Compuesto éster de fluoresceína marcado con 13C o una sal del mismo,

que resulta de una reacción de un ácido marcado con 13C con fluoresceína en uno o ambos grupos hidroxilo en las posiciones 3'' y 6'' para formar un enlace éster

Agentes de diagnóstico para la función exocrina pancreática.

Antecedentes de la invención

La presente invención se refiere a nuevos compuestos que resultan útiles como agentes de diagnóstico para la función exocrina pancreática y a la utilización de los mismos.

Los "ensayos de la función exocrina pancreática" resultan útiles para el diagnóstico de enfermedades pancreáticas tales como la pancreatitis crónica y aguda y el cáncer pancreático. También resultan útiles para evaluar el estado y el pronóstico de los pacientes y para controlar la medicación. Se encuentran descripciones generales en Arvanitakis y Cooke, Gastroenterology 74:932, (1978); Niederau y Grendell, Gastroenterology 88:1973, (1985); Goldberg, Bull. Mol. Biol. Med. 15:, (1990); Lankisch, Int. J. Pancreatology 14:9, (1993); Bank y Chow, Gastroenterologist 2:224, (1994), y Steer et al., New Eng. J. Med. 332:1482, (1995).

En la actualidad, el "estándar de oro" del ensayo de función exocrina pancreática implica insertar un tubo a través de la boca y el duodeno para recoger los jugos duodenales. Generalmente se utiliza el ensayo de la secretina, en el que se administra secretina por vía intravenosa para estimular la secreción del jugo pancreático antes de la recolección. Este método es muy exacto, debido a que la cantidad y componentes del jugo pancreático se analizan directamente. Sin embargo, este método no puede utilizarse repetidamente ni utilizarse para el cribado debido al estrés muy fuerte producido en el paciente. Únicamente se encuentra disponible en un número relativamente reducido de centros médicos que presentan médicos altamente experimentados. Además, debido a que dicho método requiere introducir un tubo fluoroscópico durante la recolección del jugo duodenal, existe el problema de la exposición a rayos X.

Por otra parte, se utiliza clínicamente un ensayo para cuantificar los enzimas pancreáticos exocrinos del páncreas que alcanzan la sangre para el cribado de las enfermedades pancreáticas (manual Merck, 16^a edición). Sin embargo, el incremento de los enzimas pancreáticos exocrinos en la sangre únicamente se observa en la etapa inicial de la pancreatitis aguda o en la etapa de recrudescencia de la pancreatitis crónica y no refleja en todos los casos la capacidad del páncreas de secretar enzimas pancreáticos exocrinos. Además, el incremento de los enzimas pancreáticos exocrinos en la sangre en ocasiones puede no detectarse debido a la turbidez del suero en la pancreatitis acompañada de hiperlipidemia.

De acuerdo con lo expuesto anteriormente, se utilizan métodos simples que no requieren la inserción de un tubo para ensayos repetidos y de cribado. Uno de dichos métodos es el ensayo del pancreolaurilo (PLT), en el que se administra oralmente el sustrato sintético FDL (dilaurato de fluoresceína, dilaurilfluoresceína) para la colesterol éster hidrolasa, esterasa, secretada por el páncreas, se espera a la acumulación de orina durante 10 horas, y se mide a continuación la cantidad del producto de degradación fluoresceína excretado en la orina (patente US nº 3.917.812; Barry et al., Lancet, 2 de octubre, página 742, (1982); Scharpe e Iliano, Clin. Chem. 33:5, (1987). Sin embargo, este método requiere un periodo de tiempo prolongado para llevar a cabo el ensayo y por lo tanto no puede llevarse a cabo con frecuencia en pacientes ambulatorios y no resulta adecuado durante los exámenes físicos.

Bajo dichas circunstancias, existe la necesidad de desarrollar un método simple para someter a ensayo la función exocrina pancreática que suponga poco estrés para el paciente y que proporcione resultados exactos rápidamente.

