Formulaciones de efectores de la unión estrecha.

Una composición que comprende unas primeras partículas de liberación retardada y unas segundas partículas de liberación retardada,

comprendiendo las primeras y segundas partículas de liberación retardada una cantidad eficaz de un efector de la unión estrecha que comprende un péptido que comprende la secuencia de aminoácido de SEC ID Nº 1, en donde el péptido tiene una longitud de 8-15 aminoácidos, en donde las primeras partículas de liberación retardada y las segundas partículas de liberación retardada comienzan a liberar el péptido a diferentes tiempos en el fluido intestinal, y

en la que:

las primeras partículas de liberación retardada comprenden:

una primera partícula central;

un primer revestimiento de base sobre la primera partícula central, en donde el primer revestimiento comprende una cantidad eficaz del péptido; y

un primer revestimiento de liberación retardada por fuera del primer revestimiento de base, siendo el primer revestimiento de liberación retardada sustancialmente estable en el fluido gástrico y efectuando la liberación eficazmente del péptido en un primer tiempo de liberación; y

las segundas partículas de liberación retardada comprenden:

una segunda partícula central;

un segundo revestimiento de base sobre la segunda partícula central, en donde el segundo revestimiento de base comprende la cantidad eficaz del péptido; y

un segundo revestimiento de liberación retardada, siendo el segundo revestimiento de liberación retardada sustancialmente estable en el fluido gástrico y efectuando la liberación eficazmente del péptido en un segundo tiempo de liberación.

Formulaciones de efectores de la unión estrecha

Campo de la invención La presente invención incluye formas de dosificación farmacéutica que comprenden ciertos antagonistas de la unión estrecha y un revestimiento entérico.

Antecedente de la invención Se produce una disfunción de las uniones estrechas intestinales en varias afecciones clínicas, incluyendo las alergias alimentarias, las infecciones del tracto intestinal, las enfermedades autoinmunes, y las enfermedades inflamatorias del intestino grueso. La mucosa sana, madura, con sus uniones estrechas intactas funciona como la principal barrera al paso de macromoléculas. Durante el estado sano, hay pequeñas cantidades de proteínas inmunológicamente activas que cruzan la barrera intestinal del huésped. Estas proteínas se absorben a través de la mucosa por medio de al menos dos rutas. La gran mayoría de las proteínas absorbidas (hasta el 90 %) cruza la barrera intestinal a través de la ruta transcelular, y posteriormente la degradación lisosómica convierte las proteínas en péptidos más pequeños no inmunógenos. Otras proteínas se transportan como proteínas intactas, a través de la ruta paracelular, que implica una sutil pero sofisticada regulación de las uniones estrechas intercelulares que dan lugar a la tolerancia proteínica (antigénica) . Cuando está afectada la integridad del sistema de uniones estrechas, como en el caso de nacimientos prematuros o después de la exposición a la radiación, quimioterapia, y/o toxinas, puede producirse una respuesta perjudicial a antígenos del entorno (que incluye las enfermedades autoinmunes y alergias alimentarias) .

Para hacer frente a los muy diversos desafíos fisiológicos y patológicos a los que están sometidos los epitelios, las uniones estrechas o zonula occludens (ZO) tienen que ser capaces de dar respuestas rápidas, fisiológicas, reversibles, con dependencia energética y coordinadas, lo que requiere la presencia de un sistema regulador complejo.

La toxina zonula occludens, que produce el Vibrio cholerae, ha sido caracterizada por Fasano y col., in Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 8: 5242-5246 (1991) y se ha determinado la secuencia (Nº de registro GenBank A43864) . La proteína ZOT del fago Vibrio cholerae CXT! aprovecha los mecanismos fisiológicos de regulación de las uniones estrechas. La ZOT posee múltiples dominios que permiten una función dual de la proteína como un péptido fago morfogenético para el fago Vibrio cholerae CXT! y como una enterotoxina que modula las uniones estrechas intestinales. Cuando se ensaya en la mucosa ilíaca de conejo, la toxina zonula occludens (ZOT) aumenta la permeabilidad intestinal modulando la estructura de las uniones estrechas intercelulares.

