Inhibidores de la vascularización.

El uso de un antagonista del receptor de tipo 1 de la angiotensina II (AT II),

seleccionado del grupo que consiste en candesartán, candesartán cilexetil, losartán, valsartán, irbesartán, tasosartán, telmisartán y eprosartán, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para la prevención de diabetes en pacientes que exhiben una presión sanguínea normal o baja.

DESCRIPCiÓN

Inhibidores de la vascularización Campo técnico Esta invención se refiere a una composición farmacéutica novedosa para su uso como un agente antineoplásico, que comprende un inhibidor del CXCR4 como el ingrediente eficaz.

Técnica anterior

En el pasado, se sabía que cuando las células tumorales salen fuera de los vasos sanguíneos, las células endoteliales vasculares se rompen. TambiérJ se sabe que la neovascularización está profundamente implicada en la proliferación y la migración del cáncer y que las células tumorales producen y liberan una variedad de factores de neovascularizacioo Especialmente, la neovascularización está considerada como crucial para la proliferación de tumores sólidos Por lo tanto, una sustancia que inh iba la neovascularización tiene el potencial de ser un agente anticanceroso que es proporcionado con un nuevo modo de acción. Por esta razoo, ya se ha probado el uso de varios tipos de sustancias inhibidoras de la neovascularización tales como esteroides y productos metabólicos de microorganismos. ("Manual for Studies on Cancer Invasion and Metastasis, " The Gancer Metastasis Society Ed., Kinhodo Publisher, 159-182 (1994". Sin embargo, se desea fuertemente descubrir nuevas sustancias inhibidoras de la neovascularizacioo con la acción de inhibir más eficazmente la proliferaciórJ y la metástasis de cánceres.

Divulgación de la invención Esta invención se define en las reivindicaciones Específicamente, los autores de la presente invención llevaron a cabo extensas investigaciones con objeto de resolver los problemas identificados anteriormente; y como resultado han descubierto que cuando se crean ratones con genes inactivados que carecen del factor estimulante del crecimiento de células pre-Blfactor derivado de células estromales (denominado en lo sucesivo "PBSF/SDF-I" o "SDF-1 ") , que es una quimiocina de CXC, así como de CXCR4, que es un receptor de quimiocinas, se suprime la vascularización en los ratones y concretamente, la supresión de CXCR4 da como resultado una supresioo de la vascularizaciÓll. Dicho descubrimiento significa que el receptor de quimiocinas CXCR4 es esencial para la neovascularización.

La neovascularización de tejidos vivos se produce generalmente a través de un remodelado del sistema vascular previamente existente cuando crecen para realizar sus funciones específicas durante el desarrollo. Los análisis de los ratones mutantes han determinado que las moléculas requeridas por los sistemas vasculares tempranos son en su mayoria receptores de cinasas de tirosina y sus ligandos. (Risau, W. Nature 386, 671-674 (1997) ; Folkman, J. & D'Amore,

P. A. Cell 87, 1158-1155 (1996) ; Y Lindahl, P. y col., science 277, 242-245 (1997) ) . Sin embargo, las sustancias responsables de la vascularización durante la organogérJesis todavía no han sido identificadas, porque la mayoría de estos ratones muere durante la gestaciórJ temprana antes del desarrollo de sus tejidos.

La estructura del receptor de quimiocinas CXCR4 según esta invención ya se conocía. (Bleul, C. C. y col., Nature 382, 829-883 (1996) ; Oberlin, E. y col., Nalure 382, 888-835 (1996) ; Y Nagasawa, T. y col., Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU. 93, 14726-14729 (1996". El CXCR4 es una proteína acoplada a proteína G que abarca siete dominios transmembrana y un receptor de PBSF/SDF-1, que es una quimiocina CXC. Se cree que el factor mencionado anteriormente es responsable de la linfopoyesis de los linfocitos B, de la mielopoyesis en la médula ósea y de la formación del tabique ventricular cardiaco (Nagasawa, T. y col., Nalure 382, 685-688 (1996) ) . El CXCR4 también funciona como un co-receplor para el VIH-1trófico de los linfocitos T (Feng, Y. y col., Science 272, 872-877 (1996". Adicionalmente se ha informado de que el CXCR4 se expresa. en células endoteliales cultivadas (Volin, M. V. y col., Biochem. Biophys. Res. Commun. 242, 46-53 (1998"

