Una formulación de palivizumab acuosa y estable que comprende,

en un vehículo acuoso: (a) al menos 65 mg/ml de palivizumab o uno de sus fragmentos de unión a sus antígenos; (b) histidina 10 mM a 50 mM; y (c) menos de glicina 3 mM, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab de la formulación es estable 38ºC-42ºC, durante al menos 60 días, según se determina por cromatografía de exclusión por tamaños de alta resolución (HPSEC)

1. INTRODUCCIÓN

La presente invención se refiere a formulaciones líquidas de palivizumab o de uno de sus fragmentos que se une a antígenos, las cuales presentan estabilidad, niveles de fragmentación de anticuerpos bajos o no detectables, niveles de agregación bajos o no detectables y muy poca o ninguna pérdida de actividad biológica (por ejemplo, eficacia terapéutica) del palivizumab o de uno de sus fragmentos que se une a antígenos, incluso durante o después de largos periodos de conservación. En particular, la presente invención se refiere a formulaciones líquidas de palivizumab o de uno de sus fragmentos que se une a antígenos, las cuales están sustancialmente exentas de tensioactivos y/o sales inorgánicas. La presente invención se refiere también a métodos para prevenir, tratar o mejorar los síntomas asociados a una infección por el virus sincitial respiratorio (abreviadamente en lo sucesivo RSV por la expresión inglesa Respiratory Syncytial Virus) utilizando formulaciones líquidas de palivizumab o de uno de sus fragmentos que se une a antígenos.

2. FUNDAMENTO DE LA INVENCIÓN.

El virus sincitial respiratorio (RSV) es la causa principal de graves enfermedades de las vía respiratorias inferiores en bebés y niños (Feigen et al., eds., 1987, en Textbook of Pediatric Infectious Diseases, WB Saunders, Philadelphia, en las páginas 1653-1675; New Vaccine Development, Establishing Priorities, Vol. 1, 1985, National Academy Press, Washington DC, en las páginas 397-409; y Ruuskanen et al., 1993, Curr. Probl. Pediatr. 23:50-79). La naturaleza epidémica anual de la infección por el RSV es evidente en todo el mundo, pero la incidencia y la gravedad de la enfermedad por el RSV en una estación dada varía según las regiones (Hall, C.B., 1993, Contemp. Pediatr. 10:92-110). En regiones templadas del hemisferio norte, comienza generalmente a finales del otoño y termina a finales de la primavera (Hall, C.B., 1995, Mandell G.L., Bernnett J.E., Dolin R., eds., 1995, Principles and Practice of lnfections Diseases. 4th ed., Churchill Livingstone, New York, en las páginas 1501-1519). Se estima que la enfermedad por el RSV da como resultado 90.000 hospitalizaciones y provoca 4.500 muertes anualmente en Estados Unidos. La infección primaria por el RSV se presenta más frecuentemente en niños de 6 semanas a 2 años y con poca frecuencia en las primeras 4 semanas de vida durante epidemias intrahospitalarias (Hall et al., 1979, New Engl. J. Med. 300:393-396). Se estima que el RSV provoca tanto como el 75% de todas las bronquiolitis infantiles y hasta el 40% de todas las neumonías pediátricas (Cunningham, C.K. et al., 1991, Pediatrics 88:527-532). Los niños con mayor riesgo de infección por el RSV incluyen los bebés prematuros (Hall et al., 1979, New Engl. J. Med. 300:393-396) y los niños con displasia broncopulmonar (Groothuis et al., 1988, Pediatrics 82:199-203), cardiopatía congénita (MacDonald et al., New Engl. J. Med. 307:397-400), inmunodeficiencia congénita o adquirida (Ogra et al., 1988, Pediatr. Infect. Dis. J. 7:246-249; y Pohl et al., 1992, J. Infect. Dis. 165:166-169) y fibrosis quística (Abman et al., 1988, J. Pediatr. 113:826-830). El índice de mortalidad en bebés con enfermedad cardíaca o pulmonar que son hospitalizados con infección por el RSV es 3%-4% (Navas et al., 1992, J. Pediatr. 121:348-354).