Por otra parte, recientemente se ha considerado la utilización del ensayo de ¹³C en el aliento, en el que se administra almidón marcado con ¹³C, para la función exocrina pancreática: Hiele et al., Gastroenterology 96:503, (1989); Dewit et al., Pediatric Res. 32:45, (1992), y Z. Gastroenterol. 35:187, (1997). En el tracto entérico, el almidón es degradado eficientemente a glucosa por el corte de cualquier enlace a-1,4-glucósido interno por la a-amilasa secretada por el páncreas y por la acción de enzimas tales como la a-glucosidasa (maltasa) de las células epiteliales mucosales del intestino delgado, y resulta absorbido: Essentials of Human Metabolism, 2^a edición, W.C. McMurray, Harper & Row Publishers, NY. El ensayo de ¹³C en el aliento, en el que se administra almidón marcado con ¹³C, aprovecha el fenómeno de que, tras degradarse el almidón marcado con ¹³C en el tracto digestivo, resulta absorbido y descarboxilado por la acción metabólica en el cuerpo, generando ¹³CO₂, que se excreta en el aliento, y resulta un método seguro y simple. Sin embargo, todavía no se ha estudiado ningún oligosacárido o polisacárido marcado con ¹³C que no sea almidón marcado con ¹³C.

Debido a que existe una a-glucosidasa (maltasa) en las células epiteliales mucosales del intestino delgado que corta un enlace a-1,4-glucósido terminal no reductor (Enzyme Handbook, Springer-Verlag, Berlin), el almidón se degrada en glucosa secuencialmente desde el extremo terminal no reductor y resulta absorbido únicamente por la acción de enzimas tales como la a-glucosidasa (maltasa), incluso sin la acción de la a-amilasa. De esta manera, el almidón resulta sometido a la acción de un enzima a-glucosidasa (maltasa) no pancreático-exocrino de las células epiteliales mucosales del intestino delgado y, por lo tanto, el ensayo de aliento de almidón marcado con ¹³C no refleja únicamente la función exocrina pancreática. De acuerdo con lo expuesto anteriormente, resultaría más preferido seleccionar un compuesto sustrato específico para la a-amilasa presente en el tracto digestivo.

La patente US nº 3.786.140 da a conocer una composición diagnóstica para la determinación de la actividad de los enzimas pancreáticos en el cuerpo humano in vivo y un método para llevar a cabo este examen de la función exocrina pancreática. Esta nueva composición diagnóstica comprende un monoéster de fluoresceína con un ácido graso que presenta entre 8 y 16 átomos de carbono en un portador farmacéutico. Este nuevo método para examinar la función exocrina pancreática se lleva a cabo introduciendo y haciendo pasar una cantidad predeterminada de un monoéster de ácido graso-fluoresceína por el tracto gastrointestinal, después se recoge la orina o una parte del suero sanguíneo y la cantidad de fluoresceína liberada contenida en la orina o en el suero sanguíneo se determina analíticamente. La patente US nº 3.786.140 da a conocer que la fluoresceína puede analizarse cuantitativamente de manera fotométrica o fluorimétrica.

La patente US nº 3.917.812 da a conocer composiciones diagnósticas que contienen ésteres de ácido carboxílico de fluoresceína que comprenden una cápsula de gelatina dura que contiene: (a) un granulado, y (b) una fase externa que circunda al granulado, en la que el granulado comprende un éster de ácido carboxílico de fluoresceína, carboximetil-amilopectina sódica, celulosa microcristalina y polivinilpirrolidona y la fase externa comprende estearato de magnesio, talco y lactosa, proporciona formas de administración particularmente eficaces de dichos ésteres de fluoresceína en la determinación de los enzimas pancreáticos.

La patente GB nº 2251381 da a conocer una composición diagnóstica emulsionada para detectar la insuficiencia pancreática que comprende una fase aceite dispersada en una fase acuosa continua, presentando la fase aceite disuelta en la misma un éster de diácido graso de fluoresceína, por ejemplo se disuelve dilaurato de fluoresceína en aceite de coco y se convierte en una emulsión de aceite en agua en presencia de manitol, rindiendo una composición que se administra oralmente. En el ensayo diagnóstico se excretan fluoresceína y manitol en la orina y la proporción entre la fluoresceína y manitol recuperados permite la detección de la insuficiencia pancreática sin necesidad de experimentos de control.

De acuerdo con lo expuesto anteriormente, un objetivo de la presente invención consiste en proporcionar un agente de diagnóstico para la función exocrina pancreática que conduzca a un ensayo de la función exocrina pancreática que produzca un nivel reducido de estrés en el paciente y que proporcione los resultados en un periodo corto de tiempo.