Se ha descubierto que la ZOT es capaz de abrir de manera reversible las uniones estrechas en la mucosa intestinal,

y por tanto, cuando la ZOT se coadministra con un agente terapéutico, es capaz de efectuar el suministro intestinal del agente terapéutico, cuando se emplea en una composición de dosificación vía oral para suministro intestinal de un fármaco (WO 96/37196; y Patente de Estados Unidos Nº 5.665.389; y Fasano y col., J. Clin. Invest., 99: 11581164 (1997) . En la Patente de Estados Unidos Nº 5.864.014 se ha identificado y purificado un receptor ZOT a partir de una línea celular intestinal, es decir, las células CaCo2. Además en la Patente de Estados Unidos 5.912.323, se 45 han identificado y purificado receptores a partir de tejidos humanos intestinal, cardíaco y cerebral.

La ZOT interviene en una cascada de acontecimientos intracelulares interactuando con la superficie de las células entéricas. Las uniones de la ZOT varían según las regiones del intestino delgado, siendo detectables en el yeyuno y en el íleon distal, disminuyendo a lo largo del eje vellosidades-criptas, y no siendo detectables en el colon. La 50 distribución de las uniones coincide con el efecto regional de la ZOT sobre la permeabilidad intestinal.

Se han identificado proteínas de mamíferos que están relacionadas inmunológica y funcionalmente con la ZOT. En la Patente de Estados Unidos Nº 5.945.510, se identifican y purifican nuevas proteínas de mamíferos que están relacionadas inmunológica y funcionalmente con la ZOT y también funcionan como un modulador de las uniones 55 estrechas en los mamíferos. Estas proteínas de mamíferos, denominadas como “zonulinas”, funcionan como efectoras fisiológicas de las uniones estrechas de mamíferos.

Se han identificado agonistas de las uniones estrechas (por ejemplo, los agonistas de la ZOT y/o zonulina) como se contemplan en el presente documento, que se unen al receptor ZOT. Estos agonistas abren rápidamente las 60 uniones estrechas de una manera reversible y reproducible, y por tanto se pueden utilizar para facilitar la biodisponibilidad de agentes terapéuticos o inmunógenos de la misma manera que se utiliza la ZOT como un potenciador del suministro intestinal, como se describe en las siguientes referencias patentes: WO 05/010022, WO 96/37196; Patente de Estados Unidos Nº 5.827.534; Patente de Estados Unidos Nº 5.665.389; y Patente de Estados Unidos Nº 5.908.825.

Se han identificado antagonistas de las uniones estrechas (por ejemplo, los antagonistas de la ZOT y/o zonulina) como se contemplan en el presente documento, que se unen al receptor ZOT, pero que no funcionan para modular fisiológicamente la apertura de las uniones estrechas de mamíferos. Véase, la Patente de Estados Unidos Nº

6.458.925. Los péptidos antagonistas inhiben competitivamente la unión de la ZOT y zonulina al receptor ZOT, y de esta manera inhiben la capacidad de ZOT y zonulina para modular fisiológicamente la apertura de las uniones estrechas de mamíferos. La inhibición de la apertura de las uniones estrechas en distintas barreras anatómicas puede ser útil en el tratamiento de enfermedades autoinmunes.

Sumario de la invención La presente invención proporciona composiciones que comprenden uno o más efectores de uniones estrechas. Tales composiciones comprenden una partícula central, y un revestimiento de liberación retardada sobre un revestimiento de base. Como se describe en el presente documento, el revestimiento de base puede comprender uno o más antagonistas de la unión estrecha y/o uno o más agonistas de la unión estrecha. El revestimiento de liberación retardada es sustancialmente estable en el fluido gástrico. En realizaciones específicas, el revestimiento de base puede comprender uno o más antagonistas de la unión estrecha, uno o más agonistas de la unión estrecha,

o combinaciones de uno o más antagonistas de uniones estrechas y agonistas de uniones estrechas. En algunas realizaciones, el revestimiento de liberación retardada puede comprender un compuesto Eudragit L.

