoclonados)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN... > Preparación de péptidos o de proteínas (proteína... > C12P21/08 (Anticuerpos monoclonales)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > A61P17/00 (Medicamentos para el tratamiento de problemas dermatológicos)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas... > Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales > C07K16/24 (contra citoquinas, linfoquinas o interferones)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Medicamentos para el tratamiento de problemas inmunológicos... > A61P37/06 (Inmunosupresores, p. ej. medicamentos para el tratamiento del rechazo en injertos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Medicamentos para el tratamiento de trastornos del... > A61P3/10 (para la hiperglucemia, p.ej. antidiabéticos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Medicamentos para el tratamiento de problemas inmunológicos... > A61P37/02 (Inmunomoduladores)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que... > C12N1/19 (modificados por la introducción de material genético extraño)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN... > Preparación de péptidos o de proteínas (proteína... > C12P21/02 (que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que... > C12N1/21 (modificados por la introducción de material genético extraño)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales,... > C12N5/20 (siendo uno de los integrantes de la fusión un linfocito B)
  • SECCION G — FISICA > METROLOGIA; ENSAYOS > INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION... > Investigación o análisis de materiales por métodos... > G01N33/564 (para complejos inmunológicos preexistentes o enfermedades autoinmunes)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que... > C12N1/15 (modificados por la introducción de material genético extraño)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/02 (Preparación de células híbridas por fusión de dos o más células, p. ej. fusión de protoplastos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Medicamentos para el tratamiento de trastornos del... > A61P5/14 (de las hormonas tiroideas, p. ej. T3, T4)

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Fragmento de la descripción:

Anticuerpos anti-interferón alfa Antecedentes de la invención Campo de la invención [0001] La presente invención se refiere en general a la generación y caracterización de anticuerpos monoclonales anti-IFN-a neutralizantes con una amplia reactividad contra varios subtipos de IFN-a. La presente invención se refiere además a la utilización de dichos anticuerpos anti-IFN-a en el diagnóstico y tratamiento de trastornos asociados con un aumento de la expresión de IFN-a, en particular, trastornos autoinmunes, tales como diabetes mellitus insulinodependiente (IDDM) y lupus eritematoso sistémico. (SLE) .

Descripción de la técnica anterior

Interferón-a (IFN-a)

Aunque los interferones se descubrieron inicialmente por su actividad antiviral, posteriores investigaciones han desentrañado una plétora de actividades reguladoras asociadas con estas potentes citoquinas. Los interferones tipo I forman una antigua familia de citoquinas que incluye IFN-a, IFN-º, IFN-o, IFN-w e IFN-τ (Roberts et al., J. Interferon Cytokine Res. 18: 805-816 [1998]) . Son codificadas por genes sin intrones y están ampliamente distribuidas entre los vertebrados. Mientras que el IFN-º es codificado por un único gen en primates y roedores, se han encontrado más de 10 y 15 subtipos diferentes de IFN-a en ratones y hombres, respectivamente. Otros interferones de tipo I son más limitados, por ejemplo, IFN-o en el cerdo, IFN-τ en ganado vacuno y ovejas, e IFN-w en ganado vacuno y humanos. De este modo, los interferones tipo I humanos comprenden múltiples miembros de la familia de IFN-a, y miembros individuales de las familias de IFN-º e IFN-w. Todos los IFN de tipo I parecen unirse a un único receptor que está comprendido de por lo menos dos proteínas que abarcan la membrana. Los interferones de tipo II, por otro lado, están representados por un único miembro, IFN-y, y se unen a un receptor distinto.

Aunque todos los IFN de tipo I, incluyendo IFN-a, muestran actividades antivirales y antiproliferativas y ayudan así al control de infecciones virales y tumores (Lefevre et al., Biochimie 80: 779-788 [1998]; Horton et al., Cancer Res. 59: 4064-4068 [1999]; Alexenko et al., J. Interferon Cytokine Res. 17: 769-779 [1997]; Gresser, J. Leukoc. Biol. 61: 567-574 [1997]) , existen varias enfermedades autoinmunes que están asociadas con una mayor expresión de IFNa, de manera destacada la diabetes melitus insulinodependiente y el lupus eritematoso sistémico (SLE) .

