ALFA-AMILASA MUTANTE, DETERGENTE Y AGENTE DE LAVADO DE VAJILLA.
EN LA (ALFA)-AMILASA MUTANTE UNO O MAS DE LOS RESIDUOS DE AMINO ACIDO DE METIONINA ES INTERCAMBIADO CON CUALQUIER RESIDUO AMINO ACIDO EXCEPTO POR CYS Y MET.
LA (ALFA)-AMILASA MUTANTE ASI PRODUCIDA EXHIBE UNA ESTABILIDAD MEJORADA EN PRESENCIA DE AGENTES DE OXIDACION Y UNA TERMOACTIVIDAD MEJORADA CON VALORES MODERADAMENTE BAJOS DE PH. LA (ALFA)-AMILASA MUTANTE ESTA BIEN INDICADA COMO UN ADITIVO PARA DETERGENTES, AGENTES DE LAVADO DE VAJILLA Y AGENTES DE LICUEFACION
Tipo: Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: W9300230DK.
Solicitante: NOVO NORDISK A/S.
Nacionalidad solicitante: Dinamarca.
Dirección: NOVO ALLE,DK-2880 BAGSVAERD.
Inventor/es: BISGARD-FRANTZEN, HENRIK, SVENDSEN, ALLAN.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 30 de Septiembre de 2009.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C11D3/386 QUIMICA; METALURGIA. › C11 ACEITES, GRASAS, MATERIAS GRASAS O CERAS ANIMALES O VEGETALES; SUS ACIDOS GRASOS; DETERGENTES; VELAS. › C11D COMPOSICIONES DETERGENTES; UTILIZACION DE UNA SOLA SUSTANCIA COMO DETERGENTE; JABON O SU FABRICACION; JABONES DE RESINA; RECUPERACION DE LA GLICERINA. › C11D 3/00 Otros compuestos que entran en las composiciones detergentes cubiertas por C11D 1/00. › Preparaciones que contienen enzimas.
- C12N9/26 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › actúan sobre enlaces alfa-glucosídicos-1, 4, p. ej. hialuronidasa, invertasa, amilasa.
- C12N9/28 C12N 9/00 […] › alfa-amilasa de origen microbiano, p. ej. amilasa bacteriana.
Clasificación PCT:
Clasificación antigua:
Fragmento de la descripción:
a-amilasa mutante, detergente y agente de lavado de vajilla.
La invención comprende una a-amilasa mutante, un detergente y un agente de lavado de vajilla.
Las amilasas mutantes con estabilidad a la oxidación mejorada, donde una o más metioninas han mutado en cisteínas o en cisteínas químicamente modificadas están descritas en WO 91/16423. La razón para la investigación en este campo es la necesidad de a-amilasas de oxidación estable como aditivos para detergentes y agentes para el lavado de vajilla, debido a la presencia de agentes oxidantes fuertes en los detergentes y en los agentes para el lavado de vajilla, como se explica con más detalle en WO 91/16423.
Se ha descubierto que el nivel de actividad y la estabilidad en presencia de agentes oxidantes de las amilasas mutantes de la técnica anterior se puede mejorar, y así, el propósito de la invención es proporcionar una a-amilasa mutante con un nivel de actividad mejorada y una estabilidad mejorada en presencia de agentes oxidantes en comparación con las amilasas mutantes de la técnica anterior. En este contexto el término "estabilidad en presencia de agentes oxidantes" se refiere tanto a la estabilidad de almacenamiento de la a-amilasa durante el almacenamiento del producto de a-amilasa y durante el almacenamiento del detergente conteniendo a-amilasa como al agente para el lavado de vajilla conteniendo a-amilasa, y a la estabilidad en la solución de lavado o solución para el lavado de vajilla durante el proceso de lavado o el proceso de lavado de vajilla, y además a la estabilidad de la a-amilasa durante la hidrólisis de almidón en presencia de peróxido de hidrógeno u otros blanqueadores, p. ej. durante el desencolado en la industria textil.
Según la invención, se proporciona una alfa-amilasa mutante tal y como se define en la reivindicación 1, un detergente tal y como se define en la reivindicación 3 y un agente para el lavado de vajilla tal y como se define en la reivindicación 4.
Sorprendentemente se ha descubierto que la a-amilasa mutante según la invención muestra un mejor nivel de actividad y una mejor estabilidad en presencia de agentes oxidantes que las amilasas mutantes de la técnica anterior.
La a-amilasa mutante según la invención es una a-amilasa de B. licheniformis, una a-amilasa de B. amyloliquefaciens o una a-amilasa de B. stearothermophilus. Todas estas a-amilasas están bien caracterizadas y se describe su secuencia de aminoácidos completa. Debe entenderse que una a-amilasa, la cual es idéntica a la a-amilasa de B. licheniformis identificada en FR 2665178, excepto por el hecho de que ésta muestra un residuo de arginina en la posición 23 en vez del residuo de lisina, también pertenece a las a-amilasas, las cuales son las bases para las a-amilasas mutantes según la invención.
Una forma de realización preferida de la a-amilasa mutante reivindicada según la invención se caracteriza por el hecho de que el residuo de aminoácidos de metionina se sustituye por una Leu. En esta forma de realización se obtiene un nivel de actividad y estabilidad muy satisfactorio en presencia de agentes oxidantes.
Además, la invención comprende un detergente, el cual se caracteriza por el hecho de que éste comprende la a-amilasa mutante según la invención. Así, según la invención, la a-amilasa mutante puede añadirse como un componente de una composición detergente. Como tal, puede incluirse en la composición detergente en forma de un aditivo detergente. La composición detergente al igual que el aditivo detergente puede comprender adicionalmente otra u otras enzimas usadas de forma convencional en detergentes, tales como proteasas, lipasas, celulasas, oxidasas o peroxidasas.
