Formulaciones farmacéuticas de inhibidores de la HDAC.

Composición farmacéutica, que comprende:

(a) un inhibidor de la HDAC;

y,

(b) meglumina;

en la que dicho inhibidor de la HDAC es un compuesto de la fórmula siguiente o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:**Fórmula**

Formulaciones farmacéuticas de inhibidores de la HDAC 5 SOLICITUDES RELACIONADAS

[0001] Esta solicitud se relaciona con la solicitud de patente provisional de Estados Unidos 60/581,215 presentada el 13 de mayo de 2005; y la solicitud de patente provisional de Estados Unidos 60/681,234 presentada el 13 de mayo de 2005.

CAMPO TÉCNICO

[0002] Esta invención se refiere de forma general al campo de los agentes farmacéuticos y a la farmacia, y más específicamente a composiciones farmacéuticas que comprenden ciertos compuestos de ácido carbámico (por

ejemplo, los que inhiben la actividad histona desacetilasa (HDAC)) y uno o más ingredientes adicionales seleccionados entre ciclodextrina, arginina y meglumina. La presente invención se refiere asimismo al uso de tales composiciones, por ejemplo en la inhibición de la HDAC y en el tratamiento de afecciones mediadas por la HDAC.

ANTECEDENTES

Histona desacetilasa ÍHDAC1

[0003] En las células eucariotas, el ADN está complejado firmemente con proteínas (histonas) para formar la cromatina. Las histonas son proteínas pequeñas de carga positiva que son ricas en aminoácidos básicos (cargados

positivamente a pH fisiológico) que están en contacto con los grupos fosfato (cargados negativamente a pH fisiológico) del ADN. Existen cinco clases principales de histonas, H1, H2A, H2B, H3 y H4. Las secuencias de aminoácidos de las histonas H2A, H2B, H3 y H4 muestran una extraordinaria conservación entre especies, mientras que la H1 varía ligeramente y, en algunos casos, está remplazada por otra histona, por ejemplo H5. Cuatro parejas de cada una de H2A, H2B, H3 y H4 juntas forman un núcleo proteico octomérico en forma de disco, alrededor del 30 cual se enrolla el ADN (aproximadamente 140 pares de bases) para formar un nucleosoma. Los nucleosomas individuales están conectados mediante cortos tramos elásticos de ADN conector asociado a otra molécula de histona (por ejemplo, H1 o, en determinados casos, H5) para formar una estructura similar a un collar de perlas, que se organiza a su vez en una pila helicoidal, conocida como solenoide.

[0004] La mayoría de las histonas se sintetizan durante la fase S del ciclo celular, y las histonas recién

sintetizadas entran rápidamente en el núcleo para asociarse con el ADN. Minutos después de su síntesis, el ADN nuevo se asocia con las histonas para formar estructuras nucleosomales.

[0005] Una pequeña fracción de las histonas, más específicamente las cadenas laterales amino de las 40 mismas, se modifica enzimáticamente mediante la adición postraduccional de grupos metilo, acetilo o fosfato,

neutralizando la carga positiva de la cadena lateral o convirtiéndola en una carga negativa. Por ejemplo, los grupos lisina y arginina se pueden metilar, los grupos lisina se pueden acetilar y los grupos serina se pueden fosforilar. Para la lisina, la cadena lateral -(CH2)4-NH2 se puede acetilar, por ejemplo, mediante una enzima acetiltransferasa para dar la amida -(CH2)4-NHC(=0)CH3. La metilación, acetilación y fosforilación de los extremos amino terminales de las 45 histonas que se extienden desde el núcleo nucleosomal afectan a la estructura de la cromatina y la expresión génica. (Véase, por ejemplo, Spencer, V.A. y Davie. J.R., 1999, Gene, vol. 240(1), págs. 1-12).

[0006] La acetilación y desacetilación de las histonas están asociadas a acontecimientos transcripcionales que conducen a la proliferación y/o diferenciación celular. La regulación de la función de los factores de transcripción

también es mediada por acetilación. Revisiones recientes sobre la desacetilación de histonas incluyen: Kouzarides, T., 1999, "Histone acetylases and deacetylases in cell proliferation", Curr. Opin. Genet. Dev., vol. 9, n° 1, págs. 40- 48; Pazin, M.J., y col., 1997, "What's up and down with histone deacetylation and transcription?", Cell, vol. 89, n° 3, págs. 325-328.