La diabetes tipo I, también conocida como diabetes autoinmune o diabetes melitus insulino dependiente (IDDM) , es una enfermedad autoinmune caracterizada por la destrucción selectiva de células º prancreáticas por linfocitos T autorreactivos (Bach, Endocr. Rev. 15: 516-542 [1994]; Castano y Eisenbarth, Annu. Rev. Immunol. 8: 647-679 [1990]; Shehadeh y Lafferty, Diabetes Rev. 1: 141-151 [1993]) . La patología de la IDDM es muy compleja implicando una interacción entre un suceso epigenético (posiblemente una infección viral) , las células º pancreáticas y el sistema inmunitario en un huésped genéticamente susceptible. Se han implicado un conjunto de citoquinas, incluyendo IFN-α e IFN-γ, en la patogénesis de la IDDM en humanos y en modelos animales de la enfermedad (Campbell et al., J. Clin. Invest. 87: 739-742 [1991]; Huang et al., Diabetes 44: 658-664 [1995]; Rhodes y Taylor, Diabetologia 27: 601-603 [1984]) . Por ejemplo, se han descrito la expresión de ARNm de IFN-α pancreático y la presencia de IFN-α inmunoreactivo en células º de pacientes con IDDM (Foulis et al., Lancet 2: 1423-1427 [1987]; Huang et al., [1995] supra; Somoza et al., J. Immunol. 153: 1360-1377 [1994]) . La expresión de IFN-α se ha asociado con la hiperexpresión de antígenos de clase IA del en islotes humanos (Foulis et al., [1987] supra; Somoza et al., [1994] supra) . En dos modelos de roedores de diabetes autoinmunes, la rata DP-BB propensa a la diabetes y los ratones tratados con estreptozotocina, la expresión de ARNm de IFN-a en islotes precede a la insulitis y la diabetes (Huang et al., Immunity 1: 469-478 [1994]) . Además, los ratones transgénicos que albergan una construcción de promotor de insulina humana-IFN-a desarrollan una diabetes hipoinsulinémica acompañada de insulitis (Stewart et al., Science 260: 1942-1946 [1993]) .

Parece que la expresión local de IFN-a por células de islotes pancreáticos en respuesta potenciales estímulos diabetogénicos, tales como virus, puede desencadenar el proceso insulítico. En concordancia con su papel como agente iniciador, se ha observado que el IFN-a indúcela molécula-1 de adhesión intercelular (ICAM-1) y HLA clase IA en células endoteliales de islotes humanos, que pueden contribuir a la infiltración de leucocitos durante la insulitis (Chakrabarti et al., J. Immunol. 157: 522-528 [1996]) . Además, el IFN-a facilita la estimulación de células T mediante la inducción de las moléculas coestimuladoras ICAM-1 y B7.2 en células presentadoras de antígenos en islotes (Chakrabarti et al., Diabetes 45: 1336-1343 [1996]) . Estos estudios indican colectivamente que la expresión temprana de IFN-a por células º puede ser un suceso crítico en el inicio de la diabetes autoinmune. Aunque existen artículos que implica el IFN-γ en el desarrollo de IDDM en modelos de roedores, existe una escasa correlación entre

la expresión de esta citoquina y la IDDM humana. De este modo, las células que expresan IFN-γ se pueden hallar en los islotes de un subgrupo de pacientes humanos seleccionados por una infiltración linfocítica significativa en los islotes. En un grupo de pacientes que no se seleccionaron por este criterio, no hubo una asociación obvia entre la expresión de IFN-γ y la IDDM humana.

En base a este nivel incrementado de expresión de IFN-α en pacientes con lupus eritematoso sistémico (SLE) , el IFN-a también se ha implicado en la patogénesis de SLE (Ytterberg y Schnitzer, Arthritis Rheum. 25: 401406 [1982]; Shi et al., Br. J. Dermatol. 117: 155-159 [1987]) . Es interesante indicar que el IFN-a se utiliza actualmente para el tratamiento del cáncer, así como de infecciones virales, tales como la hepatitis crónica debido a la infección del virus de la hepatitis B o hepatitis C. En concordancia con las observaciones niveles incrementados de IFN-a que desencadena la autoinmunidad, se ha descrito un aumento significativo en la aparición de trastornos autoinmunes, tales como IDDM, SLE y tiroiditis autoinmunes en los pacientes que se someten a terapia con IFN-a. Por ejemplo, se ha observado que un uso prolongado de IFN-a como terapia antiviral induce la IDDM (Waguri et al., Diabetes Res. Clin. Pract. 23: 33-36 [1994]; Fabris et al., J. Hepatol. 28: 514-517 [1998]) o SLE (Garcia-Porrua et al., Clin. Exp. Rheumatol. 16: 107-108 [1998]) . El tratamiento de la infección por el virus de coxsackie B con terapia con IFN-a también está asociada con la inducción de IDDM (Chehadeh et al., J. Infect. Dis. 181: 1929-1939 [2000]) . De manera similar, existen múltiples artículos de casos que documentan la IDDM o SLE en pacientes de cáncer tratados con IFN-a (Ronnblom et al., J. Intern. Med. 227: 207-210 [1990]) .

