1,2,5-Oxadiazoles como inhibidores de la indoleamina 2,3-dioxigenasa.

Un compuesto de fórmula I:**Fórmula**

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

en la que:

R1 es NH2 o CH3;

R2 es Cl, Br, CF3, CH3 o CN;

R3 es H o F; y

n es 1 ó 2.

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a derivados de 1,2,5-oxadiazol que son inhibidores de la indoleamina 2,3- dioxigenasa y son útiles en el tratamiento de cáncer y otros trastornos. También se desvelan procedimientos y productos intermedios para prepararlos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

El triptófano (Trp) es un aminoácido esencial requerido para la biosíntesis de proteínas, niacina y el neurotransmisor 5-hidroxitriptamina (serotonina). La enzima indoleamina 2,3-dioxigenasa (también conocida como INDO o IDO) cataliza la primera etapa y limitante de la velocidad en la degradación de L-triptófano a N-formil-quinurenina. En células humanas, una reducción de Trp resultante de la actividad de IDO es un mecanismo efector antimicrobiano inducible por interferón gamma (IFN-y) importante. La estimulación de IFN-y induce la activación de IDO, que conduce a una reducción de Trp, deteniendo así el crecimiento de patógenos intracelulares dependientes de Trp tales como Toxoplasma gondii y Chlamydia trachomatis. La actividad de IDO también tiene un efecto antiproliferativo sobre muchas células tumorales, y se ha observado inducción de IDO in vivo durante el rechazo de tumores alógenos, que indica una posible función para esta enzima en el proceso de rechazo de tumor (Daubenery col., 1999, Adv. Exp. Med. Biol, 467: 517-24; Taylory col., 1991, FASEB J., 5: 2516-22).

Se ha observado que células HeLa co-cultivadas con linfocitos de sangre periférica (LSP) adquieren un fenotipo inmunoinhibidor mediante la regulación por incremento de la actividad de IDO. Se creyó que una reducción en la proliferación de LSP tras el tratamiento con interleucina-2 (IL-2) resultaba de la IDO liberada por las células tumorales en respuesta a la secreción de IFNG por los LSP. Este efecto se invirtió mediante el tratamiento con 1- metil-triptófano (1MT), un inhibidor de IDO específico. Se propuso que la actividad de IDO en células tumorales podía servir para alterar las respuestas antitumorales (Logan y col., 2002, Immunology, 105: 478-87).

Recientemente, una función inmunorreguladora de la reducción de Trp ha recibido mucha atención. Varias líneas de evidencia sugieren que la IDO participa en la inducción de tolerancia inmunitaria. Estudios de embarazo de mamífero, resistencia tumoral, infecciones crónicas y enfermedades autoinmunitarias han mostrado que las células que expresan IDO pueden suprimir las respuestas de linfocitos T y promover la tolerancia. Se ha observado catabolismo de Trp acelerado en enfermedades y trastornos asociados a activación inmunitaria celular, tales como infección, tumor maligno, enfermedades autoinmunitarias y SIDA, además de durante el embarazo. Por ejemplo, se han observado niveles elevados de IFN y elevados niveles de metabolitos de Trp urinario en enfermedades autoinmunitarias; se ha propuesto que la reducción sistémica o local de Trp que se produce en enfermedades autoinmunitarias puede relacionarse con los síntomas de degeneración y debilitamiento de estas enfermedades. En soporte de esta hipótesis, se observaron altos niveles de IDO en células aisladas del líquido sinovial de las articulaciones artríticas. Los IFN también son elevados en pacientes con virus de la ¡nmunodeficiencia humana (VIH) y niveles de IFN crecientes están asociados con un pronóstico de empeoramiento. Así, se propuso que IDO se induce crónicamente por infección por el VIH, y se aumentó adicionalmente por infecciones oportunistas, y que la pérdida crónica de Trp inicia mecanismos responsables de caquexia, demencia y diarrea y posiblemente inmunosupresión de pacientes con SIDA (Brown y col., 1991, Adv. Exp. Med. Biol., 294: 425-35). Para este fin, se ha mostrado recientemente que la inhibición de IDO puede potenciar los niveles de linfocitos T específicos de virus y, concomitantemente, reducir el número de macrófagos viralmente infectados en un modelo de ratón de VIH (Portula y col., 2005, Blood, 106: 2382-90).

