PROCEDIMIENTO PARA PREPARAR NUEVOS ANTICUERPOS MONOCLONALES DE RATON CON ESPECIFICIDAD ANTI-INTERFERON DE HUMANO.

PROCEDIMIENTO PARA PREPARAR NUEVOS ANTICUERPOS MONOCLONALES DE RATON CON ESPECIFICIDAD ANTI-INTERFERON DE HUMANO.

COMPRENDE: A) INYECTAR UNA PEQUEÑA CANTIDAD DEL IFN-GRECOMBINANTE PURIFICADO PROCEDENTE DE E-COLI EN EL BAZO DE RATONES BALB/C; B) DETECTAR LA PRESENCIA DE ANTICUERPOS EN EL SUERO; C) FUSIONAR A LAS CELULAS DEL BAZO DE RATONES BALB/C INMUNIZADOS CON CELULAS DE MIELOMA, PARA FORMAR CELULAS HIBRIDAS; D) REALIZAR VARIOS CULTIVOS DE CELULAS HIBRIDAS; E) CLONAR POR DILUCION LIMITE A LOS CULTIVOS DE CELULAS HIBRIDAS INDIVIDUALES PARA TENER TRES LINEAS DE CELULAS HIBRIDAS (G2-4, 62-65, C-15); F) INYECTAR INTRAPERITONEALMENTE CELULAS DE LAS CEPAS HIBRIDAS INDIVIDUALES EN RATONES BALB/C TRATADOS CON PRISTAN, PARA FORMAR TUMORES ASCITICOS; G) COSECHAR AL TUMOR ASCITICO DURANTE 14 A 18 DIAS Y H) TRATAR EL CULTIVO DE LIQUIDO ASCITICO QUE LLEVAN LOS MATERIALES SOBRENADANTES DE CELULAS IN VITRO MEDIANTE COLUMNA DE INTERCAMBIADOR DE ANIONES PARA PURIFICAR A LOS MATERIALES SOBRENADANTES DEL CULTIVO Y AISLAR LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES (G2-25, G2-4, C-15). LAS CELULAS DE MIELOMA SON UN SUBCLON DE CELULAS PE-X-63 Y 8-6-5-3.