Procedimientos y composiciones para aislar, identificar y caracterizar mutaciones tolerantes a herbicidas de ACCasa plastídica de monocotiledónea usando un sistema modelo.

Un procedimiento de producción de una enzima acetil-CoA carboxilasa (ACCasa) que es tolerante a al menos un herbicida,

que comprende:

a. proporcionar una levadura deficiente en ACCasa que comprende un ácido nucleico que codifica una ACCasa quimérica, comprendiendo dicha ACCasa quimérica una región N-terminal y una región Cterminal, en el que la región C-terminal comprende una región de sensibilidad a herbicidas (HSR) de una ACCasa plastídica de monocotiledónea de una Poaceae;

b. poner en contacto dicha levadura con al menos un oligonucleótido mutagénico en condiciones que permitan la mutagénesis dirigida al sitio de al menos un codón del ácido nucleico que codifica la ACCasa quimérica, y hacer crecer la levadura mutagenizada formando de este modo una biblioteca de colonias de levadura mutagenizadas;

c. cultivar las colonias de levadura mutagenizadas en presencia de al menos un herbicida inhibidor de ACCasa para formar colonias tratadas; y

d. aislar de al menos una de dichas colonias tratadas, al menos una levadura mutagenizada que crece en presencia del herbicida, en el que la levadura mutagenizada que crece en presencia del herbicida comprende una ACCasa mutagenizada que tiene una tolerancia al herbicida que es mayor que la exhibida por la ACCasa quimérica de la etapa (a):

en el que el procedimiento es un procedimiento de alto rendimiento en el que un trabajador capacitado puede generar y seleccionar al menos 500 diferentes ACCasas con HSR variante por mes, cada una de su propia colonia celular.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2012/064831.

Solicitante: BASF SE.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: Carl-Bosch-Strasse 38 67056 Ludwigshafen am Rhein ALEMANIA.

Inventor/es: WHITT,Sherry R, NEUTEBOOM,LEENDERT W, MCELVER,JOHN, PAULIK,JILL MARIE, MANKIN,S. LUKE.

Fecha de Publicación: 8 de Mayo de 2019.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N15/82 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › para células vegetales.
C12N9/00 C12N […] › Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas.
C12N9/88 C12N […] › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Liasas (4.).

PDF original: ES-2736998_T3.pdf

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