INHIBIDORES DE ENZIMAS.

Esta invención se refiere a compuestos que inhiben a miembros de la familia de enzimas histona desacetilasa y a su uso en el tratamiento de enfermedades de células proliferativas, incluyendo cánceres, enfermedades asociadas a la 5 poliglutamina, por ejemplo, la enfermedad de Huntingdon, enfermedades neurodegenerativas, por ejemplo, la enfermedad de Alzheimer, enfermedades autoinmunes, por ejemplo, la artritis reumatoide y el rechazo del trasplante de órganos, la diabetes, trastornos hematológicos, enfermedades inflamatorias, enfermedades cardiovasculares, aterosclerosis, y secuelas inflamatorias producidas por infecciones. Antecedentes de la invención ES 2 367 369 T3 En las células eucarióticas, el ADN se empaqueta con las histonas formando la cromatina. Aproximadamente son envueltos 150 pares de bases de ADN dos veces alrededor de un octámero de histonas (dos por cada una de las histonas 2A, 2B, 3 y 4) formando un nucleosoma, la unidad básica de la cromatina. La estructura ordenada de la cromatina tiene que ser modificada a fin de permitir la transcripción de los genes asociados. La regulación transcripcional es clave para la diferenciación, proliferación y apoptosis, y está, por lo tanto, fuertemente controlada. 15 El control de los cambios de la estructura de la cromatina (y por lo tanto de la transcripción) está mediado por modificaciones covalentes a histonas, más específicamente de las colas del extremo N-terminal. Las modificaciones covalentes (por ejemplo, metilación, acetilación, fosforilación y ubiquitinación) de las cadenas laterales de los aminoácidos son mediadas enzimáticamente (una revisión de las modificaciones covalentes de histonas y su papel en la regulación transcripcional puede ser encontrado en Berger SL 2001 Oncogene 20, 3007-3013; Véase Grunstein, M 1997 Nature 389, 349-352; Wolffe AP 1996, Science 272, 371-372; y Wade PA et al., 1997 Trends Biochem Sci 22, 128-132 para revisiones de acetilación y transcripción de histonas). La acetilación de histonas tiene que ver con áreas de cromatina que son transcripcionalmente activas, mientras que los nucleosomas con niveles de acetilación bajos son, típicamente, transcripcionalmente silenciosos. El estado de acetilación de las histonas es controlado por dos clases de enzimas de actividades contrarias; las histona 25 acetiltransferasas (HAT) y las histona desacetilasas (HDAC). En las células transformadas se cree que la expresión inadecuada de las HDAC causa la silenciación de genes supresores de tumores (para una revisión de los papeles potenciales de las HDAC en la tumorogénesis véase Gray SG y Teh BT 2001 Curr Mol Med 1, 401-429). Se han descrito en la bibliografía inhibidores de las enzimas HDAC y parece que inducen la reactivación transcripcional de ciertos genes que causan la inhibición de la proliferación de células del cáncer, la inducción de la apoptosis y la 30 inhibición del crecimiento de tumores en animales (Para una revisión véase Kelly, WK et al., 2002 Expert Opin Investig Drugs 11, 1695-1713). Dichas conclusiones sugieren que los inhibidores de HDAC tienen un potencial terapéutico en el tratamiento de enfermedades proliferativas, tales como el cáncer (Kramer, Ohio et al., 2001 Trends Endocrinol 12, 294-300, Vigushin DM y Coombes RC 2002 Anticancer Drugs 13, 1-13). Además, otros han propuesto que la acetilación de histonas o la actividad de HDAC aberrante está implicada en las 35 siguientes enfermedades y desórdenes: enfermedad asociada a la poliglutamina, por ejemplo, enfermedad de Huntingdon (Hughes RE 2002 Curr Biol 12, R141R143; McCampbell A et al 2001 Proc Soc Natl Acad Sci 98, 15179­ 15184; Hockly E et al 2003 Proc Soc Natl Acad Sci 100, 2041-2046), otras enfermedades neurodegenerativas, por ejemplo la enfermedad de Alzheimer (Hempen B y Brion JP 1996, J Neuropathol Exp Neurol 55, 964-972), enfermedades autoinmunes y rechazo de trasplantes de órganos (Skov S et al 2003 Blood 101, 14 30-1438; Mishra 40 N et al 2003 J Clin Invest 111, 539-552), diabetes (Mosley AL y Ozcan S 2003 J Biol Chem 278, 19660 -19666) y complicaciones diabéticas, infecciones (incluyendo infecciones protozoarias (Darkin-Rattray, SJ et al., 1996 Proc Soc Natl Acad Sci 93, 13143-13147)) y desórdenes hematológicos incluyendo la talasemia (Witt O et al 2003 Blood 101, 2001-2007). Las observaciones contenidas en estos manuscritos sugieren que la inhibición de HDAC debe tener ventajas terapéuticas en estas enfermedades y otras relacionadas. 