Inhibidores de la actividad de Akt.

Un compuesto de fórmula (I):**Fórmula**

en donde:

R8 y R9 se seleccionan independientemente de:

hidrógeno, halógeno, alquilo C1-4, furano y tiofeno;

R6 es alquilo C1-4;

R7 se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-4 y halógeno;

R10 se selecciona de: -(CR60R61)m arilo C5-C12 en donde arilo C5-C12 no está sustituido, y -(CR60R61)m arilo C5- C12 en donde el arilo C5-C12 está sustituido por uno a cinco sustituyentes seleccionado de entre el grupo consistente en:-CO2R20, alquilo C1-4, hidroxialquilo C1-C4, alquil C1-C4oxi, amino, alquil C1-C4amino, aminoalquilC1-C4, dialquil C1-C4amino, hidroxi, nitro, tetrazol, ciano, oxo, halógeno y trifluorometilo, donde R20 se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-C4 y trifluorometilo; donde m es 0 a 2; y

R60 y R61 se seleccionan independientemente de: hidrógeno y alquilo C1-4;

R11 se selecciona de hidrógeno y alquilo C1-4;

X se selecciona de O, S y NR49,

donde R49 se selecciona de hidrógeno y alquilo C1-4;

en donde

arilo es un sistema de anillo monocíclico, bicíclico o tricíclico en donde al menos un sistema de anillo es aromático y en donde cada sistema de anillo contiene 3 a 7 eslabones, y

alquilo C1-4 es una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada que está saturada o insaturada, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

Inhibidores de la actividad de Akt Campo de la invención

Esta invención se refiere a nuevos compuestos de carboxamida heterocíclica, a la utilización de dichos compuestos como inhibidores de la actividad de la proteína cinasa B (en lo sucesivo PKB/Akt, PKB o Akt) y en el tratamiento del cáncer y la artritis.

Antecedentes de la invención

La presente invención se refiere a compuestos que contienen carboxamida heterocíclica que son inhibidores de la actividad de una o más de las isoformas de la serina/treonina cinasa, Akt (conocida también como proteína cinasa B). La presente invención se refiere también a composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos y a los procedimientos de utilización de los presentes compuestos en el tratamiento del cáncer y la artritis (Liu et al. Current Opinión Pharmacology 3:317-22 (23)).

La apoptosis (muerte celular programada) desempeña funciones esenciales en el desarrollo embrionario y la patogenia de diversas enfermedades, tales como las enfermedades neuronales degenerativas, las enfermedades cardiovasculares y el cáncer. Trabajos recientes han conducido a la identificación de varios productos génicos pro- y anti-apoptóticos que están involucrados en la regulación o la ejecución de la muerte celular programada. La expresión de genes anti-apoptóticos, tales como Bcl2 o BcI-xl, inhibe la muerte celular programada provocada por diversos estímulos. Por otra parte, la expresión de genes proapoptóticos, tales como Bax o Bad, conduce a la muerte celular programada (Adams et al. Science, 281:1322-1326 (1998)). En la ejecución de la muerte celular programada intervienen como mediadoras las proteinasas relacionadas con la caspasa-1, incluidas la caspasa-3, la caspasa-7, la caspasa-8 y la caspasa-9, etc. (Thornberry et al. Science, 281:1312-1316 (1998)).

La fosfatidilinositol 3'-OH cinasa (PI3K)/Akt parece importante para la regulación de la supervivencia celular/muerte celular (Kulik et al. Mol. Cell. Biol. 17:1595-166 (1997); Franke et al., Cell, 88:435-437 (1997); Kauffmann-Zeh et al. Nature 385:544-548 (1997) Hemmings Science, 275:628-63 (1997); Dudek et al., Science, 275:661-665 (1997)). Factores de supervivencia, tales como el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), el factor de crecimiento nervioso (NGF) y el factor de crecimiento semejante a la insulina tipo 1 (IGF-1), estimulan la supervivencia celular en diversas condiciones al inducir la actividad de PI3K (Kulik et al. 1997, Hemmings 1997). PI3K activada conduce a la producción de fosfatidilinositol (3,4,5)-trifosfato (Ptdlns (3,4,5)-P3), que a su vez se une a, y favorece la activación de, serina/treonina cinasa Akt, que contiene una homología pleckstrin (PH)-dominio (Franke et al. Cell, 81:727-736 (1995); Hemmings Science, 277:534 (1997); Downward, Curr. Opin. Cell. Biol. 1:262-267 (1998 ), Alessi et al., EMBO J. 15:6541-6551 (1996)). Los inhibidores específicos de PI3K o los mutantes de Akt/PKB dominantes negativos suprimen las actividades de estos factores de crecimiento o citocinas que favorecen la supervivencia. Se ha descrito previamente que los inhibidores de PI3K (LY2942 o wortmanina) bloquearon la activación de Akt/PKB por las cinasas aguas arriba. Además, la introducción de los mutantes PI3K o Akt/PKB constitutivamente activos de Akt favorece la supervivencia celular en condiciones en las que las células normalmente experimentan la muerte celular programada (Kulik et al. 1997, Dudek et al. 1997).

