Análogos del glucagón.

Un compuesto que tiene la fórmula R1-X-Z-R2

en la que

R1 es hidrógeno,

alquilo C1-4, acetilo, formilo, benzoílo o trifluoroacetilo;

R2 es OH o NH2;

X es un péptido que tiene la fórmula I, His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Arg-Ala-Arg- Ala-Asp-Asp-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Lys-Glu-Ala

o difiere de la Fórmula I en hasta 4 de las siguientes posiciones, según lo cual, si es diferente de la Fórmula I:

el residuo en la posición 2 se selecciona de: Aib, D-Ser;

el residuo en la posición 16 es: Lys, Asp, Glu;

el residuo en la posición 18 se selecciona de: Lys, His, Ala, Ser, Tyr;

el residuo en la posición 20 se selecciona de: Gin, His, Lys, Arg, Glu;

el residuo en la posición 21 es: Glu;

el residuo en la posición 24 se selecciona de: Gin, Leu, Glu, Lys, Arg, Asp;

el residuo en la posición 27 se selecciona de: Met, Cys, Arg, Glu, Leu;

el residuo en la posición 28 se selecciona de: Asn, Ser, Arg, Lys, Ala, Leu, Glu, Asp; y

el residuo en la posición 29 se selecciona de: Thr, Glu, Lys;

y Z está ausente o es una secuencia de 1 - 20 unidades aminoacídicas seleccionadas del grupo que consiste en Ala, Leu, Ser, Thr, Tyr, Cys, Glu, Lys, Arg, Dbu, Dpr y Orn;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

con la condición de que X no sea His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Arg-Ala-Arg-Ala- Asp-Asp-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Lys-Ser-Thr.

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DESCRIPCIÓN

Análogos del glucagón

Campo de la invención

La presente invención se refiere a análogos del glucagón y a su uso médico, por ejemplo en el tratamiento de una excesiva ingesta de alimentos, obesidad y exceso de peso.

Antecedentes de la invención

El preproglucagón es un polipéptido precursor de 158 aminoácidos que se procesa diferencialmente en los tejidos para formar una serie de péptidos derivados de proglucagón estructuralmente relacionado, incluidos glucagón (Glu) , péptido 1 similar al glucagón (GLP-1) , péptido 2 similar al glucagón (GLP-2) y oxintomodulina (OXM) . Estas moléculas están implicadas en una amplia variedad de funciones fisiológicas, incluidas la homeostasis de la glucosa, la secreción de insulina, el vaciado gástrico y el crecimiento intestinal, así como la regulación de la ingesta de alimentos.

El glucagón es un péptido de 29 aminoácidos que corresponde a los aminoácidos 53 a 81 del preproglucagón y que tiene la secuencia His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr (SEC ID Nº 1) . La oxintomodulina (OXM) es un péptido de 37 aminoácidos que incluye la secuencia completa de 29 aminoácidos del glucagón con una extensión de ocho péptidos en el extremo carboxi (aminoácidos 82 a 89 del preproglucagón que tiene la secuencia Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala (SEC ID Nº 2) y el denominado â??péptido intermedio 1â?? o IP-1; por tanto, la secuencia completa de la oxintomodulina humana es His

Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ata-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Lys-Arg Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala (SEC ID Nº 3) . El fragmento principal biológicamente activo del GLP-1 se produce como un péptido de 30 aminoácidos amidado en el extremo C que corresponde a los aminoácidos 98 a 127 de preproglucagón.

El glucagón ayuda a mantener el nivel de glucosa en sangre a través de la unión a los recetores del glucagón sobre los hepatocitos, haciendo que el hígado libere la glucosa almacenada en forma de glucógeno mediante la glucogenolisis. A medida que estas reservas se van vaciando, el glucagón estimula el hígado para sintetizar glucosa adicional mediante la gluconeogénesis. Esta glucosa se libera en la circulación sanguínea, de modo que se previene el desarrollo de hipoglucemia.

La OXM se libera en la sangre en respuesta a la ingestión de alimentos y, en proporción, al contenido en calorías de la comida. Se ha demostrado que la OXM suprime el apetito e inhibe la ingesta de alimentos en seres humanos (Cohen y col., Journal of Endocrinology and Metabolism, 88, 46964701, 2003; documento WO 2003/022304) . Además de dichos efectos anorécticos, que son similares a los del GLP-1, la OXM también debe afectar al peso corporal mediante otro mecanismo, ya que las ratas tratadas con oxintomodulina muestran menos ganancia de peso corporal que las ratas alimentadas del mismo modo. El tratamiento de roedores obesos con OXM también mejora su tolerancia a la glucosa (Parlevliet et al, Am J Physiol Endocrinol Metab, 294, E142-7, 2008) y suprime la ganancia de peso corporal (documento WO 2003/022304) .