En un aspecto específico, la invención proporciona un aditivo detergente. Las enzimas pueden incluirse en una composición detergente añadiendo aditivos separados que contengan una o más enzimas, o añadiendo un aditivo combinado comprendiendo todas estas enzimas.
Preferiblemente, el aditivo detergente, es decir un aditivo separado o un aditivo combinado, está provisto en forma de granulado, preferiblemente un granulado que no desprenda polvo, un líquido, en particular un líquido estabilizado, una suspensión, o en una forma protegida.
Se pueden producir granulados libres de polvo, p. ej. según se describe en US 4.106.991 y US 4.661.452 (ambas para Novo Industri A/S) y opcionalmente pueden revestirse por métodos conocidos en la técnica. Las enzimas de detergente pueden mezclarse antes o después de la granulación.
Las preparaciones enzimáticas líquidas pueden, por ejemplo, estabilizarse añadiendo un poliol tal como p. ej. propilenoglicol, azúcar o alcohol de azúcar, ácido láctico o ácido bórico, según métodos establecidos. Otros estabilizadores enzimáticos se conocen bien en la técnica.
Las enzimas protegidas pueden prepararse según el método descrito en EP 238.216 A.
La composición detergente de la invención puede estar en cualquier forma conveniente, p. ej. en polvo, gránulos o líquido. Un detergente líquido puede ser acuoso, conteniendo normalmente hasta un 90% de agua y un 0-20% de solvente orgánico.
La composición detergente comprende un tensioactivo que puede ser aniónico, no-iónico, catiónico, anfotérico o una mezcla de estos tipos. El detergente normalmente contendrá un 0-50% de tensioactivo aniónico tal como sulfonato de alquilbenceno lineal (SAL), sulfonato de alfa-olefinas (SAO), sulfato de alquilo (SA), sulfato de etoxialcohol (SEA) o jabón. También puede contener un 0-40% de tensioactivo no-iónico tal como etoxilato de nonilfenol o etoxilato de alcohol. Además, puede contener un tensioactivo de amida de ácido graso de polihidroxi (p. ej. como se describe en WO 92/06154).
El pH (medido en una solución de detergente acuosa) será normalmente neutral o alcalino, p. ej. de 7-11. El detergente puede contener un 1-40% de un constructor de detergente tal como zeolita, fosfato, fosfonato, citrato, NTA, EDTA o DTPA, anhídrido succínico de alquenilo, o silicato, o puede no estar construido (es decir, esencialmente libre de un constructor detergente). También puede contener otros ingredientes de detergente convencionales, p. ej. acondicionadores de tela, reforzadores de espuma, blanqueadores, p. ej. perborato, percarbonato, tetra-acetil etilenodiamina (TAED), o sulfonato de nonanoiloxibenceno (NOBS), agentes anticorrosivos, agentes de supensión de suciedad, agentes secuestrantes, agentes de reposición antisuciedad, agentes estabilizantes para la(s) enzima(s), depresores de espuma, tintes, bactericidas, blanqueadores ópticos o perfumes.
Formas particulares de composiciones detergentes dentro del campo de la invención incluyen:
- a) Una composición detergente formulada como un detergente en polvo que contiene constructor de fosfato, tensioactivo aniónico, tensioactivo no iónico, silicato, álcali para ajustar a un pH en uso deseado, y sal inorgánica neutral.
- b) Una composición detergente formulada como un detergente en polvo que contiene constructor de zeolita, tensioactivo aniónico, tensioactivo no iónico, acrílico o polímero equivalente, silicato, álcali para ajustar a un pH en uso deseado, y sal inorgánica neutral.
- c) Una composición detergente formulada como un líquido de detergente acuoso comprendiendo tensioactivo aniónico, tensioactivo no iónico, humectante, ácido orgánico, álcali, con un pH en uso ajustado a un valor entre 7 y 10.5.
- d) Una composición detergente formulada como un líquido detergente no acuoso que comprende un tensioactivo no iónico líquido que consiste esencialmente en alcohol primario lineal alcoxilado, constructor de fosfato, álcali, con un pH en uso ajustado a un valor entre aproximadamente 7 y 10.5.
- e) Una composición detergente formulada como un detergente en polvo en forma de un granulado con una densidad en masa de al menos 600 g/I, que contiene tensioactivo aniónico y tensioactivo no iónico, sal inorgánica de neutralidad baja o sustancialmente cero, constructor de fosfato, y silicato sódico.
- f) Una composición detergente formulada como un detergente en polvo en forma de un granulado con una densidad en masa de al menos 600 g/l, que contiene tensioactivo aniónico y tensioactivo no iónico, sal inorgánica de neutralidad baja o sustancialmente cero, constructor de zeolita, y silicato sódico.
Reivindicaciones:
1. Mutante de Bacillus licheniformis, Bacillus amyloliquefaciens o alfa-amilasa de Bacillus stearothermophilus caracterizado por el hecho de que el residuo de aminoácido de metionina en la posición 197 en el Bacillus licheniformis o la alfa-amilasa de Bacillus amyloliquefaciens o en la posilion 200 en la alfa-amilasa de Bacillus stearothermophilus se sustituye por un Leu, Ile, Asn, Ser, Gln, Asp o Glu.
2. Alfa-amilasa mutante según la Reivindicación 1, caracterizada por el hecho de que el residuo de aminoácido de metionina se sustituye por Leu.
3. Detergente caracterizado por el hecho de que éste comprende la alfa-amilasa mutante según la Reivindicación 1 o la Reivindicación 2.
4. Agente de lavado de vajilla, caracterizado por el hecho de que éste comprende una alfa-amilasa mutante según la Reivindicación 1 o la Reivindicación 2.
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