PROCEDIMIENTO DE EXTRACCION Y USO DE FLUIDO DE INCUBACION DE SALMON DEL ATLANTICO.

Una preparación que contiene una enzima, denominada zonasa, en la que dicha preparación presenta una banda de proteína en análisis de SDS-PAGE,

con un peso molecular de alrededor de 28 kDa, obtenible por un método que comprende las etapas de:
a) suspender huevos de salmón en un volumen mínimo de agua,
b) inducir incubación rápida, sincronizada, de dichos huevos de salmón;
c) filtrar los huevos de salmón incubados para obtener fluido de incubación;
d) añadir urea sólida a dicho fluido de incubación para permitir la disociación de fragmentos de cáscara de huevo de salmón y someter dicho fluido a centrifugación a baja velocidad,
e) purificar adicionalmente dicha zonasa sometiendo el sobrenadante de centrifugación a filtración en gel; y
f) purificar adicionalmente dicha zonasa por cromatografía de afinidad en una columna de Superose 6B modificada con benzamidina, en la que dicha cromatografía de afinidad se realiza efectuando lavados de sal concentrada seguidos por elución con dioxano, en solución de sal concentrada, para extraer zonasas unidas a la matriz de cromatografía o a estructuras macromoleculares; en el que dicha zonasa tiene las siguientes propiedades:
a) divide cromozima X;
b) es inhibida por benzamidina;
c) divide enlaces péptido con arginina;
d) permanece activa en presencia de urea 8 M, concentraciones molares de sal, agua destilada y disolventes orgánicos, preferiblemente dioxano o propanol; y
e) retiene actividad enzimática en solución a temperatura ambiente durante 50 días.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: AQUA BIO TECHNOLOGY AS.

Nacionalidad solicitante: Noruega.

Dirección: ,5640 EIKELANDSOSEN.

Inventor/es: WALTHER, BERNT, TH., RONG, CHUNJUN, J.

Fecha de Publicación: 16 de Diciembre de 2006.

Fecha Solicitud PCT: 11 de Diciembre de 1998.

Fecha Concesión Europea: 31 de Mayo de 2006.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N9/50 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Proteinasas.

Clasificación PCT:

C12N9/50 C12N 9/00 […] › Proteinasas.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Finlandia, Chipre, Oficina Europea de Patentes, Armenia, Azerbayán, Bielorusia, Ghana, Gambia, Kenya, Kirguistán, Kazajstán, Lesotho, República del Moldova, Malawi, Federación de Rusia, Sudán, Tayikistán, Turkmenistán, Uganda, Zimbabwe, Burkina Faso, Benin, República Centroafricana, Congo, Costa de Marfil, Camerún, Gabón, Guinea, Malí, Mauritania, Niger, Senegal, Chad, Togo, Organización Regional Africana de la Propiedad Industrial, Swazilandia, Guinea-Bissau, Organización Africana de la Propiedad Intelectual, Organización Eurasiática de Patentes.

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