El RSV infecta adultos así como bebés y niños. En adultos sanos, el RSV provoca predominantemente enfermedades de las vías respiratorias superiores. Recientemente se ha comprobado que algunos adultos, especialmente las personas mayores, tienen infecciones sintomáticas por el RSV más frecuentemente que lo que se había descrito anteriormente (Evans, A.S., eds., 1989, Viral Infections of Humans. Epidemiology and Control, 3rd ed., Plenum Medical Book, New York, páginas 525-544). También se han descrito varias epidemias entre los pacientes de residencias de ancianos y jóvenes adultos internados en establecimientos sanitarios (Falsey, A.R., 1991, Infect. Control Hosp. Epidemiol. 12:602-608; y Garvie et al., 1980, Br. Med. J. 281:1253-1254). Finalmente, el RSV puede provocar graves enfermedades en personas inmunodeprimidas, particularmente en pacientes con trasplante de médula ósea (Hertz et al., 1989, Medicine 68:269-281).

Las opciones de tratamiento de una enfermedad por el RSV establecida son limitadas. La enfermedad grave de las vías respiratorias inferiores por el RSV requiere con frecuencia un tratamiento de apoyo considerable, incluyendo la administración de oxígeno humidificado y asistencia respiratoria (Fields et al., eds, 1990, Fields Virology, 2nd ed., Vol. 1, Raven Press, New York, en las páginas 1045-1072). El único fármaco aprobado para el tratamiento de la infección es el agente antiviral ribavirina (American Academy of Pediatrics Committee on Infectious Diseases, 1993, Pediatrics 92:501504). Se ha demostrado que es eficaz en el tratamiento de neumonía y bronquiolitis por el RSV, modificando el curso de la enfermedad grave por el RSV en niños inmunocompetentes (Smith et al., 1991, New Engl. J. Med. 325:24-29). Sin embargo, la ribavirina tiene ciertas limitaciones que incluyen alto coste, necesidad de administración prolongada por aerosol y riesgo potencial para las mujeres embarazadas, así como para el personal sanitario expuesto a ella. The American Academy of Pediatrics Committee on Infectious Diseases revisó su recomendación de uso de la ribavirina. La recomendación actual es que la decisión de utilizar ribavirina debe basarse en las circunstancias clínicas particulares y en la experiencia del médico (American Academy of Pediatrics. Summaries of Infectious Diseases, en Pickering L.K., ed., 2000 Red Book: Report of the Committee on Infectious Diseases. 25th ed., Elk Grove Village, IL, American Academy of Pediatrics, 2000, pp. 483-487).

Aunque una vacuna podría prevenir la infección por el RSV, ninguna vacuna está autorizada hasta ahora para esta indicación. Un obstáculo importante para el desarrollo de la vacuna es la seguridad. Una vacuna inactivada con formalina, aunque inmunógena, provocó inesperadamente en bebés inmunizados una incidencia mayor y más grave de la enfermedad de las vías respiratorias inferiores debida al RSV, que en bebés inmunizados con una vacuna paragripal trivalente preparada de modo similar (Kim et al., 1969, Am. J. Epidemiol. 89:422-434; y Kapikian et al., 1969, Am. J. Epidemiol. 89:405-421). Varias vacunas candidatas contra el RSV han sido abandonadas y otras están en desarrollo (Murphy et al., 1994, Virus Res. 32:13-36), pero incluso si se resuelven los problemas de seguridad, debe mejorarse también la eficacia de la vacuna. Quedan por resolver varios problemas. Se requeriría la inmunización en el periodo neonatal inmediato puesto que la incidencia máxima de la enfermedad de las vías respiratorias inferiores se presenta a la edad de 2-5 meses. Puede esperarse que la inmadurez de la respuesta inmune neonatal junto con los altos títulos de anticuerpos contra el RSV adquiridos por vía materna reduzcan la inmunogenicidad de la vacuna en el periodo neonatal (Murphy et al., 1988, J. Virol. 62:3907-3910; y Murphy et al., 1991, Vaccine 9:185-189). Por último, la infección y enfermedad primaria por el RSV no protege bien contra la enfermedad subsiguiente por el RSV (Henderson et al., 1979, New Engl. J. Med. 300:530-534).