Además, los autores de la presente invención han descubierto que el anteriormente mencionado CXCR4 se expresa en células endoteliales vasculares en desarrollo y que los ratones que carecen del CXCR4 o de su ligando PBSF/SDF-1 , muestran una formación defectuosa de los grandes vasos sanguíneos que abastecen el tracto gastrointestinal. Dicho descubrimiento significa que los sistemas de señalizacioo CXCR4 y PBSF/SOF-1 son esenciales para la formacioo de las arterias y venas medianas que aportan nutrientes al tracto gastrointestinal. Adicionalmente, los autores de la presente invención han descubierto que los ratones que carecen del CXCR4tienden a morir en el útero, tal como se observa en los ratones que carecen de PGSF/SDF-1 Dicho descubrimiento sugiere que el CXCR4 es el receptor fisiológico primario más crítico de PBSF/SDF-1

Basándonos en las anteriores observaciones de los autores de la presente invención, se contempla que las sustancias capaces de inhibir la acción debida al CXCR4 puedan inhibir la vascularización y por tanto puedan ser eficaces agentes anticancerosos, dado que la vascularizaciÓll es esencial para el mantenimiento y la expansiórJ de los tejidos cancerosos.

Asimismo, se contempla que las sustancias capaces de inhibir el CXCR4 podrán ser agentes terapéuticos para el tratamiento de enfermedades que implican una neovascularizaciórJ.

E1 01819

Adicionalmente se contempla que la promoción de la acción debida al CXCR4 acelere la vascularización y por lo tanto pueda ser un remedio para una enfermedad en la que se desea una vascularización Más especificamente, como se resumirá a continuación, esta invención proporciona la materia objeto como se define en las reivindicaciones Asi, esta invención proporciona una composición farmacéutica para su uso como un agente antineoplásico que comprende un inhibidOf del CXCR4 como el ingrediente eficaz, en el que dicho inhibidor está seleccionado del grupo según se define en la reivindicación 1.

Debido a que la formaciórJ de arterias y venas medianas o grandes es esencial para el mantenimiento y la expansión de un tejido canceroso que supera un cierto tamaño, el inhibidor de la vascularización para el uso de esta invenciórJ bloquea el sistema de señalización del CXCR4 o del PBSF/SDF-J, suprimiendo así el mantenimiento y la expansión del tejido canceroso El descubrimiento obtenido en esta invención sugiere la posibilidad de que los sistemas de señalización del CXCR4 y del PBSFfSDF-1 contribuyan a la vascularización universal. Por lo tanto, en las enfermedades en las que la principal causa patológica es un tipo de cáncer o de neovascularización en particular, es probable que el CXCR4 o el PBSFfSDF-1 esté profundamente implicado en la causa patológica; en este caso, existe la posibilidad de que estas enfermedades puedan ser suprimidas bloqueando el CXCR4 o el PBSFfSDF-1 individual o simultáneamente con otras moléculas En la presente memoria descriptiva y dibujos, las abreviaturas de las bases o aminoácidos siguen la comisión sobre nomenclatura bioquimica (Commission on Biochemistr y Nomenclatura) de la IUPAC-IUB, o se basan en lo que es habitual en la técnica. A continuaciórJ se ilustran sus ejemplos. Cuando se habla de aminoácidos y pueden estar presentes sus isómeros ópticos, aquéllos representan las formas L salvo que se indique lo contrario.

ADN: ácido desoxirribonucleico ADNc: ácido desoxirribonucleico complementario A: adenina T: timina G: guanina C: citosina ARN: ácido ribonucleico ARNm: ácido ribonucleico mensajero G o Gly: glicina A o Ala: alanina v o Val: valina Lo Leu: Jeucina lo lIe: isoleucina s o Ser: serina T o Thr: treonina C o Cys: cisteína M o Me!: metionina E o Glu: ácido glutámico O o Asp: ácido aspártico K o Lys· lisina Ro Arg· argimna H o His: histidina

E101819

F o Phe: fenilalanina Yo Tyr: tirosina W o Trp: triptófano P o Pro: prolina N o Asn: asparagina Q o Gln: glutamina BSA: albúmina de suero bovino FBS: suero bovino fetal

PBS: disolución salina tamponada con fosfato SDS: dcxlecilsulfato sódico Breve descripción de los dibujos La Fig. 1 es un gráfico que muestra una estrategia de marcaje para el gen del CXCR4. En la figura se muestran el alelo natural de CXCR4 en la parte superior, un vector de marcaje en el centro y un alelo mutante predicho en la parte inferior. Las regiones codificantes de los genes están indicadas en recuadros negros. Los recuadros vacíos indican las regiooes no traducidas 5' y 3'. Las líneas punteadas indican fragmentos homólogos usados en el vector de marcaje. La sonda A es una sonda externa para la hibridación Soothem. Los sitios de restricción son E (EcoRI ) , Sh (Sphl) y X (Xhol) , respectivamente La Fig. 2A es una fotografia que muestra el análisis por inmunotransferencia Soothem de colas de ADN de ratones... [Seguir leyendo]