La OXM activa el receptor del glucagón y el receptor de GLP-1 con una potencia dos veces mayor para el receptor del glucagón sobre el receptor del GLP-1, pero es menos potente que el glucagón nativo y el GLP-1 en sus respectivos receptores. El glucagón también es capaz de activar ambos receptores, aunque con una fuerte preferencia por el receptor del glucagón sobre el receptor del GLP-1. Por otro lado, el GLP-1 no es capaz de activar el receptor del glucagón. El mecanismo de acción de la oxintomodulina no se entiende bien. En concreto, no se sabe si los efectos de la hormona están mediados exclusivamente por el receptor del glucagón y el receptor del GLP-1 o mediante uno o más receptores todavía no identificados.

Se ha demostrado que otros péptidos se unen y activan tanto el glucagón como el receptor del GLP-1 (Hjort et al, Journal of Biological Chemistr y , 269, 30121 -30124) y que suprimen la ganancia del peso corporal y reducen la 55 ingesta de alimentos (documentos WO 2006/134340; WO 2007/100535; WO 2008/101017) .

La obesidad se clasifica con un problema de salud globalmente creciente y se asocia con diversas enfermedades, en particular enfermedades cardiovasculares (ECV) , diabetes mellitus de tipo 2, apnea del sueño obstructiva, ciertos tipos de cáncer y osteoartritis. Como resultado, se ha encontrado que la obesidad reduce la esperanza de vida. De acuerdo con las proyecciones para 2005 de la Organización Mundial de la Salud, en todo el mundo hay 400 millones de adultos (edad > 15 años) clasificados como obesos. En EE.UU., actualmente se cree que la obesidad es la segunda causa principal de muerte evitable después del tabaquismo.

El aumento de la obesidad conlleva un incremento de la diabetes y aproximadamente el 90 % de las personas con 65 diabetes de tipo 2 se pueden clasificar como obesos. En todo el mundo hay 246 millones de personas con diabetes y para 2025 se ha estimado que 380 millones sufrirán diabetes. Muchos tienen factores de riesgo cardiovascular E08875671

adicionales, incluyendo niveles altos/aberrantes de LDL y triglicéridos y niveles bajos de HDL.

Las personas con diabetes tienen una probabilidad de 2 a 4 veces mayor de desarrollar enfermedades cardiovasculares que las personas sin diabetes, convirtiéndolas en la complicación más frecuente de la diabetes. La enfermedad cardiovascular constituye aproximadamente el 50 % de la mortalidad en personas con diabetes. Los adultos jóvenes con diabetes tienen índices de cardiopatía coronaria (CHC) 12-40 veces mayores que los de los adultos jóvenes sin diabetes y, junto con la elevada incidencia y prevalencia de la obesidad y la diabetes de tipo 2, los índices de morbididad y mortalidad relacionados con estos trastornos metabólicos subrayan la necesidad médica de opciones terapéuticas eficaces.

De acuerdo con lo anterior, existe una fuerte necesidad médica de tratar la obesidad y mejorar la tolerancia a la glucosa.

Sumario de la invención

La invención proporciona un compuesto que tiene la fórmula R1-X-Z-R2 en la que: R1 es hidrógeno, alquilo C1-4, acetilo, formilo, benzoílo o trifluoroacetilo; R2 es OH o NH2;

** (Ver fórmula) **

o difiere de la Fórmula I en hasta 4 de las siguientes posiciones, según lo cual, si es diferente de la Fórmula I:

el residuo en la posición 2 se selecciona de: Aib, D-Ser; el residuo en la posición 16 es: Lys, Asp, Glu; el residuo en la posición 18 se selecciona de: Lys, His, Ala, Ser, Tyr; el residuo en la posición 20 se selecciona de: Gln, His, Lys, Arg, Glu; el residuo en la posición 21 es: Glu; el residuo en la posición 24 se selecciona de: Gln, Leu, Glu, Lys, Arg, Asp; el residuo en la posición 27 se selecciona de: Met, Cys, Arg, Glu, Leu; el residuo en la posición 28 se selecciona de: Asn, Ser, Arg, Lys, Ala, Leu, Glu, Asp; y el residuo en la posición 29 se selecciona de: Thr, Glu, Lys;

y Z está ausente o una secuencia o 1 -20 unidades aminoacídicas seleccionadas del grupo que consiste en Ala, Leu, Ser, Thr, Tyr, Cys, Glu, Lys, Arg, Dbu, Dpr y Orn;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. con la condición de que X no sea His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Arg-Ala-Arg-Ala-Asp-Asp-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Lys-Ser-Thr (SEC ID Nº 5) .