El análisis de concentraciones de Akt en tumores humanos demostraron que Atk2 se sobreexpresa en un número significativo de ovarios (J. Q. Cheung et al. Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 89:9267-9271 (1992)) y cánceres pancreáticos (J. Q. Cheung et al. Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 93:3636-3641 (1996)). Asimismo, se descubrió que Akt3 se sobreexpresa en estirpes celulares de cáncer de mama y de próstata (Nakatani et al. J. Biol. Chem. 274:21528-21532 (1999). Se demostró que Akt-2 se sobreexpresaba en el 12% de tumores indiferenciados, indicio de que Akt puede estar también relacionada con la agresividad del tumor (Bellacosa, et al., Int. J. Cáncer, 64, págs, 28-285, 1995). El aumento de la actividad de la cinasa Akt se ha descrito en los cánceres de mama, de ovario y de próstata (Sun et al. Am. J. Pathol. 159:431-7 (21)).

El supresor tumoral PTEN, una proteína y lípido fosfatasa que elimina específicamente el fosfato en 3' de Ptdlns(3,4,5)-P3, es un regulador negativo de la ruta PI3K/Akt (Li et al. Science 275:1943-1947 (1997), Stambolic et al. Cell 95:29-39 (1998), Sun et al. Proc. Nati. Acad. Sci. U. S. A. 96:6199-624 (1999)). Las mutaciones de la estirpe germinativa de PÍEN son responsables de los síndromes de cáncer humano, tales como la enfermedad de Cowden (Liaw et al. Nature Genetics. 16:64-67 (1997)). PTEN se elimina en un gran porcentaje de tumores humanos y las estirpes celulares tumorales sin PTEN funcional presentan elevados niveles de Akt activado (Li et al. anteriormente, Guldberg et al. Cáncer Research 57:366-3663 (1997), Risinger et al. Cáncer Research 57:4736-4738 (1997)).

Estas observaciones demuestran que la ruta PI3K/Akt desempeña una función importante para la regulación de la supervivencia celular o la apoptosis en la tumorigenia.

Tres eslabones de la subfamilia Akt/PKB de serina/treonina proteína cinasas reguladas por el segundo mensajero se han identificado y denominado Akt1/PKB, Akt2/PKB(3, y Akt3/PKBy respectivamente. Las isoformas son homologas, particularmente en las regiones que codifican los dominios catalíticos. Las Akt/PKB son activadas por episodios de fosforilación que se producen en respuesta a la señalización de PI3K. PI3K fosforila fosfolípidos de inositol de membrana, generando los segundos mensajeros fosfatidil-inositol 3,4,5-trifosfato y fosfatidilinositol 3,4-bifosfato, que se ha demostrado que se unen al dominio PH de Akt/PKB. El modelo actual de activación de Akt/PKB propone la

recuperación de la enzima a la membrana por fosfoinosítidos 3'-fosforilados, donde se produce la fosforilación de los puntos reguladores de Akt/PKB por las clnasas aguas arriba (B.A. Hemmings, Science 275:628-63 (1997); Hemmings B.A., Science 276:534 (1997); J. Downward, Science 279:673-674 (1998)).

La fosforilación de Akt1/PKBa se produce en dos puntos reguladores, Thr38 en el bucle de activación del dominio catalítico y en Ser473 cerca del extremo terminal carboxl (D. R. Alessi et al. EMBO J. 15:6541-6551 (1996) y R. Meler et al. J. Biol. Chem. 272:3491-3497 (1997)). Puntos de reguladores de fosforilación equivalentes se producen en Akt2/ PKB(3 y Akt3//PKBy. La cinasa aguas arriba, que fosforila Akt/PKB en el punto del bucle de activación se ha clonado y denominado proteína cinasa 1 dependiente de 3'-fosfoinosítido (PDK1). PDK1 fosforila no sólo Akt/PKB, sino también p7 ribosómica S6 cinasa, p9rsk, cinasa regulada por suero y glucocorticoides (SGK) y proteína cinasa C. La cinasa aguas arriba que fosforila el punto regulador de Akt/PKB cerca del extremo terminal carboxi no se ha identificado todavía, pero informes recientes suponen una función para la cinasa unida a integrinas (ILK-1), una serina/treonina proteína cinasa, o autofosforilación.