Normalmente, el revestimiento de liberación retardada comprende un agente entérico que es sustancialmente estable en un medio ácido y sustancialmente inestable en un entorno cercano a la neutralidad o alcalino. Los revestimientos de liberación retardada adecuados pueden comprender uno o más triglicéridos que pueden seleccionarse de entre el grupo que consiste en triestearina, trioleína, tricaprilina, tricaprina, trimiristina, tripalmitina y trilaurina, y un agente de soporte del revestimiento.

Un ejemplo de agonista de la unión estrecha es la toxina zonula occludens (ZOT) , producida por el Vibrio cholerae. Un agonista del receptor ZOT es un compuesto que se cree que interviene en la apertura de la unión estrecha a través del mismo receptor que utiliza la ZOT. Otro agonista de la unión estrecha es la zonulina. Un agonista del receptor zonulina es un compuesto que se cree que interviene en la apertura de la unión estrecha por medio del mismo receptor utilizado por la zonulina. Tanto los agonistas del receptor ZOT como los agonistas del receptor zonulina son ejemplos de agonistas de la unión estrecha. Sin el deseo de quedar ligados por teoría alguna, se cree que la ZOT y la zonulina utilizan el mismo receptor mientras funcionan como agonistas de la unión estrecha. En la presente invención, las composiciones comprenden un antagonista de la unión estrecha que comprende un péptido que comprende la SEC ID Nº 1.

Las composiciones de la invención pueden comprender uno o más agentes terapéuticos o inmunógenos. Cuando está presente un agente terapéutico y/o inmunógeno se puede disponer en la partícula central. Ejemplos de agentes terapéuticos incluyen, pero sin limitarse a estos, agentes del metabolismo de la glucosa (por ejemplo, insulina, repaglinida, acetohexamida, tolbutamida, clorpropamida, tolazamida, miglitol, glimepirida, y similares) , antibióticos, antineoplásicos, antihipertensivos, antiepilépticos, agentes... [Seguir leyendo]

1. Una composición que comprende unas primeras partículas de liberación retardada y unas segundas partículas de liberación retardada,

comprendiendo las primeras y segundas partículas de liberación retardada una cantidad eficaz de un efector de la unión estrecha que comprende un péptido que comprende la secuencia de aminoácido de SEC ID Nº 1, en donde el péptido tiene una longitud de 8-15 aminoácidos, en donde las primeras partículas de liberación retardada y las segundas partículas de liberación retardada comienzan a liberar el péptido a diferentes tiempos en el fluido intestinal, y en la que:

las primeras partículas de liberación retardada comprenden:

una primera partícula central;

un primer revestimiento de base sobre la primera partícula central, en donde el primer revestimiento comprende una cantidad eficaz del péptido; y un primer revestimiento de liberación retardada por fuera del primer revestimiento de base, siendo el primer revestimiento de liberación retardada sustancialmente estable en el fluido gástrico y efectuando la liberación eficazmente del péptido en un primer tiempo de liberación; y

las segundas partículas de liberación retardada comprenden:

una segunda partícula central; un segundo revestimiento de base sobre la segunda partícula central, en donde el segundo revestimiento de

base comprende la cantidad eficaz del péptido; y un segundo revestimiento de liberación retardada, siendo el segundo revestimiento de liberación retardada sustancialmente estable en el fluido gástrico y efectuando la liberación eficazmente del péptido en un segundo tiempo de liberación.

2. La composición de la reivindicación 1, en la que las primeras partículas de liberación retardada son capaces de liberar el péptido en el duodeno de un paciente y las segundas partículas de liberación retardada son capaces de liberar el péptido en el yeyuno del paciente.

3. La composición de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2, en la que el péptido tiene una longitud de 8 a 10 35 aminoácidos.

4. La composición de la reivindicación 1 o de la reivindicación 2, en la que el péptido tiene una secuencia aminoacídica que consiste en la SEC ID Nº 1.

5. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que las partículas centrales tienen un tamaño medio de 15 a 40 mesh.

6. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que el material de la partícula central

comprende un óxido, celulosa, un polímero, una sal inorgánica o un azúcar. 45

7. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que el material de la partícula central es un azúcar.

8. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que el primer revestimiento de liberación retardada y el segundo revestimiento de liberación retardada comprenden un agente entérico seleccionado de entre un éter de celulosa, éster de celulosa, éter-éster de celulosa, laca, polímero éster acrílico, polímero éster metacrílico, copolímero de acrilato o metacrilato, o una mezcla de los mismos.

9. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que el primer revestimiento de liberación

retardada y el segundo revestimiento de liberación retardada comprenden un agente entérico seleccionado de entre un copolímero de ácido metacrílico, ftalato acetato de celulosa, ftalato de hidroxipropilmetil celulosa, carboximetiletil celulosa, poli (ácido metacrílico, metilmetacrilato) , acetato succinato de hidroxipropilmetil celulosa, trimetilato acetato de celulosa, goma laca, o una combinación de los mismos.

10. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que el primer revestimiento de liberación retardada y el segundo revestimiento de liberación retardada comprenden un polimetacrilato.

11. La composición de la reivindicación 10, en la que el polimetacrilato es ácido polimetacrílico y etil acetato 1:1.

12. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, que además comprende un revestimiento de sellado dispuesto sobre el primer revestimiento de base y sobre el segundo revestimiento de base.

13. La composición de la reivindicación 12, en la que el revestimiento de sellado comprende un azúcar, polietilén glicol, polivinilpirrolidona, alcohol polivinílico, acetato de polivinilo, hidroxipropil celulosa, metil celulosa, etil celulosa y/o hidroxipropil metil celulosa (HPMC) .

14. La composición de la reivindicación 12, en la que el revestimiento de sellado comprende HPMC.

15. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, que comprende además un último

revestimiento alrededor del exterior de cada primera partícula de liberación retardada y de cada segunda partícula 10 de liberación retardada.

16. La composición de la reivindicación 15, en la que el último revestimiento comprende azúcar, polietilén glicol, polivinilpirrolidona, alcohol polivinílico, acetato de polivinilo, hidroxipropil celulosa, metil celulosa, etil celulosa y/o hidroxipropil metil celulosa (HPMC) .

17. La composición de la reivindicación 16, en la que el último revestimiento comprende HPMC.

18. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, en la que el primer revestimiento de base y/o el

segundo revestimiento de base además comprenden un aglutinante farmacéuticamente aceptable. 20

19. La composición de la reivindicación 18, en la que el aglutinante comprende un azúcar natural, almidón, gelatina. edulcorante de maíz, goma, carboximetil celulosa, polivinilpirrolidona, hidroxipropil celulosa, hidroxietil celulosa, etil celulosa, polimetacrilato, polietilén glicol o cera.

20. La composición de la reivindicación 18, en la que el aglutinante comprende azúcar.

21. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, en la que los revestimientos de liberación retardada primero y segundo comprenden además talco.

22. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, que comprende además un adyuvante de procesamiento inerte y/o un plastificante.

23. La composición de la reivindicación 22, en la que el adyuvante de procesamiento inerte comprende dióxido de silicio, talco y/o estearato magnésico. 35

24. La composición de la reivindicación 22, en la que el plastificante comprende un éster del ácido cítrico, triacetina, éster del ácido ftálico, dibutil sebacato, alcohol cetílico, polietilén glicol y/o polisorbato.

25. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24, en donde la composición es una cápsula. 40

26. La composición de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 25 para su uso en un método para el tratamiento de inflamación intestinal, comprendiendo el método, la administración de la composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 a un paciente que necesite el tratamiento.

27. La composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 26, en la que el paciente tiene enfermedad celíaca.

28. La composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 26, en la que el paciente tiene una enfermedad inflamatoria del intestino grueso.

29. La composición para su uso de acuerdo con la reivindicación 26, en la que el paciente tiene la enfermedad de Crohn.