En algunas realizaciones, X difiere de la Fórmula I en hasta 4 de las siguientes posiciones, según lo cual, si es diferente de la Fórmula I:

el residuo en la posición 2 se selecciona de: Aib, D-Ser;

el residuo en la posición 18 se selecciona de: Lys, His, Ala, Ser, Tyr; el residuo en la posición 20 se selecciona de: Gin, His, Lys, Arg, Glu; el residuo en la posición 24 se selecciona de: Gln, Leu, Glu, Lys, Arg; el residuo en la posición 27 se selecciona de: Met, Cys, Arg, Glu, Leu; el residuo en la posición 28 se selecciona de: Asn, Ser, Arg, Lys, Ala, Leu; y el residuo en la posición 29 se selecciona de: Thr, Glu, Lys.

En algunas realizaciones, X comprende los residuos 27-Lys y 28-Ser. En estos casos, X puede diferir adicionalmente de la Fórmula I en una o dos de las siguientes posiciones, según lo cual, si es diferente de la Fórmula I:

el residuo en la posición 2 se selecciona de: Aib, D-Ser; el residuo en la posición 18 se selecciona de: Lys, His, Ala, Ser, Tyr; el residuo en la posición 20 se selecciona de: Gln, His, Lys, Arg, Glu; el residuo en la posición 24 se selecciona de: Gln, Leu, Glu, Lys, Arg; y el residuo en la posición 29 se selecciona de: Thr, Glu, Lys.

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1. Un compuesto que tiene la fórmula R1-X-Z-R2 en la que R1 es hidrógeno, alquilo C1-4, acetilo, formilo, benzoílo o trifluoroacetilo; R2 es OH o NH2; X es un péptido que tiene la fórmula I, His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Arg-Ala-Arg-Ala-Asp-Asp-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Lys-Glu-Ala o difiere de la Fórmula I en hasta 4 de las siguientes posiciones, según lo cual, si es diferente de la Fórmula I:

el residuo en la posición 2 se selecciona de: Aib, D-Ser; el residuo en la posición 16 es: Lys, Asp, Glu; el residuo en la posición 18 se selecciona de: Lys, His, Ala, Ser, Tyr; el residuo en la posición 20 se selecciona de: Gin, His, Lys, Arg, Glu;

el residuo en la posición 21 es: Glu; el residuo en la posición 24 se selecciona de: Gin, Leu, Glu, Lys, Arg, Asp; el residuo en la posición 27 se selecciona de: Met, Cys, Arg, Glu, Leu; el residuo en la posición 28 se selecciona de: Asn, Ser, Arg, Lys, Ala, Leu, Glu, Asp; y el residuo en la posición 29 se selecciona de: Thr, Glu, Lys;

y Z está ausente o es una secuencia de 1 -20 unidades aminoacídicas seleccionadas del grupo que consiste en Ala, Leu, Ser, Thr, Tyr, Cys, Glu, Lys, Arg, Dbu, Dpr y Orn;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

con la condición de que X no sea His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Arg-Ala-Arg-Ala25 Asp-Asp-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Lys-Ser-Thr.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que X difiere de la Fórmula I en hasta 4 de las siguientes posiciones, según lo cual, si es diferente de la Fórmula I:

el residuo en la posición 2 se selecciona de: Aib, D-Ser; el residuo en la posición 18 se selecciona de: Lys, His, Ala, Ser, Tyr; el residuo en la posición 20 se selecciona de: Gln, His, Lys, Arg, Glu; el residuo en la posición 24 se selecciona de: Gln, Leu, Glu, Lys, Arg; el residuo en la posición 27 se selecciona de: Met, Cys, Arg, Glu, Leu;

el residuo en la posición 28 se selecciona de: Asn, Ser, Arg, Lys, Ala, Leu; y el residuo en la posición 29 se selecciona de: Thr, Glu, Lys.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, que comprende los residuo.