La inhibición de la activación y la actividad de Akt se puede conseguir inhibiendo PI3K con inhibidores tales como LY2942 y wortmanina. Sin embargo, la inhibición de PI3K tiene potencial de afectar indiscriminadamente no sólo las tres isoenzimas Akt, sino también otras moléculas de señalización que contienen el dominio PH que dependen de Pdtlns(3,4,5)-P3, tales como la familia Tec de tirosina cinasas. Además, se ha descrito que Akt puede activarse mediante señales de crecimiento que son independientes de PI3K.

Alternativamente, la actividad de Akt puede inhibirse bloqueando la actividad de la cinasa PDK1 aguas arriba. El compuesto UCN-1 es un inhibidor descrito de PDK1. Una vez más, la inhibición de PDK1 daría lugar a la inhibición de múltiples proteína cinasas cuyas actividades dependen de PDK1, tales como isoformas de PKC atípicas, SGK, y S6 cinasas (Williams et al. Curr. Biol. 1:439-448 (2).

Pequeñas moléculas inhibidoras de Akt son útiles en el tratamiento de tumores, especialmente aquellos con Akt activada (p. ej. tumores anulados por PTEN y tumores con mutaciones ras. PTEN es un regulador negativo crítico de Akt y su función se pierde en muchos cánceres, incluidos los carcinomas de mama y de próstata, los glioblastomas y varios síndromes cancerosos incluidos el síndrome de Bannayan-Zonana (Maehama, T. et al. Annual Review of Biochemistry, 7: 247 (21)), la enfermedad de Cowden (Parsons, R.; Simpson, L. Methods in Molecular Biology (Totowa, NJ., Estados Unidos), 222 (Tumor Suppressor Genes, volumen 1): 147 (23)), y la enfermedad de Lhermitte-Duclos... [Seguir leyendo]

en donde:

R8 y R9 se seleccionan independientemente de: hidrógeno, halógeno, alquilo Ci.4l furano y tiofeno;

R6 es alquilo C-|.4;

R7 se selecciona de hidrógeno, alquilo Ci_4 y halógeno;

R1 se selecciona de: -(CR6R61)m arllo C5-C12 en donde arilo C5-C12 no está sustituido, y -(CR6R61)m arllo C5- C12 en donde el arilo C5-C12 está sustituido por uno a cinco sustituyentes seleccionado de entre el grupo consistente en:-C2R2, alquilo Ci.4l hidroxialquilo Ci-C4, alquil Ci-C4oxi, amino, alquil Ci-C4amino aminoalquilCi-C4, dialquil Ci-C4amino, hidroxi, nitro, tetrazol, ciano, oxo, halógeno y trifluorometilo, donde R2° se selecciona de hidrógeno, alquilo Ci-C4 y trifluorometilo; donde m es a 2; y

R6 y R61 se seleccionan independientemente de: hidrógeno y alquilo Ci_4;

R11 se selecciona de hidrógeno y alquilo Ci.4;

X se selecciona de O, S y NR49,

donde R49 se selecciona de hidrógeno y alquilo Ci.4;

en donde

arilo es un sistema de anillo monocíclico, bicíclico o tricíclico en donde al menos un sistema de anillo es aromático y en donde cada sistema de anillo contiene 3 a 7 eslabones, y

alquilo Ci_4 es una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada que está saturada o insaturada,

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

2. Un compuesto según la reivindicación 1, representado por la fórmula (II) siguiente:

en donde:

R12 se selecciona de: hidrógeno, halógeno, alquilo Ci_4, furano y tiofeno; R13 se selecciona de: -(CH2)mfenilo y -(ChhVnfenilo en donde el fenilo está sustituido, donde m es a 2;

X se selecciona de O y S; y o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

3- Un compuesto según la reivindicación 1, seleccionado de:

M'(2-am¡no-1-feniletil)-5-( 1-metil-1/-/-pirazol-5-¡l)-3-t¡ofencarboxamida;

M-[2-amino-1-(fenilmet¡l)et¡l]-5-( 1-metil-1/-/-pirazol-5-¡l)-3-t¡ofencarboxamida;

a/-((1S)-2 -amino-1 -{[2-(trifluorometil)fenil]metil}etil)-5-( 1-metil-1 /-/-pirazol-5-il)-3-tiofencarboxamida;

W-{(1S)-2 -amino-1 -[(2-fluorofenil)metil]etil}-5-( 1 -metil-1 /-/-pirazol-5-il)-3-tiofencarboxamida;