Terapia con anticuerpos [0007] La utilización de anticuerpos monoclonales como agentes terapéuticos ha ganado mayor aceptación con varios anticuerpos monoclonales (mAbs) aprobados para uso humano o en pruebas clínicas en las últimas fases. El primer mAb aprobado por la US Food and Drug Administration (FDA) para el tratamiento del rechazo de aloinjertos fue el anti-CD3 (OKT3) en 1986. Desde entonces, el ritmo del progreso en el campo de los mAbs se ha acelerado considerablemente, particularmente desde 1994 en adelante lo que condujo a la aprobación de siete mAbs adicionales para el tratamiento humano.... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Anticuerpo humanizado que comprende un dominio variable de cadena ligera de SEC ID NO: 3 y un dominio variable de cadena pesada de SEC ID NO: 5. 5

2. Anticuerpo, según la reivindicación 1, que comprende:

(i) la secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena ligera, o la secuencia de aminoácidos de cadena ligera humanizada completa, codificada por el vector VLV30-IgG2 que tiene el No. de acceso de ATCC PTA-2882; y

(ii) la secuencia de aminoácidos de dominio variable de cadena pesada, o la secuencia de aminoácidos de cadena pesada humanizada completa, codificada por el vector VHV30-IgG2 que tiene el No. de acceso de ATCC PTA-2881.

3. Anticuerpo, según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, que tiene una estructura homo-tetramérica compuesta de dos pares de cadena pesada y cadena ligera de anticuerpo unidos por puentes disulfuro. 15

4. Molécula de ácido nucleico aislada que codifica un anticuerpo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

5. Vector que comprende una molécula de ácido nucleico según la reivindicación 4.

6. Célula huésped transformada con una molécula de ácido nucleico, según la reivindicación 4, o un vector según la reivindicación 5,

7. Método de producción del anticuerpo, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende cultivar una célula huésped, según la reivindicación 6, bajo condiciones en las que la secuencia de ácido nucleico se expresa 25 para producir el anticuerpo.

8. Anticuerpo producido por la célula huésped según la reivindicación 6.

9. Composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva del anticuerpo, según cualquiera de las 30 reivindicaciones 1, 2, 3 u 8, en combinación con un portador farmacéuticamente aceptable.

10. Método para el diagnóstico de una patología autoinmune o mediada por el sistema inmunitario asociada con la expresión de IFN-a, que comprende poner en contacto una célula aislada con un anticuerpo anti-IFN-a, según cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3 u 8, y detectar la presencia de IFN-a.

11. Anticuerpo anti-IFN-a, según cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3 u 8, para utilizar en un método de tratamiento de una enfermedad o patología autoinmune o mediada por el sistema inmunitario asociada con la expresión de IFN-a en un paciente.

12. Anticuerpo anti-IFN-a, según la reivindicación 11, para utilizar en un método, según la reivindicación 11, en el que dicha enfermedad se selecciona del grupo que consiste en diabetes melitus insulinodependiente (IDDM) ; lupus eritematoso sistémico (SLE) ; y tiroiditis autoinmune.

13. Método de detección o determinación de IFN-a en una muestra biológica aislada que comprende mezclar la 45 muestra con un anticuerpo anti-IFN-a, según cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3 u 8, permitir que el anticuerpo forme el complejo anticuerpo/IFN-a con cualquier subtipo de IFN-a presente en la mezcla, y detectar cualquier complejo anticuerpo/IFN-a presente en la mezcla.

Figura 1 Figura 2 Figura 3 Figura 4

Figura 5A Dominio ligero variable Figura 5B Figura 6 Figura 7