Anticuerpos anti-CDH3 marcados con etiqueta de radioisótopo y usos de los mismos.

Un anticuerpo o un fragmento del mismo, que reconoce específicamente un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos como se muestra en SEQ ID NO: 3, en el que el anticuerpo o fragmento del mismo es

(i) un anticuerpo que comprende regiones variables definidas por las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 11 y 12, o un fragmento de unión del anticuerpo, en el que dicho fragmento de unión comprende regiones variables definidas por las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 11 y 12; o

(ii) un anticuerpo definido por CDR de VH que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 13, 14 y 15 y CDR de VL que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 16, 17 y 18, o un fragmento de unión del anticuerpo, en el que dicho fragmento de unión comprende CDR de VH que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 13, 14 y 15 y CDR de VL que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 16, 17 y 18.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/JP2009/003009.

Solicitante: ONCOTHERAPY SCIENCE, INC..

Nacionalidad solicitante: Japón.

Dirección: 2-1, Sakado 3-chome, Takatsu-ku, Kawasaki-shi, Kanagawa 213-0012, JP.

Inventor/es: NAKAMURA, YUSUKE, ENDO,KEIGO, TOGASHI,AKIRA, KATSU,MASAKAZU, TAKAYANAGI,MEGUMI, YOSHIOKA,HIROKI, NG,POHSING, SHIBA,YASUHIRO.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > A61P35/00 (Agentes antineoplásicos)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/09 (Tecnología del ADN recombinante)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen antígenos... > A61K39/395 (Anticuerpos (aglutininas A61K 38/36 ); Inmunoglobulinas; Inmunosuero, p. ej. suero antilinfocitario)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas... > Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales > C07K16/18 (contra materiales animales o humanos)
  • SECCION G — FISICA > METROLOGIA; ENSAYOS > INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION... > Investigación o análisis de materiales por métodos... > G01N33/574 (para el cáncer)

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Fragmento de la descripción:

Anticuerpos anti-CDH3 marcados con etiqueta de radioisótopo y usos de los mismos

Campo técnico

Prioridad

La invención se refiere a anticuerpos anti-CDH3 conjugados con etiqueta de radioisótopo, o a composiciones para su uso en procedimientos para dañar células cancerosas.

Técnica anterior

Las cadherinas son glucoproteínas de la adhesión célula-célula que forman empalmes intercelulares dependientes del calcio y desempeñan una función esencial en la morfogénesis y en el desarrollo y mantenimiento de tejidos y órganos adultos (Conacci-Sorrell M y col., J Clin Invest, 19:987-91 (22)). Durante la embriogénesis, la expresión celular de cadherinas específicas produce interacciones homófilas que son críticas en el proceso de la clasificación celular y la estratificación de tejidos (Nose A, y col., Cell, 54:993-11, (1988), Steinberg MS y col., Proc Nati Acad Sci USA, 91:26- 9, (1994), y Takeichi M. Science, 251:1451-5, (1991)). Las alteraciones en estas uniones celulares desempeñan una función importante en la desestabilización celular y pueden modificar el proceso de diferenciación cuidadosamente regulado de las estructuras epiteliales (Daniel CW y col., Dev Biol, 169:511-9 (1995) y Nose A y Takeichi M. J Cell Biol, 13:2649-58 (1986)). Por este motivo, la pérdida funcional o expresión en exceso de cadherinas y los mecanismos moleculares que subyacen el control de los genes que codifican estas proteínas participan en la carcinogénesis (Behrens J. Cáncer Metástasis Rev, 18:15-3(1999)).

La familia de las cadherinas se subdivide en diversas subfamilias, que incluyen las E-, P- y N-cadherinas clásicas, demostrando cada una una distribución en tejido específica (Takeichi M. Development, 12:639-55 (1988)). Aunque la E- cadherina se expresa en todos los tejidos epiteliales, la expresión de P-cadherina (CDH3) solo está limitada a las capas básales o inferiores de epitelios estratificados, que incluyen próstata y piel, y también a las células mioepiteliales de la mama (Takeichi M. J Cell Biol 13:2649-58 (1986) y Shimoyama Y y col., Cáncer Res, 49:2128-33 (1989)).