A/-{(1S)-2 -amino-1-[(2-clorofenil)metil]etil}-5-(1-metil-1/-/-pirazol-5-il)-3-tiofencarboxamida;

W-[1-(am¡nometil)-2-met¡l-2-fen¡lprop¡l]-5-(1 -metil-1 /-/-pirazol-5-il)-3-tiofencarboxamida;

W-[2-amino-1-(1-(naftalenil)etil)-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-3-tiofencarboxamida;

W-[2-amino-1-(fenilmetil)etil]-2-(3-furanil)-5-(1-metil-1/-/-pirazol-5-il)-3-tiofencarboxamida;

W-((1S)-2-amino-1-{[2-(trifluorometil)fenil]metil}etil)-5-(1-metil-1/-/-pirazol-5-il)-3-furancarboxamida;

W-((1S)-2-amino-1-{[2-(trifluorometil)fenil]metil}etil)-5-(1-metil-1/-/-pirazol-5-il)-1H-pirrol-3-carboxamida;

A/-((1 S)-2-amino-1 -{[2-(trifluorometil)fenil]metil}etil)-2-cloro-1-metil-5-(1 -metil-1 /-/-pirazol-5-il)-1 H-pirrol-3- carboxamida; y

A/-((1S)-2 -amino-1-{[2-(trifluorometil)fenil]metil}etil)-2-cloro-5-(4-cloro-1-metil-1 H-pirazol-5-il)-1-metil-1 H-pirrol-3- carboxamida;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

4. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 1, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, para su utilización en terapia.

5. Utilización de un compuesto definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, para la fabricación de un medicamento destinado al tratamiento o reducción de la gravedad de una enfermedad o afección seleccionada de cáncer y artritis.

6. La utilización según la reivindicación 5, en donde dicho cáncer se selecciona de: cerebro (gliomas), glioblastomas, síndrome de Bannayan-Zonana, enfermedad de Cowden, enfermedad de Lhermitte-Duclos, de mama, cáncer de mama inflamatorio, tumor de Wilm, sarcoma de Ewing, rabdomiosarcoma, ependimoma, meduloblastoma, de colon, de cabeza y cuello, de riñón, pulmonar, de hígado, melanoma, ovárico, pancreático, de próstata, sarcoma, osteosarcoma, tumor óseo de células gigantes, de tiroides, leucemia linfoblástica de linfocitos T, leucemia mielógena crónica, leucemia linfocítica crónica, tricoleucemia, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielógena aguda, leucemia neutrofílica crónica, leucemia linfoblástica aguda de linfocitos T, plasmocitoma, leucemia inmunoblástica de células grandes, leucemia de células del manto, leucemia megacarioblástica con mieloma múltiple, mieloma múltiple, leucemia megacariocítica aguda, leucemia promielocítica, eritroleucemia, linfoma maligno, linfoma de Hodgkin, linfoma no hodgkiniano, linfoma linfoblástico de linfocitos T, linfoma de Burkitt, linfoma folicular, neuroblastoma, cáncer de vejiga, cáncer urotelial, cáncer pulmonar, cáncer vulvar, cáncer cervical, cáncer endometrial, cáncer renal, mesotelioma, cáncer de esófago, cáncer de las glándulas salivales, cáncer hepatocelular, cáncer gástrico, cáncer nasofaríngeo, cáncer de mejilla, cáncer de boca, GIST (tumor del estroma gastrointestinal) y cáncer testicular.

7. La utilización según la reivindicación 5, en donde dicho cáncer se selecciona de: cerebro (gliomas), glioblastomas, síndrome de Bannayan-Zonana, enfermedad de Cowden, enfermedad de Lhermitte-Duclos, de mama, de colon, de cabeza y cuello, de riñón, pulmonar, de hígado, melanoma, ovárico, pancreático, de próstata, sarcoma y de tiroides.

8. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

9. La composición farmacéutica según la reivindicación 7, que comprende además al menos un agente antineoplásico. 1

1. La composición farmacéutica según la reivindicación 9, en donde al menos un agente antineoplásico se selecciona del grupo consistente esencialmente en agentes antimicrotubulares, complejos de coordinación de platino, agentes alquilantes, agentes antibióticos, inhibidores de la topoisomerasa II, antimetabolitos, inhibidores de la topoisomerasa I, hormonas y análogos hormonales, inhibidores de la vía de transducción de señales, inhibidores de tirosina cinasa no receptores de angiogenia, agentes inmunoterapéuticos, agentes proapoptóticos, e inhibidores de la señalización del ciclo celular.