Se cree que la IDO desempeña una función en los procesos inmunosuprimidos que previenen el rechazo fetal en el útero. Hace más de 40 años se observó que, durante el embarazo, el producto de la concepción de mamífero genéticamente dispar sobrevive a pesar de lo que se predeciría por la inmunología del trasplante de tejido (Medawar, 1953, Symp. Soc. Exp. Biol. 7: 320-38). La separación anatómica de la madre y el feto y la inmadurez antigénica del feto no pueden explicar completamente la supervivencia del aloinjerto fetal. La atención reciente se ha centrado en la tolerancia inmunológica de la madre. Debido a que la IDO se expresa por células de sincitiotrofoblasto humanas y la concentración de triptófano sistémico disminuye durante el embarazo normal, se supuso que la expresión de IDO en la interfase materno-fetal es necesaria para prevenir el rechazo inmunológico de los aloinjertos fetales. Para probar esta hipótesis, ratones preñados (que llevan fetos singénicos o alógenos) se expusieron a 1MT, y se observó un rápido rechazo inducido por linfocitos T de todos los productos de la concepción alógenos. Así, catabolizando triptófano, el producto de la concepción de mamífero parece suprimir la actividad de linfocitos T y se defiende a sí mismo del rechazo, y el bloqueo del catabolismo del triptófano durante el embarazo murino permite que los linfocitos T maternos provoquen rechazo fetal del aloinjerto (Munn y col., 1998, Science, 281: 1191-3).

Pruebas adicionales de un mecanismo de resistencia inmunitaria tumoral basado en la degradación de triptófano por IDO proceden de la observación de que la mayoría de los tumores humanos expresan constitutivamente IDO, y que la expresión de IDO por células tumorales de ratón inmunogénicas previene su rechazo por ratones preinmunizados.

Este efecto va acompañado de una falta de acumulación de linfocitos T específicos en el sitio tumoral y puede invertirse parcialmente por el tratamiento sistémico de ratones con un inhibidor de IDO, en ausencia de toxicidad perceptible. Así, se sugirió que la eficacia de la vacunación terapéutica de pacientes con cáncer podría mejorarse por la administración concomitante de un inhibidor de IDO (Uyttenhove y col., 2003, Nature Med., 9: 1269-74). También se ha mostrado que el inhibidor de IDO, 1-MT, puede sinergizar con agentes quimioterapéuticos para reducir el crecimiento tumoral en ratones, sugiriendo que la inhibición de IDO también puede potenciar la actividad antitumoral de terapias citotóxicas convencionales (Muller y col., 2005, Nature Med., 11: 312-9).

Un mecanismo que contribuye a la insensibilidad inmunológica hacia tumores puede ser la presentación de antfgenos de tumor por las APC del huésped tolerogénicas. También se ha descrito un subconjunto de células presentadoras de antígeno (APC) que expresan IDO humana que co-expresaron CD123 (IL3RA) y CCR6 e inhibieron la proliferación de linfocitos T. Tanto las células dendríticas positivas para CD123 maduras como inmaduras suprimieron la actividad de linfocitos T, y esta actividad supresora de IDO se bloqueó por 1MT (Munn y col., 2002, Science, 297: 1867-70). También se ha demostrado que los ganglios linfáticos drenantes de tumor de ratón (TDLN) contienen un subconjunto de células dendríticas plasmacitoides (pDC) que expresan constitutivamente niveles inmunosupresores de IDO. A pesar de que comprenden solo el 0,5 % de las células del ganglio linfático, in vitro, estas pDC suprimieron potentemente las respuestas de linfocitos T a antfgenos presentados por las propias pDC y, por tanto, de un modo dominante, suprimieron las respuestas de linfocitos T a antfgenos de la tercera parte presentados por APC no supresoras. Dentro de la población de pDC, la mayoría de la actividad supresora mediada por IDO funcional se segregó con un subconjunto novedoso de pDC que co-expresan el marcador de linaje B CD19. Así, se supuso que la supresión mediada por IDO por pDC en TDLN crea un microentorno local que es posiblemente supresor de las respuestas de linfocitos T antitumorales del huésped (Munn y col., 2004, J. Clin. Invest., 114(2): 280- 90).

IDO degrada el resto de indol del triptófano, la serotonina y la melatonina e inicia la producción de metabolitos neuroactivos e inmunorreguladores, conjuntamente conocidos como quinureninas. Reduciendo localmente el triptófano y aumentando las quinureninas proapoptósicas, la IDO expresada por células dendríticas (DC) puede afectar enormemente la proliferación y supervivencia de linfocitos T. La inducción de IDO en DC podría ser un mecanismo común de tolerancia de la deleción accionada por los linfocitos T reguladores. Debido a que puede esperarse que tales respuestas tolerogénicas operen en una variedad de afecciones fisiopatológicas, el metabolismo... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de fórmula I:

R

O, O

y

`N

H

R3

R2

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:

R1 es NH2 o CH3;

R2 es Cl, Br, CF3, CH3 o CN;

R3 es H o F; y n es 1 ó 2.