Un conjunto importante de datos también revela ahora que la expresión anómala de la P-cadherina está asociada a proliferación celular y con tumores de colon, mama, pulmón, tiroides y cuello uterino (Gamallo, Modern Pathology, 14:65-654 (21); y Stefansson y col., J. Clin. Oncol. 22(7): 1242-1252 (24)). Se informó que la P-cadherina humana era el antígeno reconocido por el anticuerpo monoclonal NCC-CAD-299 producido contra un carcinoma epidermoide vulvar (Shimoyama y col., Cáncer Res., 49:2128-2133 (1989)). Se espera que la modulación de la adhesión y señalización intracelular mediada por P-cadherina produzca disminución en la proliferación y supervivencia de células tumorales in vivo. Por consiguiente, en vista de la función crucial que la P-cadherina parece poseer en proliferación celular y la progresión de tumores sólidos, se desea generar anticuerpos para P-cadherina que puedan proporcionar un beneficio terapéutico a pacientes con una variedad de cánceres.

Se describieron anticuerpos contra CDH3 (documento W27/75672; NL 131818; Shimoyama, Y. y col. (1989). Cáncer Research, 2128-2133; Wu y col. (28). Experimental Cell Research, 314, 421-429; Mialhe y col. (2). Journal of Urology, 164, 826-835; Pyo y col. (27). Journal of Cranio-Maxillo-Facial Surgery, 35, 1-9 y documento EP 183187).

Se ha demostrado que los anticuerpos monoclonales contra moléculas específicas para el cáncer son útiles en el tratamiento del cáncer (Harris, M. (24). Lancet Oncol, 5, 292-32.). Además de ejemplos satisfactorios de aplicación clínica de los anticuerpos humanizados o quiméricos tales como trastuzumab (Baselga, J. (21). Oncology, 61, Supl 2 14-21), rituximab (Maloney, D.G. y col. (1997). Blood, 9, 2188-2195) y bevacizumab (Ferrara, N. y col. (24). Nat Rev Drug Discov, 3, 391-4) para cáncer de mama, linfoma maligno y cáncer de colon, están en desarrollo varios anticuerpos monoclonales contra otras dianas moleculares y están siendo evaluadas sus actividades antitumorales. Se espera que estos anticuerpos monoclonales proporcionen una esperanza a los pacientes que tienen tumores que no tienen tratamiento eficaz. Una de las otras cuestiones importantes para estos anticuerpos monoclonales es el logro de efectos terapéuticos selectivos para células cancerosas sin grave toxicidad debido a su reacción específica con células que expresan moléculas diana (Crist, W.M. y col. (21). J Clin Oncol, 19, 391-312; Wunder, J.S. y col. (1998). J Bone Joint Surg Am, 8,12-133; Ferguson, W.S. y Goorin, A.M. (21). Cáncer Invest, 19, 292-315, documentos W22/97395, W24/11345, W26/11474, W27/12525).

Sumario de la invención

La invención proporciona anticuerpos monoclonales contra CDH3 como se define en las reivindicaciones, que reconocen específicamente el polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos como se muestra en SEQ ID NO: 3. La actividad de unión al tumor in vivo de este anticuerpo se demostró usando un sistema in vivo de obtención de imágenes fluorescentes con fluorescencia en el infrarrojos cercano, además del procedimiento convencional con radionúclidos. La invención

proporciona evidencia de efecto antitumoral significativo en ratones con xenoinjerto que llevan varias líneas de células cancerosas, en el que los ratones se tratan con una administración única o doble de anticuerpos monoclonales anti-CDH3 marcados con 9Y (clon n° 6) y quiméricos del mismo (quim n° 6).

Específicamente, la presente invención se refiere a lo siguiente:

[1] Un anticuerpo o un fragmento del mismo, que reconoce específicamente un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos como se muestra en SEQ ID NO: 3, en el que el anticuerpo o fragmento del mismo

es

(i) un anticuerpo que comprende regiones variables definidas por las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 11 y 12, o un fragmento de unión del anticuerpo, en el que dicho fragmento de unión comprende regiones variables definidas por las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 11 y 12; o

(¡i) un anticuerpo definido por CDR de VH que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 13, 14 y 15 y CDR de VL que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 16, 17 y 18, o un fragmento de unión del anticuerpo, en el que dicho fragmento de unión comprende CDR de VH que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 13, 14 y 15 y CDR de VL que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 16, 17 y 18.

[2] El anticuerpo o fragmento del mismo según [1], en el que el anticuerpo está seleccionado del grupo que consiste en un anticuerpo de ratón, un anticuerpo quimérico, un anticuerpo humanizado, un fragmento de anticuerpo, y anticuerpo monocatenario.