[0007] La correlación entre el estado de acetilación de las histonas y la transcripción de genes se conoce

desde hace más de 30 años (véase, por ejemplo, Howe, L., y col., 1999, Crit. Rev. Eukaryot. Gene Expr., vol. 9(3-4), págs. 231-243). En muchos organismos se han identificado ciertas enzimas, específicamente acetilasas (por ejemplo, la histona acetiltransferasa, HAT) y desacetilasas (por ejemplo, la histona desacetilasa, HDAC), que regulan el estado de acetilación de las histonas y que se han implicado en la regulación de numerosos genes, 60 confirmando la conexión entre la acetilación y la transcripción. Véase, por ejemplo, Davie, J.R., 1998, "Covalent modifications of histones: expression from chromatic templates", Curr. Opin. Genet. Dev., vol. 8, págs. 173-178. En general, la acetilación de las histonas está correlacionada con la activación transcripcional, mientras que la desacetilación de las histonas está asociada a la represión génica.

[0008] Se ha identificado un número creciente de histona desacetilasas (HDAC), incluyendo las HDAC1 a

HDAC11 (véase, por ejemplo, Ng, H.H. y Bird, A., 2000, Trends Biochem. Sci., vol. 25(3), págs. 121-126). Asimismo

se ha identificado una serie de histona desacetilasas de levadura e histona desacetilasas de plantas. La primera desacetilasa, la HDAC1, se Identificó en 1996 (véase, por ejemplo, Tauton, J., y col., 1996, Science, vol. 272, págs. 408-411). Seguidamente se descubrieron otras dos desacetilasas nucleares de mamíferos, la HDAC2 y HDAC3. Véanse, por ejemplo: Yang, W.M., y col., 1996, Proc. Nati. Acad. Sc¡. USA, vol. 93, págs. 12845-12850; Yang, W.M., 5 y col., 1997, J. Biol. Chem., vol. 272, págs. 28001-28007; Emiliani, S., y col., 1998, Proc. Nati. Acad. Sc¡. USA vol. 95, págs. 2795-2800; Grozinger y col., 1999, Proc. Nati. Acad. Sci. USA vol. 96, págs. 4868-4873; Kao y col., 2000, Genes & Dev., vol. 14, págs. 55-66; Van den Wyngaert y col., 2000, FEBS, vol. 478, págs. 77-83.

[0009] Las HDAC funcionan como parte de grandes complejos multiproteicos que están unidos al promotor y 10 reprimen la transcripción. Para ejercer su función represora se asocian con los complejos de HDAC represores

transcripcionales bien caracterizados, tales como Mad (Laherty, C.D., y col., 1997, Cell, vol. 89(3), págs. 349-356), pRb (Brehm, A., y col., 1998, Nature, vol. 391, págs. 597-601), receptores nucleares (Wong, J., y col, 1998, EMBO J., vol. 17(2), págs. 520-534) e YY1 (Yang, W.M., y col., 1997, J. Biol. Chem., vol. 272, págs. 28001-28007).

El papel de la HDAC en la proliferación celular

[00010] El estudio de inhibidores de las histonas desacetilasas indica que estas enzimas desempeñan un papel importante en la proliferación y diferenciación celulares. El inhibidor tricostatina A (TSA) (Yoshida, M., y col., 1990, J. Biol. Chem., vol. 265 (28), págs. 17174-17179) provoca la detención del ciclo celular tanto en la fase G1

como en la G2 (Yoshida, M., Beppu, T., 1988, Exp. Cell. Res., vol. 177, págs. 122-131), revierte el fenotipo transformado de diferentes líneas celulares e induce la diferenciación de células leucémicas de Friend y otras (Yoshida, M., y col., 1990, J. Antibiot. (Tokio), vol. 43(9), págs. 1101-1106). Se ha Informado de que la TSA (y SAHA) inhibe el crecimiento celular, induce la diferenciación terminal y previene la formación de tumores en ratones (Finnin y col., 1999, Nature, vol. 401, págs. 188-193). La detención del ciclo celular producida por la TSA está 25 correlacionada con una mayor expresión de gelsolina (Hoshikawa, Y., y col., 1994, Exp. Cell. Res., vol. 214(1), págs. 189-197), una proteína reguladora de actina que está regulada por disminución en cáncer de mama maligno (Mielnicki, L.M., y col., 1999, Exp. Cell. Res., vol. 249(1), págs. 161-176). Se han observado efectos similares en el ciclo y la diferenciación celulares con una serie de inhibidores de la desacetilasa (Kim y col., 1999, Oncogene, vol. 18(15), págs. 2461-2470).