2. El compuesto de la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R1 es NH2.

3. El compuesto de la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R1 es CH3.

4. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R2 es Cl.

5. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R2 es Br.

6. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R2 es CF3.

7. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R2 es CH3.

8. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R2 es CN.

9. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R3 es H.

10. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R3 es F.

11. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que n es 1.

12. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que n es 2.

13. Un compuesto de la reivindicación 1 seleccionado de:

4-({2-[(Aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N,-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida; A/-(3-Bromo-4-fluorofenil)-A/,-hidroxi-4-({2-[(metilsulfonil)amino] etil} amino)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida; 4-({3-[(Aminosulfonil)amino]prop¡l}am¡no)-A/-(3-bromo-4-fluorofen¡l)-/V-h¡drox¡-1,2,5-oxadiazol-3- carboximidamida;

A/-(3-Bromo-4-fluorofenil)-/V-h¡drox¡-4-({3-[(met¡lsulfon¡l)am¡no]prop¡l}am¡no)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida;

4-({2-[(Aminosulfonil)amino]etil}amino)-A/-(3-cloro-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida;

A/-(3-Cloro-4-fluorofenil)-/V-hidroxi-4-({2-[(metilsulfonil)amino]etil}amino)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida;

4-({3-[(Aminosulfon¡l)am¡no]prop¡l}am¡no)-A/-(3-cloro-4-fluorofen¡l)-/V-h¡drox¡-1,2,5-oxadiazol-3-carbox¡m¡damida;

A/-(3-Cloro-4-fluorofenil)-/V-hidroxi-4-({3-[(metilsulfonil)amino]propil}amino)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida;

4-({2-[(Aminosulfonil)amino]etil}amino)-A/-[4-fluoro-3-(trifluorometil)fenil]-A/'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-

carboximidamida;

A/-[4-Fluoro-3-(trifluorometil)fenil]-/V-hidroxi-4-({2-[(metilsulfonil)amino]etil}-amino)-1,2,5-oxadiazol-3-

carboximidamida;

4-({3-[(Am¡nosulfonil)amino]propil}amino)-A/-[4-fluoro-3-(trifluoromet¡l)fenil]-A/,-hidrox¡-1,2,5-oxad¡azol-3-

carboximidamida;

A/-[4-Fluoro-3-(trifluorometil)fenil]-A/'-hidroxi-4-({3-[(metilsulfon¡l)am¡no]propil}-amino)-1,2,5-oxad¡azol-3-

carboximidamida;

4-({2-[(Aminosulfonil)amino]etil}amino)-A/'-hidroxi-A/-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida; A/'-Hidroxi-4-({2-[(metilsulfonil)amino]etil}amino)-A/-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida; 4-({3-[(Aminosulfonil)amino]propil}amino)-A/'-hidroxi-A/-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2,5-oxadiazol-3- carboximidamida;

A/'-Hidroxi-4-({3-[(metilsulfonil)amino]propil}amino)-A/-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida; A/-(4-Fluoro-3-metilfenil)-A/'-hidroxi-4-({2-[(metilsulfonil)amino]etil}amino)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida; 4-({2-[(Aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-ciano-4-fluoroferiil)-A/'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida; y A/-(3-Ciano-4-fluorofenil)-A/'-hidroxi-4-({2-[(metilsulfonil)amino]etil}amino)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

14. Un compuesto de la reivindicación 1 que es 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-A/-(3-bromo-4-fluorofen¡l)-/V- hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

15. Un compuesto de la reivindicación 1 que es 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-A/-(3-bromo-4-fluorofen¡l)-/V- hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida.

16. Una forma sólida del compuesto de la reivindicación 15 que es cristalina.

17. Una forma sólida del compuesto de la reivindicación 15 que contiene menos del 2 % de agua.

18. Una forma sólida del compuesto de la reivindicación 15 que tiene un punto de fusión de 162 a 166 °C.

19. Una forma sólida del compuesto de la reivindicación 15 que tiene un termograma de DSC como se muestra en la

Figura 2, +/- 3 °C.