2. Lys .

2. Ser.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en el que X adicionalmente difiere de la Fórmula I en hasta 4 de las siguientes posiciones, según lo cual, si es diferente de la Fórmula I:

el residuo en la posición 2 se selecciona de: Aib, D-Ser; el residuo en la posición 18 se selecciona de: Lys, His, Ala, Ser, Tyr;

el residuo en la posición 20 se selecciona de: Gln, His, Lys, Arg, Glu; el residuo en la posición 24 se selecciona de: Gln, Leu, Glu, Lys, Arg; y el residuo en la posición 29 se selecciona de: Thr, Glu, Lys.

5. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que los residuos en las posiciones 16 y 20 pueden formar un puente de sal.

6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, que comprende los residuos 16-Arg.

2. Asp.

7. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que X comprende uno o 55 más de los siguientes grupos de residuos:

16. Arg; 16-Arg.

2. Asp; 16-Arg.

2. Asp.

2. Ala; 16-Arg.

2. Asp.

2. Lys.

2. Ser; 16-Arg.

2. Asp.

2. Ala; 16-Arg.

2. Lys.

2. Ser; 16-Arg.

2. Lys.

2. Ser.

2. Ala.

2. Ala.

2. Lys.

2. Ser;

24-Ala.

2. Lys.

2. Ser.

2. Ala.

2. Ala;

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27. Lys.

2. Ser.

2. Glu.

2. Ser.

2. Thr.

2. Glu.

2. Ser.

2. Thr.

2. Glu.

2. Arg;

2-D-Ser.

2. Ser.

2. Thr; .

2. His.

2. Ser.

2. Thr.

8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que X tiene la secuencia:

HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAWLKSA (SEC ID Nº 6) ; HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAWLKEA (SEC ID Nº 7) ; HSQGTFTSDYSKYLDRARAEDFVAWLKST (SEC ID Nº 8) ; HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVEWLKST (SEC ID Nº 9) ; HSQGTFTSDYSKYLDRARADDFVAWLERA (SEC ID Nº 10) ;

H-D-Ser-QGTFTSDYSKYLDRARADDFVAWLKST (SEC ID Nº 11) ; o HSQGTFTSDYSKYLDRARAHDFVAWLKST (SEC ID Nº 12) .

9. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R1 es H.

10. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R2 es NH2.

11. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que Z tiene una identidad de secuencia no superior al 25 % con la porción correspondiente de la secuencia de IP-1 de la oxintomodulina humana que tiene la secuencia Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala.

12. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que Z tiene una Cys como el residuo en el extremo C.

13. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en el que Z está ausente. 30

14. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que una o más cadenas laterales del aminoácido, por ejemplo en el péptido X, está conjugada con un sustituyente lipófilo o un resto polimérico.

15. Un ácido nucleico que codifica un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores.

16. Un vector de expresión que comprende un ácido nucleico de acuerdo con la reivindicación 15.

17. Una célula huésped que comprende un ácido nucleico de acuerdo con la reivindicación 15 o un vector de 40 expresión de acuerdo con la reivindicación 16.

18. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto, un ácido nucleico, un vector de expresión o una célula huésped de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

19. Uso de un compuesto, de un ácido nucleico, de un vector de expresión o de una célula huésped de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, en la preparación de un medicamento para prevenir la ganancia de peso, estimular la pérdida de peso o para el tratamiento de una afección causada o asociada con un exceso de peso corporal u obesidad, incluyendo obesidad mórbida, inflamación relacionada con obesidad, enfermedad de la vesícula 50 biliar relacionada con obesidad y apnea del sueño relacionada con obesidad, o para el tratamiento de la resistencia a la insulina, la intolerancia a la glucosa, la diabetes de tipo 2, la hipertensión, la dislipidemia aterogénica, la aterosclerosis, la arteriosclerosis, la cardiopatía coronaria o el ictus.

20. Un compuesto, un ácido nucleico, un vector de expresión o una célula huésped de acuerdo con una cualquiera 55 de las reivindicaciones 1 a 17, para uso en un método de tratamiento médico.

21. Un compuesto, un ácido nucleico, un vector de expresión o una célula huésped de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, para uso en un método de prevenir la ganancia de peso, estimular la pérdida de peso o para el tratamiento de una afección causada o asociada con un exceso de peso corporal u obesidad, incluyendo 60 obesidad mórbida, inflamación relacionada con obesidad, enfermedad de la vesícula biliar relacionada con obesidad y apnea del sueño relacionada con obesidad, o para el tratamiento de la resistencia a la insulina, la intolerancia a la glucosa, la diabetes de tipo 2, la hipertensión, la dislipidemia aterogénica, la aterosclerosis, la arteriosclerosis, la cardiopatía coronaria o el ictus.