DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS MEDIANTE EXTINCION DE FLUORESCENCIA.

Resumen: SE DESCRIBE UN OLIGONUCLEOTIDO DETECTOR QUE PRESENTA UNA SECUENCIA QUE FORMA UNA ESTRUCTURA SECUNDARIA DE FORMA INTRAMOLECULAR DE BASES EMPAREJADAS, PARA SU USO EN LA DETECCION DE SECUENCIAS DIANA DE ACIDO NUCLEICO Y EN LA AMPLIFICACION DE LA SECUENCIA DIANA. EL OLIGONUCLEOTIDO DETECTOR ESTA ADEMAS MODIFICADO MEDIANTE LA UNION DE DOS TINTES QUE FORMAN UN PAR DE TINTES DE DONADOR/ACEPTOR. LOS DOS TINTES ESTAN COLOCADOS SOBRE EL OLIGONUCLEOTIDO DETECTOR DE TAL FORMA QUE SE ENCUENTRAN EN UNA CERCANA PROXIMIDAD ESPACIAL EN LA ESTRUCTURA SECUNDARIA PLEGADA DE BASES EMPAREJADAS, PROVOCANDO CON ELLO LA EXTINCION DE LA FLUORESCENCIA DEL DONADOR. EL OLIGONUCLEOTIDO DETECTOR PUEDE INCLUIR ADEMAS OPCIONALMENTE UN SITIO DE RECONOCIMIENTO PARA UNA ENDONUCLEASA DE RESTRICCION (RERS) QUE SE MANTIENE PARCIAL O COMPLETAMENTE MONOCATENARIO EN LA ESTRUCTURA SECUNDARIA DE BASES EMPAREJADAS. EL RERS ESTA FLANQUEADO POR LOS DOS TINTES. EN PRESENCIA DE LA DIANA, LA ESTRUCTURA SECUNDARIA DE BASES EMPAREJADAS ESTA SIN PLEGAR O LINEALIZADA, AUMENTANDO LA DISTANCIA ENTRE LOS TINTES DONADORES Y ACEPTORES, Y PROVOCANDO UN CAMBIO EN LA FLUORESCENCIA DEL DONADOR Y/O ACEPTOR. SI SE ENCUENTRA PRESENTA UN RERS, SE CONVIERTE EN BICATENARIO EN PRESENCIA DE LA DIANA, PERMITIENDO LA ESCISION O CORTE POR UNA ENDONUCLEASA DE RESTRICCION, Y LA SEPARACION DE LOS DOS TINTES EN FRAGMENTOS DE ACIDO NUCLEICO SEPARADOS. ESTO PUEDE CONTRIBUIR ADEMAS A LA MAGNITUD DEL CAMBIO EN LA FLUORESCENCIA.

Solicitante: BECTON, DICKINSON AND COMPANY

Nacionalidad: US

Inventor/es: NADEAU, JAMES G.. PITNER, BRUCE, J.. LINN, PRESTON, C.. SCHRAM, JAMES L

Fecha de Publicación de la Concesión: 01/05/2007

Fecha Concesión Europea: 04/10/2006

Clasificación Principal: C12Q1/68

Clasificación PCT: C12Q1/68