1. Una composición farmacéutica para su uso en el tratamiento de un cáncer sólido, que comprende una sustancia que inhibe la acción debida al CXCR4, en el que la sustancia se selecciona del grupo que consiste en

(1) una sustancia que inhibe la unión entre el SDF-1 y el CXCR4;

(2) una sustancia que inhibe la señalizaciórJ desde el CXCR4 hacia los núcleos;

(3) una sustancia que inhibe la expresión del CXCR4; y

(4) una sustancia que inhibe la expresión del SDF-1,

en la que la sustancia es un anticuerpo anti-SOF-1, o un fragmento de dicho anticuerpo que posee la actividad del anticuerpo anti-SDF-1, o un anticuerpo anti-CXCR4, o un fragmento de dicho anticuerpo que posee la actividad del anticuerpo anti-CXCR4

2. Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 1, en la que la sustancia inhibe el SDF-1.

Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 1, en la que la sustancia inhibe el CXCR4.

Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 2, en la que la sustancia inhibe el CXCR4 en competición antagonista con el SOF-1.

Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 2, en la que la sustancia inhibe que el SOF-1 se una al CXCR4 uniéndose al SOF-1

ComposiciórJ farmacéutica para su uso según la reivindicación 1, en la que la sustancia es una seleccionada del grupo que consiste en un anticuerpo anti-SOF-1 y un fragmento de dicho anticuerpo que posee la actividad del anticuerpo anti-SDF-1.

7. Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 3, en la que la sustancia inhibe el CXCR4 en competición antagonista con el CXCR4 para uniórJ al SDF-1.

8. Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 3, en la que la sustancia inhibe que el SDF-1 se una al CXCR4 uniéndose al CXCR4.

9. ComposiciórJ farmacéutica para su uso según la reivindicación 8, en la que la sustancia es una seleccionada del grupo que consiste en un anticuerpo anti-CXCR4 y un fragmento de dicho anticuerpo que posee la actividad de anticuerpo anti-CXCR4

10. Composición farmacéutica para su uso según la reivindicaciórJ 1, en la que la sustancia es una sustancia que inhibe la expresiórJ misma de CXCR4 y es un inhibidOf contra el sitio de control de expresiórJ de CXCR4

Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 1, en la que la sustancia muestra inhibición contra el sitio de control de expresión del SOF-1

12. Un procedimiento para rastrear una sustancia que trata un cáncer sólido en base a la inhibición de la acciórJ debida al CXCR4, en el que la sustancia es un anticuerpo anti-SDF-1, o un fragmento de dicho anticuerpo que posee la actividad del anticuerpo anti-SDF1, o un anticuerpo anti-CXCR4, o un fragmento de dicho anticuerpo que posee la actividad del anticuerpo anti-CXCR4.

13. Procedimiento según la reivindicación 12, que comprende una etapa de identificar una sustancia que inhibe la acciórJ debida al CXCR4 como una sustancia que trata un cáncer sólido.

14. Procedimiento según la reivindicación 12, que comprende una etapa de identificar una sustancia que inhibe (1) la uniórJ entre el SDF-1 y el CXCR4, (2) la señalización desde el CXCR4 a los núcleos, (3) la expresiórJ del CXCR4, o (4) la expresión del SOF-1 como una sustancia que trata un cáncer sólido

15. Un procedimiento para evaluar la actividad anti-tumores sólidos de una sustancia, en base a la inhibición de la acción debida al CXCR4, en el que la sustancia es un anticuerpo anti-SDF-1, o un fragmento de dicho anticuerpo que posee la actividad del anticuerpo anti-SOF-1, o un anticuerpo anti-CXCR4, o un fragmento de dicho anticuerpo que posee la actividad del anticuerpo anti-CXCR4.

Procedimiento :según la reivindicación 15, que comprende una etapa de medir la actividad inhibidora de la acciórJ debida al CXCR4.

17. Procedimiento según la reivindicación 15, que comprende una etapa de medir la actividad inhibidora de (1) la uniórJ entre el SDF-1 y el CXCR4, (2) la señalización desde el CXCR4 hasta los núcleos, (3) la expresión del CXCR4, o (4)

09-12·2014

la expresión del SDF·1.