[3] El anticuerpo o fragmento del mismo según [2], en el que el anticuerpo comprende una cadena H que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 11 y/o una cadena L que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 12.

[4] El anticuerpo o fragmento del mismo según [2], en el que el anticuerpo quimérico comprende una región V de la cadena H que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 11.

[5] El anticuerpo o fragmento del mismo según [2], en el que el anticuerpo quimérico comprende una región V de la cadena L que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 12.

[6] El anticuerpo o fragmento del mismo según [3]; en el que el anticuerpo quimérico comprende una región V de la cadena H que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 11 y una región V de la cadena L que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 12.

[7] El anticuerpo o fragmento del mismo según... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Un anticuerpo o un fragmento del mismo, que reconoce específicamente un polipéptido que tiene la secuencia de aminoácidos como se muestra en SEQ ID NO: 3, en el que el anticuerpo o fragmento del mismo es

(i) un anticuerpo que comprende regiones variables definidas por las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 11 y 12, o un fragmento de unión del anticuerpo, en el que dicho fragmento de unión comprende regiones variables definidas por las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 11 y 12; o

(ii) un anticuerpo definido por CDR de VH que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 13, 14 y 15 y CDR de VL que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 16, 17 y 18, o un fragmento de unión del anticuerpo, en el que dicho fragmento de unión comprende CDR de VH que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 13, 14 y 15 y CDR de VL que tienen las secuencias de aminoácidos de SEQ ID NO: 16, 17 y 18.

2. El anticuerpo o fragmento del mismo según la reivindicación 1, en el que el anticuerpo está seleccionado del grupo que consiste en un anticuerpo de ratón, un anticuerpo quimérico, un anticuerpo humanizado, un fragmento de anticuerpo y anticuerpo monocatenario.

3. El anticuerpo o fragmento del mismo según la reivindicación 2, en el que el anticuerpo comprende una cadena H que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 11 y/o una cadena L que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 12.

4. El anticuerpo o fragmento del mismo según la reivindicación 2, en el que el anticuerpo quimérico comprende una región variable (V) de la cadena H que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 11.

5. El anticuerpo o fragmento del mismo según la reivindicación 2, en el que el anticuerpo quimérico comprende una región variable (V) de la cadena L que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 12.

6. El anticuerpo o fragmento del mismo según la reivindicación 3, en el que el anticuerpo quimérico comprende una región variable (V) de la cadena H que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 11 y una región variable (V) de la cadena L que tiene la secuencia de aminoácidos mostrada en SEQ ID NO: 12.

7. El anticuerpo o fragmento del mismo según la reivindicación 1, en el que el anticuerpo es un anticuerpo humanizado.

8. El anticuerpo o fragmento del mismo según la reivindicación 7, en el que el anticuerpo humanizado comprende además una región FR (región estructural) de anticuerpo humano y/o una región C de anticuerpo humano.

9. El anticuerpo o fragmento del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1-8, que está conjugado con un citotóxico, un agente terapéutico, una etiqueta de radioisótopo o una etiqueta fluorescente.

1. El anticuerpo o fragmento del mismo según la reivindicación 9, en el que la etiqueta de radioisótopo está seleccionada de 9itrio (9Y) e 111¡ndio (111ln).

11. Una composición farmacéutica que comprende el anticuerpo o fragmento según una cualquiera de las reivindicaciones 9 o 1 para su uso en el tratamiento o prevención de una enfermedad que está asociada a CDH3.

12. Uso del anticuerpo o fragmento según una cualquiera de las reivindicaciones 9 o 1 para la preparación de una composición farmacéutica para tratar o prevenir una enfermedad que está asociada a CDH3.

13. Un procedimiento para el diagnóstico o pronóstico de una enfermedad que está asociada a CDH3 o de una predisposición a desarrollar la enfermedad en un sujeto, que comprende

(a) poner en contacto una muestra o un espécimen del sujeto con el anticuerpo o fragmento según una cualquiera de las reivindicaciones 1-1;

(b) detectar la proteína CDH3 en la muestra o espécimen; y

(c) juzgar si el sujeto padece o no o está en riesgo de desarrollar la enfermedad basándose en la abundancia relativa de la proteína CDH3 en comparación con un control.

14. Una composición farmacéutica que comprende el anticuerpo o fragmento según una cualquiera de las reivindicaciones 9 o 1 y un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

15. Un kit para el diagnóstico o pronóstico de una enfermedad asociada a CDH3, que comprende el anticuerpo o fragmento según una cualquiera de las reivindicaciones 1-1.