Actualmente, la única propuesta aprobada para la profilaxis de la enfermedad por el RSV es la inmunización pasiva. La prueba inicial que sugiere un papel protector para la IgG se obtuvo de las observaciones que implican anticuerpos maternos en hurones (Prime, G.A., Ph.D. diss., University of California, Los Angeles, 1975) y seres humanos (Lambrecht et al, 1976, J. lnfect. Dis. 134:211-217; y Glezen et al., 1981, J. Pediatr. 98:708-715). Hemming et al. (Morell et al., eds., 1986, Clinical Use of Intravenous lmmunoglobulins, Academic Press, London, en las páginas 285-294) reconocieron la posible utilidad de anticuerpos contra el RSV en el tratamiento o prevención de la infección por el RSV durante estudios que implicaban la farmacocinética de una inmunoglobulina intravenosa (abreviadamente en lo sucesivo IVIG por la expresión inglesa intravenous immnunoglobulin) en recién nacidos que se sospechaba que padecían septicemia neonatal. Estos autores observaron que un bebé, cuyas secreciones respiratorias proporcionaban el RSV, se recuperó rápidamente después de infusión de IVIG. Un análisis posterior del lote de IVIG reveló un título inusualmente alto de anticuerpo neutralizante del RSV. Este mismo grupo de investigadores examinó a continuación la capacidad de suero o inmunoglobulina hiperinmunes, enriquecidos por anticuerpo neutralizante del RSV, para proteger...

1. Una formulación de palivizumab acuosa y estable que comprende, en un vehículo acuoso: (a) al menos 65 mg/ml de palivizumab o uno de sus fragmentos de unión a sus antígenos; (b) histidina 10 mM a 50 mM; y (c) menos de glicina 3 mM, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab de la formulación es estable 38ºC-42ºC, durante al menos 60 días, según se determina por cromatografía de exclusión por tamaños de alta resolución (HPSEC).

2. La formulación de la reivindicación 1, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab está una concentración de al menos 70 mg/ml, al menos 75 mg/ml, al menos 80 mg/ml, al menos 85 mg/ml o al menos 90 mg/ml.

3. La formulación de la reivindicación 1, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab, está a una concentración de al menos 80 mg/ml.

4. La formulación de la reivindicación 2, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab está a una concentración de al menos 80 mg/ml.

5. La formulación de cualquier reivindicación precedente, sustancialmente exenta de tensioactivos y sales inorgánicas.

6. La formulación de cualquier reivindicación precedente, en donde dicha formulación está sustancialmente exenta de otros excipientes.

7. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde dicha formulación comprende además un excipiente distinto de un tensioactivo.

8. La formulación de la reivindicación 1, en donde la glicina está a una concentración de menos de 2 mM.

9. La formulación de cualquier reivindicación precedente, en donde la formulación no comprende manitol.

10. La formulación de cualquier reivindicación precedente, en donde la histidina está a una concentración de aproximadamente 25 mM y la glicina está a una concentración de 1,6 mM.

11. La formulación de la reivindicación 7, en donde el excipiente es un sacárido.

12. La formulación de la reivindicación 11, en donde el sacárido es sacarosa.

13. La formulación de la reivindicación 7, en donde el excipiente es un poliol distinto del manitol.

14. La formulación de la reivindicación 13, en donde el poliol es polisorbato.

15. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde dicha formulación tiene un pH de entre aproximadamente 5,5 a aproximadamente 7,0.

16. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-14, en donde dicha formulación tiene un pH de entre aproximadamente 5,5 a aproximadamente 6,5.

17. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-14, en donde la formulación tiene un pH de aproximadamente 6,0.

18. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab está a una concentración de al menos 100 mg/ml.

19. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-16, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab está a una concentración de al menos 125 mg/ml o al menos 150 mg/ml.

20. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab es estable a aproximadamente la temperatura ambiente durante al menos 1 año según se determina por HPSEC.

21. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab es estable a 4ºC durante al menos 3 años según se determina por HPSEC.

22. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde menos de 2% de dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab forma un agregado según se mide por HPSEC.

23. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde el vehículo acuoso es agua destilada.

24. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la formulación es estéril.

25. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones, en donde la formulación es homogénea.

26. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab está conjugado con un resto terapéutico.

27. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-25, en donde dicho palivizumab o fragmento que se une a antígenos de palivizumab está conjugado con un agente detectable.

28. Una forma farmacéutica de dosificación unitaria que comprende la formulación de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, la cual forma farmacéutica es adecuada para administración a un ser humano y está en un recipiente adecuado.

29. La forma farmacéutica de dosificación unitaria de la reivindicación 28, en donde la formulación es adecuada para administración parenteral a un ser humano.

30. La forma farmacéutica de dosificación unitaria de la reivindicación 28, en donde la formulación es adecuada para administración subcutánea, intravenosa, intramuscular o intranasal.

31. La forma farmacéutica de dosificación unitaria de la reivindicación 28, en donde la formulación es adecuada para administración por aerosol a un ser humano y está en un recipiente adecuado.

32. Un recipiente herméticamente cerrado que comprende la formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-27.

33. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-26, para uso en la prevención de una infección por el virus sincitial respiratorio (RSV) o uno de sus síntomas en un sujeto.

34. La formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-26 para uso en el tratamiento de una infección por el RSV o uno de sus síntomas en un sujeto.

35. La formulación de la reivindicación 27, para uso en el diagnóstico de una infección por el RSV.

36. La formulación de la reivindicación 27, para uso en el diagnóstico de una infección por el RSV en un sujeto.

37. La formulación de la reivindicación 33, 34 o 36, en donde el sujeto es un ser humano.

38. Uso de la formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-26, en la fabricación de un medicamento para uso en la prevención de una infección por el RSV o uno de sus síntomas en un sujeto.

39. Uso de la formulación de una cualquiera de las reivindicaciones 1-26, en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de una infección por el RSV o uno de sus síntomas en un sujeto.

40. Uso de la formulación de la reivindicación 27, en la fabricación de un medicamento para uso en el diagnóstico de una infección por el RSV.

41. Uso de la formulación de la reivindicación 27, en la fabricación de un medicamento para uso en el diagnóstico de una infección por el RSV en un sujeto,

42. El uso de la formulación de la reivindicación 33, 39 o 41, en donde el sujeto es un ser humano.

5 43. La formulación de la reivindicación 33 o 34, en donde el sujeto es un niño, un niño nacido prematuramente, un anciano, un ser humano con fibrosis quística, displasia broncopulmonar, enfermedad cardiaca congénita, inmunodeficiencia congénita

o adquirida o un ser humano que ha tenido una trasplante de médula ósea.

44. Uso de la formulación de la reivindicación 38 o 39, en donde en donde el sujeto es un bebé, un bebé nacido prematuramente, un anciano, un ser humano con fibrosis quística, displasia broncopulmonar, enfermedad cardiaca congénita, inmunodeficiencia congénita o adquirida o un ser humano que ha tenido una trasplante de médula ósea.

45. La formulación de la reivindicación 33, para uso en la prevención de una 15 infección por el RSV o uno de sus síntomas antes de, o durante, la estación del RSV.

46. La formulación de la reivindicación 34, para uso en el tratamiento de una infección por el RSV o un de sus síntomas antes de, o durante, la estación del RSV.