45 Se han sugerido muchos tipos de compuestos del inhibidor de HDAC, y varios compuestos están siendo evaluados actualmente clínicamente, para el tratamiento de cánceres. Por ejemplo, las siguientes publicaciones de patentes describen a dichos compuestos: US 5.369.108 y WO WO 03/076395 WO 04/110989 01/18171 WO 03/076400 WO 04/092115 US 4,254,220 WO 03/076401 WO 04/0224991 WO 01/70675 WO 03/076421 WO 05/014588 WO 01/38322 WO 03/076430 WO 05/018578 WO 02/30879 WO 03/076422 WO 05/019174 WO 02/26703 WO 03/082288 WO 05/004861 2 WO 02/069947 WO 03/087057 WO 05/007091 WO 02/26696 WO 03/092686 WO 05/030704 WO 03/082288 WO 03/066579 WO 05/013958 WO 02/22577 WO 03/011851 WO 05/028447 5 WO 03/075929 WO 04/013130 WO 05/026907 Muchos de los inhibidores de HDAC conocidos en la técnica tienen una plantilla estructural, que puede ser representada como en la fórmula (A): [Conector] en donde el anillo A es un sistema de anillos carbocíclico o heterocíclico con sustituyentes opcionales R, y el 10 [Conector] es un radical conector de varios tipos. El grupo hidroxamato funciona como un grupo de unión metálico, que interacciona con el ión metálico en el sitio activo de la enzima HDAC, que está en la base de una bolsa en la estructura de la enzima plegada. El anillo o el sistema de anillos está tumbado dentro de entrada a la bolsa, o dentro, que contiene el ión metálico, extendiéndose el radical -[Conector]- más profundamente dentro de dicha bolsa que conecta uniendo a A al metal que se une al grupo del ácido hidroxámico. En la técnica, y de vez en cuando en 15 este documento, el anillo o sistema de anillos A es a veces informalmente denominado el "grupo principal" del inhibidor. El uso de profármacos para potenciar la administración a órganos y tejidos dianas, o superar las pobres propiedades farmacocinéticas del fármaco parenteral, es un enfoque de química medicinal conocido. La administración de profármacos de éster, por ejemplo, que son hidrolizados por carboxilesterasas de suero in vivo en los ácidos 20 parenterales activos, puede causar niveles de suero más altos del ácido parenteral que la administración del propio ácido. Breve descripción de la invención Esta invención está basada en el descubrimiento de que la introducción de un éster de un aminoácido alfa que se agrupa en la plantilla molecular del inhibidor de HDAC (A) anterior facilita la penetración del agente a través de la 25 membrana celular, y así permite que la actividad de la carboxilesterasa intracelular hidrolice al éster que suelta al ácido parenteral. Cuando está cargado, el ácido no es fácilmente transportado dentro la célula, éste se acumula por lo tanto aumentando la concentración intracelular del inhibidor de HDAC activo. Esto lleva a aumentos de la potencia y la duración de la acción. La invención por lo tanto pone a disposición una clase de compuestos cuyas estructuras son caracterizadas por tener un resto éster de un aminoácido alfa que es un sustrato para la carboxilesterasa 30 intracelular (también denominada en este documento un "motivo de esterasa") covalentemente unido a una plantilla molecular de un inhibidor de HDAC, y a los correspondientes ácidos parenterales esterificados, teniendo dichos compuestos utilidad farmacéutica en el tratamiento de enfermedades, tales como cánceres que se benefician de la inhibición intracelular de HDAC. Descripción detallada de la invención ES 2 367 369 T3 35 Según la presente invención se proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal, N-óxido, hidrato o solvato del mismo: [Conector] en donde ciclohexilmetilo, ciclohexilo, piridin-3-ilmetilo, sec-butilo, terc-butilo, 1-benciltio-1-metiletilo, 1-etiltio1metiletilo y 1-mercapto-1-metiletilo, fenilo, bencilo, feniletilo, terc-butoximetilo o iso-butilo. 40 Aunque la anterior definición potencialmente incluya a moléculas de peso molecular alto, es preferible, de acuerdo con los principios generales de la práctica de la química medicinal, que los compuestos a los cuales esta invención está referida deben tener pesos moleculares de no más de 600. En otro amplio aspecto, la invención proporciona el uso de un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente, o un N-óxido, sal, hidrato o solvato del mismo en la preparación de una composición para el 45 tratamiento de una enfermedad de proliferación celular, por ejemplo, la proliferación de células cancerígenas,... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de fórmula (I) o una sal, N-óxido, hidrato o solvato del mismo: en donde [Conector] 5 R1 es un grupo éster de que es hidrolizable por una o varias de las enzimas carboxilesterasa intracelulares hCE1, hCE-2 y hCE-3 en un grupo ácido carboxílico; R2 es ciclohexilmetilo, ciclohexilo, piridin-3-ilmetilo, sec-butilo, terc-butilo, 1-benciltio-1-metiletilo, 1-etiltio-1metiletilo y 1-mercapto-1-metiletilo, fenilo, bencilo, feniletilo, terc-butoximetilo o iso-butilo. Y es un enlace, -C(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)O-, -C(=O)NR3-, -C(=S)-NR3, -C(=NH)NR3 o -S(=O)2NR3- en 10 donde R3 es hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; L 1 es un radical divalente de fórmula -(Alk 1 )m(Q)n(Alk 2 )p- en donde m, n y p son independientemente 0 o 1, Q es (i) un radical carbocíclico o heterocíclico monocíclico o bicíclico divalente opcionalmente sustituido con 5-13 miembros de anillo, o (ii), en el caso en el que tanto m como p sean 0, un radical divalente de fórmula­ 15 X 2 -Q 1 - o -Q 1 -X 2 en el que X 2 es -O-, S- o NR A - en donde R A es hidrógeno o alquilo C1-C3 opcionalmente sustituido, y Q 1 es un radical carbocíclico o heterocíclico monocíclico o bicíclico divalente opcionalmente sustituido con 5-13 miembros de anillo, Alk 1 y Alk 2 representan independientemente radicales cicloalquilo C3-C7 divalentes opcionalmente sustituidos, u opcionalmente sustituido de cadena lineal o ramificada, radicales alquileno C1-C6, alquenileno C2-C6, o alquinileno C2-C6 que pueden contener opcionalmente o estar terminados en un enlace éter (-O-), tioeter (-S-) o amino (-NR A -) en donde R A es hidrógeno o alquilo C1-C3 opcionalmente sustituido; X 1 representa un enlace; -C(=O); o -S(=O)2-; -NR4C(=O)-, -C(=O)NR4-, -NR4C(=O)NR5-, -NR4S(=O)2-, O­ S(=O)2NR4- en donde R4 y R5 son independientemente hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido; z es 0 o 1; 25 A es el siguiente sistema de anillo, opcionalmente sustituido: -[Conector]- representa un radical divalente de fórmula - (CH2)xZ-L 2 - en donde x es 0 o 1; ES 2 367 369 T3 Z es un enlace,-NR3C(=O)-, -C (=O)NR3-, -NR4C(=O)NR3-, -C(=S)-NR3, -C (=NH)-NR3-NR3S (=O)2­ 30 , o -S(=O)2NR3- en donde R3 es hidrógeno o alquilo C1-C6; -C(=O); o -S(=O)2-; y L 2 representa un radical alquileno C4-C7, alquenileno C4-C6 o alquinileno C4-C6 opcionalmente sustituido, lineal o ramificado, que puede contener opcionalmente o terminar en una unión éter (-O-), tioeter (-S-) o amino (NR A -) en donde R A es hidrógeno o alquilo C1-C3 opcionalmente sustituido; y en donde la expresión "opcionalmente sustituido" significa opcionalmente sustituido con hasta cuatro 35 sustituyentes compatibles, cada uno de los cuales es independientemente seleccionado de alquilo C1-C6, alcoxi (C1-C6), hidroxi, hidroxi alquilo (C1-C6), mercapto, mercapto alquilo (C1-C6), alquil (C1­ C6)-tio, fenilo, halo (incluyendo fluoro, bromo y cloro), trifluorometilo, trifluorometoxi, nitro, nitrilo (­ CN), oxo, -COOH, -COOR A , -COR A ,-SO2R A , -CONH2, -SO2NH2, -CONHR A , -SO2NHR A , ­ CONR A R B , -SO2NR A R B , -NH2, -NHR A , -NR A R B , -OCONH2, -OCONHR A , -OCONR A R B , -NHCOR A , ­ 40 NHCOOR A , -NR B COOR A , -NHSO2OR A , -NR B SO2OH, -NRBSO2OR A , -NHCONH2, -NR4CONH2, ­ NHCONHR B , -NR A CONHR B , -NHCONR A R B , o -NR A CONR A R B en donde R A y R B son independientemente alquilo (C1-C6), cicloalquilo (C3-C6), fenilo o heteroarilo monocíclico con 5 o 6 átomos de anillo. 58 2. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1 en donde x es 0. 3. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1 o la reivindicación 2 en el que Z es -C(=O)-, -NHC(=O)- o- C (=O)NH-. 4. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 2 o la reivindicación 3 en el que L 2 es -(CH2)5-, -(CH2)6-, o ­ (CH2)7-. 5. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones precedentes en el que z es 0. 6. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones precedentes en el que Y es -S(=O)2-, ­ C(=S)-NR 3 , -C(=NH)-NR 3 o -S(=O)2NR 3 - en el que R 3 es hidrógeno o alquilo (C1-C6). 7. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en el que Y es un enlace. 8. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones precedentes en el que, el radical L 1 , Alk 1 y Alk 2 , cuando están presentes, se seleccionan de -CH2-, -CH2CH2-,- CH2CH2CH2-, y radicales divalente ciclopropilo, ciclopentilo y ciclohexilo. 9. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones precedentes en el que, en el radical L 1 , Q es un radical fenilo divalente o un heteroarilo mono- o bi-cíclico teniendo el radical de 5 a13 miembros de anillo. 10. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 8 en el que Q es 1,4-fenileno. 11. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones precedentes en el que, en el radical L 1 m y p son 0. 12. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 en el que, en el radical L 1 , n y p son 0 y m es 1. 13. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 en el que, en el radical L 1 , m, n y p son todos 0. 14. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones precedentes en el que el radical -Y-L 1 ­ X 1 -[CH2]z- se selecciona de -C(=O)-, -C(=O)NH-, -(CH2)v-. -(CH2)vO-, -C(=O)-(CH2)v, -C(=O)-(CH2)vO-, -C(=O)-NH­ (CH2)w, -C(=O)-NH-(CH2)wO- en el que v es 1, 2, 3 o 4 y w es 1, 2 o 3. ES 2 367 369 T3 15. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 en el que el radical -Y-L 1 -X 1 - [CH2]- es -CH2-, -CH2O-, -C(=O)-CH2-, C(=O)-CH2O-, -C(=O)-NH-CH2-, o -C(=O)-NH-CH2O-. 16. Un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones precedentes en el que R1 es un grupo éster de fórmula -(C=O)OR9 en el que R9 es y (i) R7R8CH- en el que R7 es alquil (C1-C3)-(Z 1 )a-alquil (C1-C3)- o alquenil alquil (C2-C3)-(Z 1 )a-alquil (C1-C3)opcionalmente sustituido en el que a es 0 o 1 y Z es -O-, -S-, o -NH-, y R8 es hidrógeno o alquil (C1-C3)-o R7 y R8, tomados juntos con el carbono al cual se unen, forma un anillo cicloalquilo C3-C7 opcionalmente sustituido o un anillo heterocíclico opcionalmente sustituido de 5 o 6 átomos de anillos; o (ii) fenilo opcionalmente sustituido o heterocíclico monocíclico con 5 o 6 átomos de anillo, 17. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 16 en el que R9 es metilo, el etilo, n- o iso-propilo, n- o secbutilo, ciclohexilo, alilo, fenilo, bencilo, 2-, 3- o 4-piridilmetilo, N-metilpiperidin-4-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo o metoxietilo. 18. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 17 en el que R9 es ciclopentilo. 19. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1 en el que la fórmula (I) define al éster de ciclopentilo del ácido (S)-3-terc-butoxi-2-[3-(7-hidroxicarbamoil-heptanoilamino) - bencilamino]-propionico; 20. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1 en el que la fórmula (I) define al éster de ciclopentilo del ácido (S)-[3-(7-hidroxicarbamoil-heptanoilamino)-bencilamino] - fenil-acético; 21. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1 en el que la fórmula (I) define al éster de ciclopentilo del ácido (S)-[4-(7-hidroxicarbamoil-heptanoilamino)-bencilamino] - fenil-acético; 59 ES 2 367 369 T3 22. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1 en el que la fórmula (I) define al éster de ciclopentilo del ácido (S)-2-[3-(7-hidroxicarbamoil-heptanoilamino)-bencilamino] - 4-metil-pentanoico. 23. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones precedentes, junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable. 5 24. El uso de un compuesto de fórmula (I) como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22 en la preparación de una composición para el tratamiento de una enfermedad de proliferación celular, enfermedad relacionada con la poliglutamina, enfermedad neurodegenerativa, enfermedad autoinmune, enfermedades inflamatorias, rechazo de trasplante de órgano, diabetes, trastornos hematológicos o infecciones. 25. El uso como se reivindica en la reivindicación 24 en el que Y es un enlace, -S(=O)2 o -S(=O)2NR3- en el que R3 10 es hidrógeno o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido. 26. El uso como se reivindica en la reivindicación 24 para el tratamiento de una enfermedad de proliferación celular, enfermedad de Huntingdon o enfermedad de Alzheimer. 27. El uso como se reivindica en la reivindicación 24 del tratamiento de la artritis reumatoide. 28. Una composición farmacéutica como se reivindica en la reivindicación 23 que está adaptada a la administración 15 tópica y en la que, en el compuesto que se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22, R2 está unido al átomo de carbono al cual se une por un metileno radical -CH2-.