20. Una forma sólida del compuesto de la reivindicación 15 que tiene al menos un pico de XRPD, en términos de 2- theta +/-0,2°, seleccionado de 18,4°, 18,9°, 21,8°, 23,9°, 29,2° y 38,7°

21. Una forma sólida del compuesto de la reivindicación 15 que tiene al menos dos picos de XRPD, en términos de 2-theta +/-0,2°, seleccionados de 18,4°, 18,9°, 21,8°, 23,9°, 29,2° y 38,7°

22. Una forma sólida del compuesto de la reivindicación 15 que tiene al menos tres picos de XRPD, en términos de 2-theta +/-0,2°, seleccionados de 18,4°, 18,9°, 21,8°, 23,9°, 29,2° y 38,7°

23. Una forma sólida del compuesto de la reivindicación 15 que tiene un patrón de XRPD como se muestra en la Figura 1, en la que están presentes picos que tienen una altura/lntensidad relativa de al menos el 4 % de la altura/intensidad máxima y los valores de 2-theta pueden variar +/-0,2°.

24. Un compuesto de fórmula F28:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:

R4 es F, Cl, Br o I; y n es 1 ó 2.

25. Un compuesto de la reivindicación 24, que es 4-({2-[(am¡nosulfon¡l)am¡no]et¡l}am¡no)-A/-[(4-bromo-2-fur¡l)met¡l]-A/'- h¡drox¡-1,2,5-oxadiazol-3-carbox¡m¡damida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

26. Un compuesto de la reivindicación 24, que es 4-({2-[(am¡nosulfon¡l)am¡no]et¡l}am¡no)-A/-[(4-cloro-2-fur¡l)met¡l]-A/'- h¡drox¡-1,2,5-oxadiazol-3-carbox¡m¡damida, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

27. Una composición que comprende un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y 24 a 26, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una forma sólida de una cualquiera de las reivindicaciones 16 a 23, y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable.

.OH

F28

28. Un procedimiento de inhibición de la actividad de ¡ndoleamina 2,3-dioxigenasa que comprende poner en contacto dicha ¡ndoleamina 2,3-dioxigenasa in vitro con un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y 24 a 26, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una forma sólida de una cualquiera de las reivindicaciones 16 a 23.

29. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y 24 a 26, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una forma sólida de una cualquiera de las reivindicaciones 16 a 23, para su uso en inhibir la inmunosupresión en un paciente.

30. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y 24 a 26, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una forma sólida de una cualquiera de las reivindicaciones 16 a 23, para su uso en el tratamiento de cáncer, infección viral, depresión, un trastorno neurodegenerativo, traumatismo, cataratas seniles, rechazo de trasplante de órgano o una enfermedad autoinmunitaha en un paciente.

31. El compuesto, sal o forma sólida para su uso según la reivindicación 30, en el que dicho cáncer está seleccionado de cáncer de colon, cáncer pancreático, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de pulmón, cáncer cerebral, cáncer de ovario, cáncer de cuello uterino, cáncer testicular, cáncer renal, cáncer de la cabeza y el cuello, linfoma y leucemia.

32. Uso de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y 24 a 26, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una forma sólida de una cualquiera de las reivindicaciones 16 a 23, en la fabricación de un medicamento para inhibir la inmunosupresión en un paciente.

33. Uso de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y 24 a 26, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una forma sólida de una cualquiera de las reivindicaciones 16 a 23, en la fabricación de un medicamento para tratar cáncer, infección viral, depresión, un trastorno neurodegenerativo, traumatismo, cataratas seniles, rechazo de trasplante de órgano o una enfermedad autoinmunitaria en un paciente.

34. El uso de la reivindicación 33, en el que dicho cáncer está seleccionado de cáncer de colon, cáncer pancreático, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de pulmón, cáncer cerebral, cáncer de ovario, cáncer de cuello uterino, cáncer testicular, cáncer renal, cáncer de la cabeza y el cuello, linfoma y leucemia.

35. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y 24 a 26, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una forma sólida de una cualquiera de las reivindicaciones 16 a 23, para administración a dicho paciente con un agente antiviral, una vacuna contra el cáncer, un anticuerpo anti-CTLA-4, un quimioterapéutico, un ¡nmunosupresor, radiación, una vacuna antitumoral, una vacuna antiviral, terapia con citocinas o un inhibidor de tirosina cinasas en una única forma de dosificación o simultáneamente o secuencialmente en formas de dosificación separadas.

36. Un compuesto, sal o forma sólida para administración según la reivindicación 35, en el que dicha terapia con citocinas comprende IL-2.

37. Un compuesto, sal o forma sólida para administración según la reivindicación 35, en el que dicho quimioterapéutico es un agente citotóxico.

38. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y 24 a 26, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una forma sólida de una cualquiera de las reivindicaciones 16 a 23, para su uso en el tratamiento de melanoma en un paciente.

39. Uso de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 y 24 a 26, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una forma sólida de una cualquiera de las reivindicaciones 16 a 23, en la fabricación de un medicamento para tratar melanoma en un paciente.