[00011] La clara implicación de las HDAC en el control de la proliferación y diferenciación celulares sugiere que una actividad HDAC aberrante puede tener un papel en el cáncer. La demostración directa más importante de que las desacetilasas contribuyen al desarrollo del cáncer proviene del análisis de diferentes leucemias promielocíticas agudas (LPA). En la mayoría de los sujetos con LPA, una translocación de los cromosomas 15 y 17

(t(15; 17)) da como resultado la expresión de una proteína de fusión que contiene la porción N-terminal del producto génico PML unida a la mayoría de los RARa (receptor de ácido retinoico). En algunos casos, una translocación diferente (t(11; 17)) causa la fusión entre la proteína con dedos de cinc PLZF y el RARa. En ausencia de ligando, el RARa natural reprime... [Seguir leyendo]

1. Composición farmacéutica, que comprende:

(a) un inhibidor de la HDAC; y,

(b) meglumina;

en la que dicho inhibidor de la HDAC es un compuesto de la fórmula siguiente o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:

2. Composición farmacéutica, según la reivindicación 1, que comprende además ciclodextrina.

3. Composición farmacéutica, según la reivindicación 1 ó 2, en la que dicho inhibidor de la HDAC es:

4. Composición farmacéutica, según la reivindicación 2 ó 3, en la que dicha ciclodextrina se selecciona entre:

a-ciclodextrina; (3-ciclodextrina; y-ciclodextrina;

(alquilo Ci-4)-oc-clclodextrlna; (alquilo Ci-4)-|3-c¡clodextr¡na; (alquilo Ci-4)-y-clclodextrlna;

(hldroxi-alquilo Ci-4)-a-ciclodextr¡na; (hidroxi-alqullo Ci-4)-P-ciclodextrina; (hidroxi-alquilo Ci-4)-Y-ciclodextrina; (carboxi-alquilo Ci-4)-a-ciclodextrina; (carboxi-alquilo Ci-4)-P-ciclodextrina; (carboxi-alquilo Ci-4)-Y-ciclodextrina; éteres de sacárido de a-ciclodextrina; éteres de sacárido de p-ciclodextrina; éteres de sacárido de y-ciclodextrina;

sulfobutil éteres de a-ciclodextrina; p-ciclodextrina; y-ciclodextrina.

5. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que dicha meglumina es: meglumina libre o una sal farmacéuticamente aceptable de meglumina.

6. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que la relación molar entre meglumina y dicho inhibidor de la HDAC es de al menos 0,5.

7. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que la relación molar entre meglumina y dicho inhibidor de la HDAC es de 0,5 a 5.

8. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que es estéril y carece de pirógenos.

9. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, que es un líquido acuoso.

10. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, que comprende además: agua para inyección, solución salina acuosa, solución acuosa de glucosa, solución salina para inyección/infusión, glucosa para inyección/infusión, solución de Ringer o solución de Ringer lactada.

11. Composición farmacéutica, según la reivindicación 9 ó 10, que comprende dicho inhibidor de la HDAC a una 55 concentración de 100 a 1000 nM.

12. Composición farmacéutica, según la reivindicación 9 ó 10, que comprende dicho inhibidor de la HDAC a una concentración de 30 a 300 mg/ml.

13. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en la que dicha composición es adecuada para la administración parenteral a un paciente, adecuada para la administración a un paciente por inyección o adecuada para la administración a un paciente por infusión.

14. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, que es un sólido.

15. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, que se encuentra en forma de polvo, gránulos, comprimidos o liofilizado.

16. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, para usar en un método de 5 tratamiento del cuerpo humano o animal mediante terapia.

17. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, para usar en un método de tratamiento de una afección proliferativa.

18. Composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, para usar en un método de tratamiento del cáncer.

19. Utilización de una composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección proliferativa.

20. Utilización de una composición farmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento del cáncer.

21. Utilización de (a) un inhibidor de la HDAC y (b) meglumina, tal como se define en cualquiera de las 20 reivindicaciones 1 a 15, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección proliferativa.

22. Utilización de (a) un inhibidor de la HDAC y (b) meglumina, tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento del cáncer.